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浓盐酸预处理木质纤维素与
离子液体中预处理木质纤维素报告人:于广益时间:2013.9.26DNS试剂配制与标准曲线的测定将6.3克DNS和262ml2mol/L氢氧化钠,加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加水定容到1000ml,即制成3,5-二硝基水杨酸试剂,贮于棕色瓶中备用。DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故DNS方法适合用在多糖(如纤维素、半纤维素和淀粉等)水解产生的多种还原糖体系中。分别取葡萄糖标准液(1mg/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于50ml比色管管中,用蒸馏水补足至2.0ml,分别准确加入DNS试剂1.5ml,沸水浴加热5min,流水冷却,用水补足到25ml刻度。在520nm波长下测定吸光度。DNS试剂配制与标准曲线的测定试样123456取样0.10.20.30.40.60.8吸光度0.1630.3180.4660.5310.8340.904Y=-0.00832+0.65995XR=0.99991X:吸光度Y:糖浓度DNS试剂配制与标准曲线的测定
(补充)波长500nm510nm520nm530nm540nm浓度(0.8g/L)1.4841.2351.0011.0930.845浓度(0.4g/L)0.9160.8460.7680.6990.574最终选取520-540nm作为测试波长浓盐酸预处理木质原料:36%-38%浓盐酸100ml,秸秆(取自蒸汽爆破后)2g反应容器:密闭锥形瓶加热方式:水浴参考文献:专利:HYDROLYSISOFLIGNOCELLULOSEMATERIALSWITHCONCENTRATEDHYDROCHLORICACID--CA738946A常温下浓盐酸预处理木质时间15min30min60min2h24h48h64h取样0.1ml吸光度0.3240.5810.6320.6390.6980.9820.816得糖率9.25%16.88%18.39%18.60%20.35%28.79%26.5%45℃下浓盐酸预处理木质时间··15min30min60min2h24h48h64h取样0.1ml0.05ml吸光度0.5790.6120.6320.6390.515得糖率16.82%17.80%24.90%26.65%30.01%75℃下浓盐酸预处理木质时间··15min30min60min2h24h48h72h取样0.1ml吸光度0.9541.0200.152得糖率27.96%29.92%4.14%离子液体中预处理木质纤维素制备离子液体[BMIM]Br,真空干燥后待用。纤维素酶:由木霉代谢产生的固体粉末,能水解天然纤维素,生成纤维寡糖,纤维二糖和葡萄糖活性:5万U/g(1min水解底物产生1ug葡萄糖的酶量为一个酶活力单位)反应条件:温度50℃,pH=4.8加热方式:水浴正常酶解木质纤维素秸秆0.9836g酶1.0385gpH5.013水50ml时间min吸光度得糖率100.2045.78%200.37610.97%300.40611.88%600.62818.58%900.87526.04%1500.49714.63%离子液体中酶解纤维素秸秆2.0015g酶1.0385gpH5.613水110ml时间min吸光度得糖率100.004-0.59%300.0562.99%600.0583.12%14400.49716.82%水性离子液体中酶解木质纤维素秸秆2.0015g酶1.0385gpH5.613水130ml离子液体15ml时间min
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