生物化学期中考试试题参考答案要点

（2009-2010学年第1学期期中）一、解释下列名词（10个，3分/个，共30分）1.组成却有所不同的一组酶。2.蛋白质的超二级结构：指蛋白质分子中相邻的二级结构单位组合在一起所形成的有规则的、在空间上能辨认的二级结构组合体。3.多顺反子：也称之顺反子（cistronDNA片段。在某些情况下，基因常用来指编码一个功能蛋白或RNA分子的DNA片段。4.增色效应：当双螺旋DNA融解（解链）时，260nm处紫外吸收增加的现象。5.别构效应：又称之变构效应。是寡聚蛋白与配基结合改变蛋白质的构象，导致蛋白质生物活性改变的现象。6.核小体：真核染色质主要的组蛋白有五种——Hl、H2A、、H3、H4。DNA和组蛋白形成的复合物就叫核小体，核小体是染色质的最基本结构单位，成球体状，每个核小体含有8个组蛋白，各含两个H2A、、H3、H4分子，球状体之间有一定间隔，被DNA链连成串珠状。7.PCR：扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定DNA序列的一种技术。在该反DNADNADNA变性、引物退火和在TaqDNA聚合酶催化下的DNA合成。8.Southernblot：9.同源蛋白质：来自不同种类生物、而序列和功能类似的蛋白质。例如血红蛋白。二、给出下列缩写的中文名称或中文名称的英文缩写（10个，1分/个，共10分）1.cAMP3′,5′环腺嘌呤单核苷酸，环腺嘌呤单核苷酸或其他合适名称2.GTP腺嘌呤三核苷酸或其他合适名称3.ddNTP双脱氧三核苷酸氧化性4.NAD+5.IEF氧化型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸或其他合适名称等电聚焦6.赖氨酸Lys或K7.还原型谷胱甘肽GSH8.载脂蛋白AposiRNA或si核糖核酸，NAG，或其他合适缩写9.小干扰RNA10.乙酰β-D-葡萄糖胺三、单项或多项选择填空（10个，1分/个，10分）1.测定多肽片段氨基酸序列的最佳试剂是（D1A.β巯基乙醇2.刚合成时以无活性的前体形式存在的是（A,DA.InsulinB.HbC.ATCase3.测得某一蛋白质的含铁量为0.34%（Fe55.84Mr是（AB.，4-二硝基氟苯C.丹磺酰氯D.苯异硫氰酸D.胰蛋白酶A.16,7004.下列关于DNA变性后的正确描述是（ACA.通常黏度减小B.摩尔磷消光系数降低B.33,400C.66,800D.62,500E.以上均错C.生物活性丧失D.碱基堆积力破坏，而氢键和离子键不受影响5.酶的非竞争性抑制的动力学特征是（CA.Vmax减小，Km减小C.Vmax减小，Km不变E.以上均错B.Vmax增加，Km增加D.Vmax不变，Km增加.6.在生理条件下，既可作为的受体，也可作为的供体的是(D)。A.Cys的巯基7.属于脂溶性维生素的是（BA.维生素CB.维生素EB.Lys的ε氨基C.Arg的胍基D.His的咪唑基C.维生素PPD.维生素B18.局部双螺旋和单链间隔构成的三叶草形为tRNA分子的二级结构，有两个发挥其功能的重要部位，一个是氨基酸接受臂，另一个是（DA.ΨC环C.可变环B.DHU环D.反密码子环9．蛋白质b和（Mr分别为20,00050,000和100,000）组成的混合液体，欲用SephadexG200分子筛柱层析分离，流动相为含0.15MNaCI的磷酸缓冲液。这三种蛋白质从层析柱中先后流出的顺序为（B．、b、cB．、b、aC．b、、aD．b、、c10.不含有甘油的磷脂是（EA.脑磷脂和卵磷脂B.鞘磷脂和鞘糖脂C.肌醇磷脂和心磷脂D.甘油磷脂和磷脂酰丝氨酸四、填空题（10个，1分/空，10分）E.神经鞘磷脂构成αH和）和DNA双螺旋中（－DNA）中嘌呤核苷的碱基的排列均采用（反式）式排列。(靡蛋白酶)酶可特异水解肽链内部由芳香族氨基酸的羧基和其他氨基酸的氨基之间形成的肽键。唯一含有金属离子（钴）的维生素是（B12C1和C2上的两个脂肪酸之一被酶水解掉的磷脂称为（溶血磷脂DNA分子，其长度相等，碱基组220%（60%（么Tm后者生K）被成为凝血维生素。