生化药物分析概论

赵春杰沈阳药科大学药分教研室第十三章生化药物分析概论主要内容概述质量检验的基本程序与方法常用定量分析方法及其应用生化药物:系指从动物、植物及微生物提取的，也可用生物-化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质及其衍生物、降解物及大分子的结构修饰物等，如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、多糖、脂质、核苷酸类等。一、概述种类:1．氨基酸、多肽与蛋白质类药物（1）氨基酸及其衍生物：单氨基酸、氨基酸衍生物和复合氨基酸类。（2）药用活性多肽：消化道多肽、下丘脑多肽、脑多肽、激肽和其他肽类等。一、概述（3）药用蛋白：猪或牛的纤维蛋白原、纤维蛋白、水蛭素等；属蛋白质类的激素有生长素、甲状旁腺素、催乳素；属植物来源的蛋白类药物有植物凝集素、天花粉蛋白等。2.酶类与辅酶类药物按其功能可分为：助消化酶类、蛋白水解酶类、凝血酶及抗栓酶、抗肿瘤酶类和其他酶类等；还包括部分辅酶类（辅酶Q10）等。另外，一部分辅酶也属于核酸类。一、概述3.多糖类药物包括肝素、硫酸软骨素A和C、硫酸角质素、透明质酸等。类肝素（酸性粘多糖）、壳聚多糖、灵芝多糖、黄芪多糖、人参多糖、海藻多糖、螺旋藻粘多糖等。4.脂质类药物包括多价不饱和脂肪酸（PUFA）、磷脂类、固醇类、胆酸类和卟啉类等。一、概述5.核酸及其降解物和衍生物类药物如RNA（包括iRNA-免疫核糖核酸）、DNA（脱氧核糖核酸）、多聚胞苷酸、巯基聚胞苷酸、ATP和cAMP等。此外，有核酪制剂，6-巯基嘌呤核苷、6-巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶、呋喃氟尿嘧啶、阿糖腺苷、环胞苷、5-氟环胞苷、5-碘苷和无环鸟苷等。一、概述特点:共同特点分子量大结构确证难全过程的质量控制生物活性检查安全性检查效价（含量）测定生化药物和基因工程药物生物活性质量控制特点一、概述一．鉴别实验（一）理化鉴别法

1．化学鉴别法

2．紫外分光光度法

3．高效液相色谱法（二）生化鉴别法

1．酶法

2．电泳法

3．样品脱盐后用等电点聚焦法测定（三）生物鉴别法二、质量检验的基本程序与方法二.杂质检查（一）一般杂质检查（二）特殊杂质检查

1．原料药的纯度分析（1）多糖类（2）酶类药物

2．生产过程中杂质的检查二、质量检验的基本程序与方法三.安全性检查（一）热源检查法和细菌内毒素检查法（二）异常毒性试验（三）过敏试验（四）降压物质试验（五）无菌试验（六）基因工程药物中可能杂质与污染物检查（七）致突变试验（八）生殖毒性试验二、质量检验的基本程序与方法四.含量(效价)测定（一）含量测定

1．HPLC法

2．十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS法）（二）效价测定二、质量检验的基本程序与方法一．理化分析法（一）化学分析法

1．重量法（1）

提取法（2）

挥发法（3）

沉淀法

2．滴定分析法（二）电化学分析法（三）光谱分析法

1．比色法

2．紫外分光光度法

3．荧光分光光度法三、常用定量分析方法及其应用（四）色谱分析法

1．高效液相色谱法（HPLC）（1）反相高效液相色谱法(RP-HPLC)

（2）高效离子交换色谱法(HPIEC)

（3）高效凝胶过滤色谱法（4）应用

2．灌注色谱法

3.高效毛细管电泳法(HPCE)三、常用定量分析方法及其应用二、酶法（一）酶活力测定法1．基本概念2．酶促反应的条件及影响因素（1）

底物浓度的影响（2）

PH的影响（3）

温度的影响（4）

辅助因子的影响（5）

空白和对照试验三、常用定量分析方法及其应用3．测定方法（1）取样测定法（2）连续测定法（3）检测方法4．讨论（二）酶分析法

1．动力学分析法

2．总变量分析法（三）酶法应用示例

1．胰蛋白酶效价测定

2.胃蛋白酶的活力测定三、常用定量分析方法及其应用三、电泳法（一）电泳法的基本原理和分类（二）常用电泳法的类型及其应用

1．纸电泳法

2．醋酸纤维素薄膜电泳法

3．PAGE法

4．SDS