标准解读
《GB/T 33120-2016 梨疱状溃疡类病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准,主要针对梨树上可能出现的疱状溃疡类病毒进行检测和鉴定。该标准详细规定了从样品采集到最终结果分析的一系列步骤,适用于进出口贸易中以及国内种植区域间调运时对梨树及其繁殖材料(如接穗、砧木等)是否感染此类病毒的检疫工作。
首先,在样品准备阶段,需要按照特定要求选取健康或疑似患病的植株部分作为测试样本。接着是核酸提取过程,采用高效且可靠的生物化学技术从植物组织中分离出总RNA或DNA。随后通过RT-PCR或其他分子生物学手段扩增目标序列,并利用凝胶电泳等方法观察特异性条带的存在与否来判断样品是否含有梨疱状溃疡类病毒。
此外,为了确保实验结果准确无误,《GB/T 33120-2016》还特别强调了实验室条件控制的重要性,包括但不限于使用阳性对照品验证反应体系的有效性、设置空白对照排除污染可能性等措施。同时,对于如何记录数据、保存原始资料也有明确规定,以保证整个检测流程透明可追溯。
最后,在报告编写方面,该标准指出应包含所有关键信息,比如样品来源、处理日期、所用试剂批号及仪器型号等,以便于后续查询与复核。通过遵循这一系列严格的操作指南,可以有效地识别并隔离携带梨疱状溃疡类病毒的植株,从而保护我国乃至全球范围内的梨产业免受侵害。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2016-10-13 颁布
- 2017-05-01 实施
文档简介
ICS6502001
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T33120—2016
梨疱状溃疡类病毒检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofPearblistercankerviroid
2016-10-13发布2017-05-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T33120—2016
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任
。。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中华人民共和国湖北出入境检验检疫局中华人民共和国中山出入境检验检疫
:、
局中华人民共和国新疆出入境检验检疫局中华人民共和国云南出入境检验检疫局中华人民共和国
、、、
山东出入境检验检疫局中华人民共和国检验检疫科学研究院华中农业大学植物科技学院
、、。
本标准主要起草人王振华陈定虎叶芸徐文兴徐家文曾宪东徐雪张永江王翀李旻王英超
:、、、、、、、、、、、
吴兴海
。
Ⅰ
GB/T33120—2016
梨疱状溃疡类病毒检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了梨疱状溃疡类病毒的检疫鉴定方法
。
本标准适用于进出境梨树种苗组培苗及植株中梨疱状溃疡类病毒的检疫和鉴定
、。
2梨疱状溃疡类病毒基本信息
学名Pearblistercankerviroid
:。
缩写
:PBCVd。
异名梨泡斑类病毒
:。
分类地位马铃薯纺锤块茎类病毒科Posiviroidae苹果锈皮类病毒属Ascaviroid
:(p),(p)。
传播途径通过嫁接芽接和刀具机械传播但没有有关介体及种子传毒的报道远距离通过种苗
:、,。
调运传播
。
梨疱状溃疡类病毒的其他信息参见附录
A。
3方法原理
根据梨疱状溃疡类病毒全长核酸链中的保守区域设计了一对扩增该类病毒全长核酸的引
RNA
物进行扩增和序列测定根据梨疱状溃疡类病毒全长核酸序列设计与正单链互补的单
,RT-PCR;RNA
链探针通过杂交信号强弱进行结果判定
RNA,。
4仪器设备和主要试剂
41仪器设备
.
超净工作台灭菌锅制冰机高速冷冻离心机超低温冰箱常规冰箱涡旋振荡器微量进样器垂
、、、、、、、、
直电泳槽仪凝胶成像系统杂交炉交联仪杂交管化学发光检测仪等
、PCR、、、、、。
42主要试剂
.
除另有规定外所有试剂均为分析纯试剂见附录分子杂交试剂见附录
,。RT-PCRB;C。
5症状观察
取样品量若样品少可适量增大比例的种苗进行检查检查梨疱状溃疡类病毒侵染症
1%~5%()。
状树皮上形成疱状物或树皮开裂
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