真核细胞mRNA的5′－末端为（帽子）结构，而3′－末端为PolyA结构。免疫球蛋白G分子呈Y42条轻链和22）个抗原结合部位。一个分子的己醛糖有（16）个开链的旋光异构体。E+SES→E+P中，当（K2＜）时，Km=Ks。五、是非判断题（10个，1分/个，10分）1、在不考虑其他效应物的影响，则氧分子与Hb的结合过程表现为一种同种正协同效应。对2、在原核细胞和真核细胞中，染色体DNA都是与组蛋白形成复合体。错3、初速度指酶促反应最初阶段底物转化为产物的速度，或者指底物被消耗以内的速度。对4、凡是具有旋光性的单糖都表现有变旋现象。错5、用SDS测得蛋白质的迁移率与蛋白质的等电点有关。错6、主动转运指物质逆浓度梯度的穿膜运输，需能量和专一性的载体蛋白。对7、学性质的改变。错8、构型的糖，其旋光性为左旋，构型的糖，其旋光性为右旋。错9、DNA螺旋一般为B构象，而RNA螺旋为A构象。对10、通常亚基只有一条多肽链，但有的亚基由两条或多条多肽链组成，这些多肽链间多以二硫键相连。亚基单独存在时无生物学活性。对六、问答题（3选其2做答，15分/个，30分）1、比较蛋白质α螺旋中的氢键和DNA双螺旋中的氢键，并指出氢键在稳定这两种结构中的作用。答:在α螺旋中，一个残基上的羧基氧与旋转一圈后的（该残基后面）第四个残基上的α氨基中的氮形成氢键，这些在肽链骨架内原子间形成的氢键大致平行于该螺旋的轴，氨基酸侧链伸向骨架外，DNA中糖-基之间形成2个或3个氢键，氢键大致垂直于螺旋轴。在α螺旋中，单独的氢键是很弱的，但是这些键的合力稳定了该螺旋结构。尤其是在一个蛋白质的疏水内部，这里水不与氢竞争成键。在DNA结构，但在疏水内部碱基对之间的堆积对螺旋结构的稳定性的供献更大。2、从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300ml含有150mg360一系列纯化步骤以后得到的4ml酶制品（含有0.1mg288单位。整个纯化过程的活性收率是多少？纯化了多少倍？答：活性回收率（%）=288单位÷360单位=80%150mg)=2880单位/mg÷2.4单位/mg=1200纯化倍数=(288单位÷0.1mg)÷(360单位÷33、用适当的碱基取代下面序列中的，给出一个完整的反向重复结构。5ˊ－－T－C－A－T－－－－－－Xˊ3ˊ－－－－X－－－－－X－－Xˊ答：5ˊ－－T－C－－T－－T－－－－C3ˊ3ˊC－T－－G－T－－－－C－T－－Gˊ一、Definition(2pointsperone,20points)1、HybridizationofNucleicacidmolecule：不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。2Cistronorgene：泛指被转录的一个DNA片段。在某些情况下，基因常用来指编码一个功能蛋白或RNA分子的DNA片段。:或者指基因功能的单位；一段染色体，它是一种多肽链的密码；一种结构基因。3PalindromeofDNA(invertedrepeatsequence)：在同一多核苷酸链内的相反方向上存在的重复的核苷酸序列。在双链DNA中反向重复可能引起十字形结构的形成。4Hormone：一类由内分泌组织合成的微量的化学物质，它由血液运输到靶组织，起着一个信使的作用调节靶组织（器官）的功能。5、DenaturationofBiomacromlecule：蛋白质分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时，次级键遭到破坏导致天然构象的破坏，但其一级结构不发生改变。核酸的变性：当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时，其中的氢键便断开，双链DNA便脱解为单链，这叫做核酸的溶解或变性。7、Northern：将电泳分离后的RNA吸印到纤维素膜上再进行分子杂交。8、Supersecondarystructureofprotein：在蛋白质分子中的局部区域内氨基酸残基的有规则的排列，常见的二级结构有螺旋和β折叠。