脂质体的制备

脂质体的制备一、脂质体的简单介绍：1965年，英国科学家Bangham发现，把磷脂分散到过量水中，可形成一种由双分子膜组成的闭合囊泡，这种囊泡称为脂质体，切面结构如下图所示：构成双分子层的类脂分为亲水的头部和亲油的尾部两部分，在脂质体的形成过程中，亲水的头部形成膜的内外表面层，而亲油性的尾部处于膜的中间，

膜壁厚度约为5至7nm，而囊的直径一般在25至500nm之间。脂质体的这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两亲的物质，这些物质被包入脂质体内部的水相，或插入类脂双分子层，或吸附连结在脂质体的表面。经过30多年的发展，脂质体在很多领域得到了应用，其中之一是作为一种药物载体，在这方面它已经实现了商业化。美国FDA已审批了数种脂质体类药物。另外，还有很多项目处于临床试验阶段。到1999年，这些药物产品的销售额已超过2.5亿美元。二、脂质体作为药物载体的特点

质体表面结合不同的配基如抗体、糖脂等可将药物递送到特定靶组织和靶细胞，具有靶向性。目前作为药物载体系统的物质有很多，但是一般认为最有前途的是脂质体。主要是因为脂质体作为药物载体具有以下优点:(1)制备简单，磷脂无毒，无免疫原性，可被生物膜吸收利用;(2)易携载和释放各种药物，可保护药物，延缓其生物降解，增长给药时间。(3)增强药物的靶向性。三、制备脂质体的主要原料1、磷脂：脂质体的结构是磷脂双分子层，因此磷脂是制备脂质体的主要原料。2、胆固醇：胆固醇在此作为一种调和剂，在单一磷脂中加人胆固醇可改变其相变温度，对脂质膜的流动性产生双向调节功能:在相变温度以上时，它能降低膜的流动性;在相变温度下时，它又能增加膜的流动性，由此提高脂质体的稳定性和包封率。因此胆固醇是必不可少的原料之一。

3、抗氧化剂：常用的抗氧化剂有维生素E、丁酸羟甲醛等，加入适量的抗氧化剂可防止卵磷脂中的不饱和脂肪酸被氧化。4、有机溶剂：主要有甲醇、乙醇、氯仿等一种或几种的混合液。四、脂质体的制备方法

超声法、有机溶剂挥发法、冻融法、冷冻干燥法、机械分散法、薄膜分散法、逆相蒸发法。但最常用的是薄膜分散法和逆相蒸发法。1、薄膜分散法.将脂质材料（磷脂、胆固醇等）溶解在有机溶剂中，然后在旋转蒸发器上减压蒸去溶剂，使脂质材料在器壁上形成薄膜，再加入适量缓冲液，通过超声使之充分水合分散，即形成乳白色的脂质体混悬液。为降低脂质体的粒径或使脂质体的粒径均匀，可在一定压力下通过一定孔径的滤膜。即得到粒径均匀分布的载药脂质体。

2、逆相蒸发法将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿、乙醚等，加入待包封药物的水溶液进行短时超声，直至形成稳定的水／油乳剂。然后减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，加入缓冲液，再进行超声处理，即形成乳白色的脂质体混悬液。同薄膜分散法一样，为降低脂质体的粒径或使脂质体的粒径均匀，可在一定压力下通过一定孔径的滤膜。据相关资料介绍，逆相蒸发法制得脂质体的包封率比薄膜分散法的低。五、制备过程中应注意的几个问题

1、油水比：即油相(胆固醇、磷脂等)与水相(缓冲水溶液)的体积比。油水比小时，不能很好地形成较稳定的油包水型乳液;油水比过高，则脂质体中包人的水溶性药物绝对量太少。仙人掌SOD脂质体的油水比为3:1-4:1时，包封率比较高，针对具体药物的最佳的油水比，需要在实验中测定。

2、相变温度(Tm)：脂质体双分子层由凝胶相转变为液晶相的温度。卵磷脂的相变温度为50℃，制备脂质体时温度必须达到其相变温度以上，才能使脂质体双分子层排列紧密，使脂质体稳定性增强。3、磷脂与胆固醇的比例：在一定比例范围内，胆固醇比例越大，包封率越高，但胆固醇比例过大时，会导致组成脂质体的磷脂量太少，脂质体膜形成困难，且不牢固，

且由此形成的脂质体膜亲水性太强，膜也容易破坏。有关文献介绍磷脂与胆固醇的物质的量之比为7：2时制得脂质体的包封率最高，当然，它还与药物制备方法和辅料质量有关。真正适合我们的比例需要我们在今后的实验中测定。六、脂质体的大量生产相关资料上介绍的各种各样的脂质体的制备都是在实验室里进行的，到目前为止还没有发现有关脂质体大量生产的资料，更没有查到相关的制造设备。而咱们的毕业设计中就有设计脂质体生产设备这个题目，要求针对前面介绍的两种脂质体生产方法（薄膜分散法和逆相蒸发法），分别设计出相关的批量生产的设备。

由于没有现成的经验可以借鉴，我们只能利用实验室的生产仪器的原理进行设计。前面提到用薄膜分散法制备是将脂质材料（磷脂、胆固醇等）溶解在有机溶剂中，在旋转蒸发器上减压蒸去溶剂，使脂质材料在器壁上形成薄膜，然后再加缓冲液进行超声处理。即首先要将脂质材料形成非常薄的薄膜，这就要求我们设计的设备具备很大的成膜面积，才能生产出较大量的脂质体，这一点需