GB/T 36789-2018动物狂犬病病毒核酸检测方法

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T36789—2018

动物狂犬病病毒核酸检测方法

Nucleicaciddetectionofanimalrabiesvirus

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T36789—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位军事医学科学院军事兽医研究所

:。

本标准主要起草人冯烨郭焕成许运斌江禹涂长春

:、、、、。

Ⅰ

GB/T36789—2018

引言

本文件的发布机构提请注意声明符合本文件时可能涉及与套式检测方法相关的专

,,4.4RT-PCR

利的使用

。

本文件的发布机构对于该专利的真实性有效性和范围无任何立场

、。

该专利持有人已向本文件的发布机构保证他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下

,,

就专利授权许可进行谈判该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案相关信息可以通过以下

。。

联系方式获得

:

专利持有人姓名江禹涂长春

:、

地址吉林省长春市净月经济开发区柳莺西路号军事医学科学院军事兽医研究所

:666

请注意除上述专利外本文件的某些内容仍可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专

,。

利的责任

。

Ⅱ

GB/T36789—2018

动物狂犬病病毒核酸检测方法

1范围

本标准规定了检测动物狂犬病病毒核酸的套式和荧光定量方法

RT-PCRRT-PCR。

本标准适用于临床疑似狂犬病病毒感染动物脑组织脊髓脑脊液唾液腺唾液以及狂犬病病毒细

、、、、

胞培养物中病毒核酸的检测参见附录

(A)。

2缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

反转录聚合酶链式反应

RT-PCR:-(Reverse-TranscriptionPolymeraseChainReaction)

脱氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

核糖核酸

RNA:(RibonucleicAcid)

焦炭酸乙二酯

DEPC:(Diethypyocarbonate)

磷酸盐缓冲液

PBS:(PhosphateBufferSolution)

值达到阈值的循环数

Ct:(CycleThreshold)

乙二胺四乙酸

EDTA:(EthyleneDiaminetetraaceticAcid)

三磷酸脱氧核糖核苷

dNTP:(Deoxy-RibonucleosideTriphosphate)

Taq酶耐热聚合酶

:DNA(ThermusAquaticusPolymerase)

3器材和试剂

31器材

.

311仪器

..

级生物安全柜离心机冰箱冰柜分析天平扩增仪荧光定量

II、4℃、(-20℃)、(4℃)、、PCR、PCR

扩增仪电泳仪电泳槽紫外凝胶成像仪或紫外分析仪微波炉震荡混匀器组织研磨器单道可调

、、、()、、、、

移液器

(10μL、200μL、1000μL)。

312耗材

..

手术剪医用镊子称量纸棉签琼脂糖量筒锥形瓶一次性无枪头

、、、、、(500mL)、(500mL)、RNase

无离心管与荧光定量扩增仪配套的管

(10μL,200μL,1000μL)、RNase(1.5mL)、PCRPCR

组织研磨棒

(0.2mL)、。

32试剂

.

321总提取试剂

..RNA。

322磷酸盐缓冲液配制方法见附录

..(1mol/LPBS,pH7.4)。B。

323电泳缓冲液配制方法见附录

..TAE。B。

324其他试剂反转录酶