标准解读
《GB/T 35900.2-2018 动物流感检测 第2部分:H3亚型流感病毒核酸荧光RT-PCR检测方法》是一项国家标准,主要针对动物中H3亚型流感病毒的核酸检测提供了一种基于实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的技术方案。该标准详细规定了从样本采集、处理到最终结果分析的全过程,旨在为相关实验室提供一套标准化的操作流程,以确保检测结果的准确性和可比性。
在样品准备阶段,标准明确了不同类型样本(如咽拭子、鼻腔分泌物等)的收集方法及其保存条件,强调了正确采样对于后续实验成功的重要性。此外,还介绍了如何使用特定试剂盒对样品进行RNA提取的过程,并指出了操作过程中需要注意的关键点。
关于RT-PCR扩增反应部分,《GB/T 35900.2-2018》给出了详细的反应体系组成及循环参数设置指南。它推荐使用特异性引物和探针来识别H3亚型流感病毒特有的基因序列,通过荧光信号的变化来监测目标DNA片段随温度循环而发生的扩增情况。这部分内容还包括了对照实验的设计原则,比如阳性对照、阴性对照以及内参的选择与应用,这些都是保证实验可靠性的基础。
最后,在结果分析环节,本标准定义了Ct值的概念,并根据Ct值大小判断样品是否含有H3亚型流感病毒。同时,也提到了数据记录的要求,包括原始数据的保存形式以及报告编写时应包含的信息项目,帮助实验人员系统地整理并呈现研究成果。
该文件不仅适用于科研机构开展动物流感相关的研究工作,也为兽医临床诊断提供了技术支持。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2018-02-06 颁布
- 2018-09-01 实施
文档简介
ICS11220
B41.
中华人民共和国国家标准
GB/T359002—2018
.
动物流感检测第2部分H3亚型流感
:
病毒核酸荧光RT-PCR检测方法
Animalinfluenzadetection—Part2Methodofreal-timeRT-PCRfor
:
thedetectionofH3subtypeinfluenzavirus
2018-02-06发布2018-09-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
中华人民共和国
国家标准
动物流感检测第2部分H3亚型流感
:
病毒核酸荧光RT-PCR检测方法
GB/T35900.2—2018
*
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲号
2(100029)
北京市西城区三里河北街号
16(100045)
网址
:
服务热线
:400-168-0010
年月第一版
20182
*
书号
:155066·1-59534
版权专有侵权必究
GB/T359002—2018
.
前言
动物流感检测目前分为个部分
GB/T35900《》3:
第部分亚型流感病毒核酸荧光检测方法
———1:H1RT-PCR;
第部分亚型流感病毒核酸荧光检测方法
———2:H3RT-PCR;
第部分和亚型流感病毒核酸双重荧光检测方法
———3:H1H3RT-PCR。
本部分为的第部分
GB/T359002。
本部分按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本部分由中华人民共和国农业部提出
。
本部分由全国动物卫生标准化技术委员会归口
(SAC/TC181)。
本部分起草单位中华人民共和国北京出入境检验检疫局
:。
本部分主要起草人刘环乔彩霞蒲静张伟高志强谷强张鹤晓张利峰韩晶
:、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T359002—2018
.
引言
本文件的发布机构提请注意声明符合本文件时可能涉及到本文件与检测和亚型
,,4.1.8“H1H3
流感病毒的核苷酸序列和试剂盒相关的专利的使用
”。
本文件的发布机构对于该专利的真实性有效性和范围无任何立场
、。
该专利持有人已向本文件的发布机构保证他愿意向任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下
,,
就专利授权许可进行谈判该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案相关信息可以通过以下
。。
联系方式获得
:
专利持有人中华人民共和国北京出入境检验检疫局
:。
地址北京市朝阳区甜水园街号
:6。
请注意除上述专利外本文件的某些内容仍可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专
,。
利的责任
。
Ⅱ
GB/T359002—2018
.
动物流感检测第2部分H3亚型流感
:
病毒核酸荧光RT-PCR检测方法
1范围
的本部分规定了亚型流感病毒核酸的荧光操作方法
GB/T35900H3RT-PCR。
本部分适用于禽猪和马及其产品中亚型流感病毒核酸的检测
、H3。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
禽流感病毒通用荧光检测方法
GB/T19438.1—2004RT-PCR
实验室生物安全通用要求
GB19489
3缩略语
下列缩略语适用于本文件
。
荧光实时荧光反转录聚合酶链反应
RT-PCR(real-timereversetranscriptpolymerasechainre-
action)
Ct或Cp值每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环数
()(cyclethreshold,or
crossingpoint)
互补
cRNARNA(complementRNA)
焦碳酸二乙酯
DEPC(diethylpyrocarbonate)
羧基荧光素
FAM(carboxyfluorescein)
小沟结合物
MGB(minorgroovebinder)
磷酸盐缓冲液
PBS(phosphatebuffersaline)
核糖核酸
RNA(ribonucleicacid)
4试
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