二级结构是通过骨架上的羰基和酰胺基团之间形成的氢键维持的。9PCR：扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定DNA序列的一种技术。在该反DNADNADNA变性、引物退火和在TaqDNA聚合酶催化下的DNA合成10、Isozyme(Genetic：是指有机体内能够催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。二、TotranslatefollowingintoChinese(0.5pointsperone,5points)1、cGMP´,5´-环鸟嘌呤核苷酸/环化腺苷单磷酸酰胺腺单核苷酸3cccDNA共价闭合环DNA2、NAD氧化型辅酶氧化型尼克＋4GS-SG氧化型谷胱甘肽5、4ddNTP双脱氧三核苷酸6、Hb血红蛋白7、Subunit亚基8、hnRNA核不均一性RNA/RNA前提9、Ψ假尿嘧啶10、holoenzyme全酶三、填空题（20×1＝20分）1.原核细胞中的70S核糖体是由50S和（30）S组成。2.在细胞中，构成α螺旋中肽键的原子（H和）的排列采用（反式）式排列。而不饱和脂肪酸中双键上的2个，则采取（顺）式排列。3.（组氨酸）的功能基是催化中最有效、最活泼的。例如它是构成Trypsin,Chymotrypsin和Elastase等的电荷中继网的氨基酸残基之一，在生理pH条件下，它既可以作为H的受体，也可以作为H的＋+供体。4.已知一个酶对、b、c三个底物作用的Km之间的关系分别是Kma＞Kmb＞Kmc,则该酶的最适底物是(c)。5.DNA双螺旋中，螺旋一圈含有（10）个bp。6.蛋白质b和（M.W分别为20,00050,000和100,000）组成的混合液体，欲用适当的分子筛柱层析分离，这三种蛋白质从层析柱中先后流出的顺序为（C,B,A7.酶的竞争性抑制作用的动力学特征是Km（增加Vmax不变，因此增加底物浓度可减弱或消除抑制作用。8.(VK维生素与血液的凝固有关。9.DNA双螺旋中常见的碱基配对是T与（A）配对，C与G配对。10.Oligo(dTor－纤维素可以用来分离纯化（真核细胞中的mRNA11.双链DNA中若（GC）含量多，则Tm值就高。12.由分子量不相同的2条肽链，且肽链之间由二硫键相连的蛋白质，在还原或非还原条件下（加巯基乙醇或不加巯基乙醇处理样品）进行SDS，用适当的染色剂染色，均出现（1）条蛋白着色带。13.酶只能改变化学反应的活化能而加速反应速度，但不能改变化学反应的（平衡）点。14.环状结构的葡萄糖分子其立体异构体的总数目为（32）个。15.磷脂分子中甘油的C和C1216.疫球蛋白G分子呈Y形，含有以二硫键连在一起的4条多肽链（即2条轻链和2（2）个抗原结合部位。17.（TPCK，N-对甲苯磺酰－L－苯丙氨酰氯甲基酮）是胰凝乳蛋白酶的专一性亲和标记试剂。12518.E+SE+P）时，Km=Ks，KmK<K121[S]19.在特定条件下，1min内转化（1）μmol底物所需要的酶量，定义为一个国际单位（20.当[S]＝10K时，酶促反应速度相当于（91）％V。mmax四、是非题（正确的划“√”，错误的划（＝10分）DNA的二级结构包括双螺旋结构、三链螺旋、四链结构，其中B-DNA是重要的基本结构形式。维系DNA二级结构的主要作用力是盐键。(×)酶活性的调节方式主要有共价修饰、亚基的聚合与解聚以及变构调节等。(√)假设有2000bp构成的DNA双螺旋，当L=200，T=200+2时，则产生负超螺旋。(×)collagen）是动物结缔组织最丰富的一种蛋白质，它是由原胶原蛋白分子组成。原胶原蛋白是一种具有左手超螺旋结构的蛋白。每个原胶原分子都是由3条特殊的右手螺旋的多肽链左手旋转形成的。(√)肌红蛋白（myoglobin）是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质，它的氧饱和曲线为S曲线型。而血红蛋白（hemoglobin）是由含有血红素辅基的4个亚基组成的结合蛋白，血红蛋白负责将氧由肺运输到外周组织，它的氧饱和曲线为双曲线型。