标准解读

《GB/T 31790-2015 马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准,主要针对马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)的检测和鉴定提供了技术指导。该标准适用于进出口、国内调运以及生产过程中马铃薯及其繁殖材料中PSTVd的检疫鉴定工作。

标准详细描述了从样品采集到最终结果分析的一系列步骤。首先,在样品采集方面,明确了不同用途下应选择的样本类型及数量要求,确保能够代表整体情况的同时减少误检率。接着,对于样品处理,规定了具体的前处理流程,包括但不限于清洗、切割等操作,目的是为了提高后续检测环节的效果。

在检测方法上,《GB/T 31790-2015》推荐使用RT-PCR法作为主要手段来识别PSTVd的存在与否。此方法通过反转录将RNA转化为cDNA后进行扩增反应,再利用特定引物对目标片段进行特异性扩增,从而实现病毒核酸的定性检测。此外,还介绍了其他辅助性或替代性的检测技术,如电镜观察、免疫学检测等,供实验室根据实际情况选用。

最后,标准中也给出了结果判定的原则与报告编写的要求。阳性结果意味着样品中含有PSTVd,需按照相关法律法规采取相应措施;阴性则表示未检出该病毒。同时强调了实验记录的重要性,要求完整准确地记录每一步骤的信息,以保证数据可追溯性。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2015-07-03 颁布
  • 2015-11-27 实施
©正版授权
GB/T 31790-2015马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法_第1页
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T31790—2015

马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofPotatospindletuberviroid

2015-07-03发布2015-11-27实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法

GB/T31790—2015

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100029)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

:400-168-0010

年月第一版

20158

*

书号

:155066·1-49510

版权专有侵权必究

GB/T31790—2015

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任

。。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局中华人民

:、、

共和国厦门出入境检验检疫局中华人民共和国福建出入境检验检疫局黑龙江省农业科学院植物脱毒

、、

苗木研究所中华人民共和国甘肃出入境检验检疫局中华人民共和国山东出入境检验检疫局

、、。

本标准主要起草人张永江刘洪义刘忠梅辛言言陈慧陈红运马洁吕典秋沈建国廖富荣

:、、、、、、、、、、

文朝慧张成标吴兴海

、、。

GB/T31790—2015

马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了基于寄主植物症状及基因组特征的马铃薯纺锤块茎类病毒检疫鉴定方法

本标准适用于可能携带有马铃薯纺锤块茎类病毒的马铃薯组织材料的检疫鉴定

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

马铃薯种薯

GB/T18133

进境马铃薯种薯检疫操作规程

SN/T2481

3仪器设备用具及试剂

31仪器设备

.

电子分析天平垂直电泳槽小型离心机台式冷冻离心机普通仪实时荧光

(0.001g)、、、、PCR、PCR

仪电泳系统计凝胶成像系统冰箱超净工作台超低温冰箱高压灭菌锅制冰机

、、pH、、4℃、、-80℃、、、

涡旋振荡器微波炉等

、。

32用具

.

可调移液器吸头离心管及研

(2.5μL、10μL、20μL、100μL、1000μL)、、(0.2mL、0.5mL、1.5mL)

钵等

33试剂

.

除有特殊说明外所有试验用试剂均为分析纯或生化试剂

,。

试剂见附录试剂见附录实时荧光试剂见附录

RB;RT-PCRC;RT-PCRD。

4检测方法

41样品制备

.

411脱毒苗制样对脱毒苗要逐株制样在无菌条件下从脱毒苗上剪下长的茎段放于小研钵

..:,,2cm,

中用于提取核酸并进行后续检测把取样的脱毒苗放回试管中封好管口并编号以便根据检测结果决

,;,,

定取舍

412种薯制样在隔离种植前对种薯块茎进行症状检查对有明显症状的薯块直接取症状部位

..:,,0.2g~

用于核酸提取并进行后续检测对于无明显症状的薯块进行隔离种植

0.5g;。

413隔离种植植株制样种薯隔离种植按

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