新生化仪检测系统的校准程序

新生化检测系统的

校准程序北京普朗新技术有限公司普概述：《全国临床检验操作规程》第3版指出：“不同检测系统对同一份检测标本的同一检测项目的检测结果应具有可比性，这样的检测结果才有临床价值”。为了确保生化仪检测系统的检测结果准确，并具有与公认参考系统的可比性，现参考上海临检中心冯仁丰教授的有关文章，制定了本公司生化仪检测系统的校准程序，目的是建立一个完整的生化检测系统提供给我们的客户（尤其是原来没有建立参考检测系统的客户）。生化检测系统的校准程序1.生化检测系统的基本组成仪器：北京普朗全自动生化分析仪或半自动生化分析议试剂：北京普朗（或科华）生化试剂校准品：朗道校准品检测项目的标准操作程序(SOP)2确定溯源性的目标

在校准前，必须首先确定一个溯源性的目标系统。普朗检测系统目前选择奥林帕斯（OLYMPUS）检测系统（含仪器、试剂、校准品等）为溯源性的目标，即普朗检测系统准备使患者样本的检测结果向奥林帕斯检测系统靠拢。（当然用户也可以选择其它任何公认的有溯源性的系统作为目标系统，包括用户本室的原有公认系统）。3

待校准检测系统的准备：

为实现校准目的，必须确保待校准的检测系统（PUZS-300）处于正常良好的工作状态。3.1试验仪器的保养：对新建系统的试验仪器进行一次完整的维护和保养，并确认仪器一直处于良好状态。确保用于仪器上的各种水质优良（蒸馏水、洗液等）。3.2准备试剂盒：应选择质量长期稳定并获得出厂合格证的，性能良好的试剂。校准时，最好使用新批次的试剂盒（保证有足够的量）,并编写完整和详细的操作规程。3.3质量控制：所有校准过程都必须有分析过程的质量控制。确保在同批实验的检测结果处于在控的前提下采集实验数据，否则，应停止实验。3.4系统评价：应该对新建系统的可报告范围、精密度、准确度进行初期评价，尤其是精密度CV值应小于CLIA`88规定值（以确保校准效果；CLIA`88规定的指标见有关资料。如已有数据证明以上性能指标可被接受，可免做此评价）。3.5注意

为了克服基质差异对检测结果的影响，在实现溯源性的目标过程中，切记：永远以患者的新鲜标本为实验对象、永远以方法学比较实验方式为验证手段（参考EP9-A《用患者标本进行方法比较和偏倚评估》）。4校准步骤4.1目标实验室的准备

若确定以奥林帕斯检测系统为实现溯源性的目标系统，则应事先与正在使用奥林帕斯检测系统的实验室取得联系：准备足够量的临床新鲜血样本（一般规定40例，为了减少工作量，建议＞20例即可），选择需要校准的检测项目（自己规定的项目），在目标系统处于受控状态的情况下，连续对临床新鲜血样本检测3次以上，取平均值（确保样本定值准确可靠）。4.2临时校准品的确定：在目标实验室送来的新鲜血标本中选分析物含量适中的某个新鲜血标本为临时校准品，并用目标实验室检测的平均值作为临时校准值。4.3对自建系统（如PUZS-300）的临时校准：在自建系统上，以该新鲜血清为临时校准品，用目标实验室检测的均值为校准值，对自建检测系统（仪器、试剂）进行校准。（这样就利用已具有溯源性结果的新鲜血标本，完成了在新建系统上准确度的溯源性传递。）4.4临时校准后的验证对取得的其余临床患者血清（内含分析量最好分布于整个可报告范围）在自建系统上进行双份平行检测，取均值。然后与目标系统检测结果进行方法学比较（参考EP9-A），如果此时：①回归统计的相关系数r＞0.975；斜率接近1（建议±0.03）；而且截距小（建议≤下限值的5-10%）；②用回归方程计算出的系统误差（在临床决定水平附近），不超过CLIA`88允许总误差的1/2；CV值不超过CLIA`88/4。说明临时校准成功。如果还没有达到要求，应对临时校准品的血清再次用目标系统检测，观察有无偏倚，纠正后，重复上述的实验，直到成功。5.建立自建系统的稳定校准品

5.1

因为临床新鲜血不可能长期作为校准品，所以在以上实验基础上，选定一种稳定的校准品，是保持自建检测系统可持续溯源至目标检测系统的关键。普朗生化检测系统现在选择朗道校准品（当然也可选择其它厂家的产品）作为自建检测系统的稳定校准品（自建校准品）。应特别说明的是：购买的朗道校准品，只是把它当做正确度传递的工具，只要求瓶间差小、内含分析物稳定，根本不采用原公司的标定值。5.2用自建校准品的最终校准

5.2.1自建校准品的标定值

按照使用说明书要求，复溶朗道校准品。将校准品当作一个样品，在经临时校准血清校准后的自建系统上进行多次检测（3次以上），取平均值作为标定值。

5.2.2对自建检验系统的再次校准在保持原自建检验系统不变的情况下（仪器、试剂盒、操作程序），用朗道校准品在自建系统上的检测均值（自建校准品的标定值），再次对自建检验系统进行校准。5.3自建校准品校准后的验证

经自建校准品校准后，再次对获得的患者血清进行自建系统和奥林帕斯系统进行方法学比较（同上），验证合格说明“自建校准品”对“自建检测系统”校准成功。如果方法学比较结果，不如使用新鲜血清为临床校准品的比较结果，说明对朗道校准品的检测值还不是最佳值。可以根据所有标本结果差异分布上的趋势，对其检测值做微小的调整，再进行方法学比较实验。如此反复的实验直至符合要求。6校准完成自此，我们建立了普朗的完整检测系统（普朗生化仪、普朗试剂、自建校准品（朗道）和操作规程）。为了使自建系统能长期保持溯源性，应该用自建校准品对自建检测系统进行定期校准，所以购买的朗道校准品，一个批次最好有足够的量。切记：1）一直保持自建检测系统的稳定性；2）在以后对自建检测系统校准时，只使用在该系统上测定的标定值，决不能用朗道公司提供的标定值。7日常校准

本检测系统投入使用以后，遇到以下情况时应进行校准：正常条件下的定期校准、更换试剂盒批号、出现失控、仪器保养和更换关键零部件后、操作人员变动、更换校准品批次等。

7.1正常条件下的定期校准

在保持自建检测系统不变的情况下，直接用自建校准品对检测系统进行校准。

7.2

更换试剂盒时的校准

首先在原仪器上用原试剂和新试剂对同一批临床新鲜血清标本进行方法学比较实验。

1.如果检测结果具有可比性（误差可被接受），说明两试剂间无差异，可直接用新试剂对临床样本进行检测。

2.如果检测结果具有明显差异：

a)在原系统上（不含原试剂）用新试剂重新校准，并进行比较实验；

b)如果仍具有明显差异，说明新试剂与原试剂有显著差异。应以原系统为目标系统，按规定的校准程序重新校准（包括修正自建校准品的定值）。（其它类型的校准可参照本原则根据实际情况处理。）校准流程图见下页。

结束语：这样，包括仪器、试剂盒、自建校准品和操作程序，我们建立了普朗的完整检测系统，并确保该系统对患者标本的检测结果可以溯源至奥林帕斯系统。因为奥林帕斯系统对患者新鲜血标本检测结果可以溯源至参考系统，因此，我们的自建检测系统也实现了可溯源至参考系统的目的。

北京普朗公司技术部2010.01