(×)活化能（activation）指将1mol反应底物中所有分子由其态转化为过度态所需要的能量。(√)初速度(initialvelocity)指酶促反应最初阶段底物转化为产物的速度，这一阶段产物的浓度非常低，其逆反应可以忽略不计。(√)（1→4-（2→6）糖苷键与主链相连。(×)peptidoglycan）是葡萄糖和唾液酸交替连接的杂多糖与不同的肽交叉连接形成的大分子。肽聚糖是许多细菌细胞壁的主要成分。(√)谷胱甘肽中的所有肽键都是由一个氨基酸的－氨基和另一个氨基酸的－羧基经缩合而形成的。(×)五、单项/多项选择题（10×1＝10分）1.同源蛋白质（homologousprotein）指____a______。a.来自不同种类生物的序列和功能类似的蛋白质b.来自同种类生物的序列和功能类似的蛋白质c.来自不同种类生物的序列和功能不同的蛋白质6d.来自同种类生物的序列和功能不同的蛋白质在蛋白质一级结构分析中，测定肽片断氨基酸序列的最佳方法是___b________。．．．a.Sanger试剂法在合成时以无活性的前体形式存在的是___a_d_______。a.胰岛素b.Mbc.ATCaseb.Edman降解法c.ddNTP法d.蛋白酶法d.胰蛋白酶_____b______。a.协同运输测得某一蛋白质样品的氮含量为，此样品约含蛋白质___B____。b.主动运输c.被动运输d.胞吞．．2.00g．2.50gC．6.40g．3.00gE．6.25g关于片层结构的正确描述为___a_b_c__。．．是一种伸展的肽链结构C．肽键平面折叠成锯齿状．可由两条以上多肽链顺向或反向平行排列而成．两链间形成离子键以使结构稳定变构剂调节酶活性的机理是____b______。．．．与必需基团结合．与调节亚基或调节部位结合D．与辅助因子结合C．与活性中心结合E．与活性中心内的催化部位结合在pH5的溶液中，带正电荷的是__BCD______。．pI为4.5的蛋白质C．pI为7.0的蛋白质．pI为7.4的蛋白质．pI为6.5的蛋白质9.胆固醇含量最高的脂蛋白是____A_____。．乳糜微粒．极低密度脂蛋白10.溴化氰(Cyanogenbromide)选择性地切割多肽链中由______A。C．中间密度脂蛋白．低密度脂蛋白．甲硫氨酸的羧基形成的肽键C．碱性氨基酸的羧基形成的肽键B．甲硫氨酸的氨基形成的肽键．中性氨基酸的羧基形成的肽键六、问答题（3×10＝30分，任选其中3个）1、双螺旋DNA53，写出它的互补链。该DNA片段中含有什么特殊类型的序列？该双链DNA有能力形成另外一种结构吗？2、由下列信息求八肽的序列。（）酸水解得Ala，，，Met，Phe，，2Val（b）Sanger试剂处理得DNP-Ala。（）胰蛋白酶处理得，，Thr和，Met，Phe，2Val。当以Sanger试剂处理时分别得7到DNP-Ala和DNP-Val。（d）溴化氰处理得Ala，，高丝氨酸内酯，Thr，2Val，和，Phe，当用Sanger试剂处理时，分别得DNP-Ala和DNP-Leu。答：Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe3．蛋白质或多肽有那些重要的的生物学功能？并举例说明之。1.2.Hb细胞膜的转运蛋白，起转运，氨基酸等。3.作为营养和贮存蛋白。如奶中的酪蛋白，蛋中的卵白蛋白，细菌和植物中铁蛋白起贮存铁。4.作为收缩和运动蛋白。如Actinmyosindynein等；5.起结构作用。如collagen，elastin，keratin等；6.起防御功能。Ab，Ag，Fibrinogen，thrombin等；7.起调控作用。Gproteins，蛋白激素等；8.其他作用。如甜味蛋白，抗冻蛋白等4．如何证明DNA是主要的遗传物质，而不是蛋白质？肺炎链球菌的转化实验噬菌体浸染细菌的物质不是蛋白质，而是DNA.5．比较DNA和蛋白质（包括酶）变性后其结构、性质和生物学功能等方面的异同点。280nm紫外吸收增加，生物学功能丢失。DNA变性：三维结构改变，双链变成单链，通常溶解度增加，260nm失原有的生物学功能。6．别构酶具有哪些结构和动力学特点？1.多亚基的四级结构；2.活性中心和调节部位与v作图为S形曲线七、计算题(5分，任选其二)1．从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300ml含有150mg蛋白质，总活力为360单位。经过一系列纯化步骤以后得到的4ml酶制品（含有0.08mg288单位。整个纯化过程的收率是多少？纯化了多少倍？答：活性回收率（%）=288单位单位=80%纯化倍数=(288单位单位÷150mg)=15002．氨基酸的定量分析表明牛血清白蛋白含有0.58％的色氨酸（色氨酸的分子量为2048（（b）凝胶过滤测得的牛血清白蛋白的分子量为70000，试问血清白蛋白分子含有几个色氨酸残基？）32,100（b）23．假设当[S]=Km，[I]=Ki时，对于竞争性抑制作用来讲，相对活性（）和抑制分数（）各为多少？答：相对活性（）抑制分数（）=1-12345、9、激素10、8、PCR二、写出下列生化名词缩写符号的的中文名称（10×＝5分，答案直接写在小题后）3、cccDNA8、hnRNA9、Ψ（指一种稀有碱基）2．构成αH和）和DNA－DNA）中嘌呤核苷的碱（）的功能基是催化中最有效、最活泼的，它是构成胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶4．等的电荷中继网氨基酸残基之一,在生理pH条件下，既可以作为H的受体，也可以作＋+已知一个酶对、b、c三个底物作用的Km之间的关系是Kma＞Kmb＞Kmc,则5．)。蛋白质分子－螺旋构象中，螺旋一圈中含有（）个氨基酸残基。蛋白质、b和（M.W分别为20,000、50,000和100,000）组成的混合液体，欲用SephadexG200分子筛柱层析分离，流动相为磷酸缓冲液。这三种蛋白质从层析柱中先后流出的顺序为（酶的竞争性抑制作用的动力学特征是Km（）,而Vmax不变，因此增加底物浓8．(维生素与血液的凝固有关。9．10DNA双螺旋中常见的碱基配对是T与（11Oligo(dT)－纤维素可以用来分离纯化（9）含量多，则Tm值就高。13由分子量相同的2条肽链，且肽链之间由二硫键相连的蛋白质，在还原或非还原条件下（加巯基乙醇或不加巯基乙醇处理样品）进行SDS，均为（）条）14酶只能改变化学反应的活化能而加速反应速度，但不能改变化学反应的（点。15环状结构的葡萄糖分子其立体异构体的总数目为（磷脂分子中甘油的C和C16．1217疫球蛋白G分子呈Y形，含有以二硫键连在一起的4条多肽链（即2条轻链和2条）个抗原结合部位。18（）是胰凝乳蛋白酶的专一性亲和标记试剂。12ES）时，Km=Ks，Km单位与[S]Kμmol底物所需要的酶量，定义为一个国际单21．m四、是非题（正确的划“√”，错误的划（＝10分，答案直接写在题中括号内）DNA的二级结构包括双螺旋结构、三链螺旋、四链结构，其中B-DNA是重要的基本结构形式。维系DNA二级结构的主要作用力是盐键。(酶活性的调节方式主要有共价修饰、亚基的聚合与解聚以及变构调节等。(高压液相层析（HPLC）指使用颗粒极细的介质，在高压下分离蛋白质或其他分子混合物的层析技术。()))collagen）是动物结缔组织最丰富的一种蛋白质，它是由原胶原蛋白分子组成。原胶原蛋白是一种具有左手超螺旋结构的蛋白。每个原胶原分子都是由3条)肌红蛋白（myoglobin）是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质，它的氧饱和曲线为Shemoglobin）是由含有血红素辅基的4个亚基组成的结合蛋白，血红蛋白负责将氧由肺运输到外周组织，它的氧饱和曲线为双曲线型。(活化能（activation）指将1mol反应底物中所有分子由其态转化为过度态所需要的能量。(初速度(initialvelocity)指酶促反应最初阶段底物转化为产物的速度，这一阶段产物的浓度非常低，其逆反应可以忽略不计。(糖原（glycogen）是含有分支的（1→4）糖苷键的葡萄糖残基的同聚物，支链在分支点处通过（2→6）糖苷键与主链相连。(肽聚糖（peptidoglycan）是葡萄糖和唾液酸交替连接的杂多糖与不同的肽交叉连接