标准解读

《GB/T 28065-2011 地中海实蝇生物芯片检测方法》是一项国家标准，该标准详细规定了使用生物芯片技术对地中海实蝇进行快速准确鉴定的方法。地中海实蝇是一种重要的果蔬害虫，其存在对农业生产构成严重威胁。此标准旨在通过提供一种高效、灵敏的检测手段来加强对该害虫的监控与管理。

根据标准内容，首先介绍了适用范围，明确了本标准适用于进出口水果及蔬菜等植物产品中地中海实蝇成虫或幼虫DNA的提取以及后续基于生物芯片平台上的特异性探针杂交反应来进行物种识别。接着，标准描述了所需的主要仪器设备和试剂材料，包括但不限于生物芯片扫描仪、核酸提取试剂盒、标记酶、荧光素等，并对这些物品的质量要求做出了明确规定。

在样品处理部分，标准给出了从待测样本（如果实内部发现的疑似害虫）到最终可用于生物芯片分析的DNA溶液制备的具体步骤，涵盖了组织研磨、裂解细胞释放遗传物质、纯化去除杂质等多个环节的操作指南。此外，还强调了实验过程中需要注意的安全防护措施和个人卫生习惯。

关于生物芯片的应用，则详细说明了如何将已知的地中海实蝇基因序列设计为特异性探针固定于芯片表面；如何利用PCR扩增目标片段并对其进行荧光标记；以及如何通过杂交反应使标记后的DNA与芯片上的探针结合形成可被仪器读取的信号模式。最后，通过对获得的数据图像进行分析比对，可以确定是否存在地中海实蝇。

整个流程不仅需要严格遵守实验室操作规范，而且要求技术人员具备一定的分子生物学知识和技术水平。正确实施该标准有助于提高地中海实蝇监测工作的效率和准确性，对于防止此类有害生物入侵具有重要意义。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2011-12-30 颁布
  • 2012-06-01 实施
©正版授权
GB/T 28065-2011地中海实蝇生物芯片检测方法_第1页
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T28065—2011

地中海实蝇生物芯片检测方法

BiochidetectionofCeratitiscapitataWiedemann

p()

2011-12-30发布2012-06-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

地中海实蝇生物芯片检测方法

GB/T28065—2011

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

()

北京市西城区三里河北街2号100013

16(100045)

网址

:

服务热线

/p>

年月第一版

20124

*

书号

:155066·1-44583

版权专有侵权必究

GB/T28065—2011

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国深圳出入境检验检疫局中华人民共和国北京出入境检验检疫局

:、,

本元正阳基因有限公司深圳市检验检疫科学研究院

、。

本标准主要起草人余道坚李建光任鲁风徐浪周琦章桂明陈枝楠汪万春康林仲建忠

:、、、、、、、、、、

向才玉

。

Ⅰ

GB/T28065—2011

地中海实蝇生物芯片检测方法

1范围

本标准确定了地中海实蝇Ceratitiscapitata双翅目实蝇科

(Wiedemann)(DipteraTephritidae)

的生物芯片制备检测和结果判定方法

、。

本标准适用于相关贸易和有害生物监测中地中海实蝇卵幼虫蛹的鉴定和成虫的鉴定或复核

、、。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

地中海实蝇检疫鉴定方法法

SN/T2039PCR

3缩略语

界定的缩略语适用于本文件

SN/T2039。

4方法原理

选择实蝇科昆虫线粒体基因核苷酸片段为分子标记探针将探针按预先设置的排列固

DNACOI,

定于特定的固相支持载体如醛基化基片的表面形成微点阵利用反向固相杂交技术用标记脱

(:),,Cy3

氧胞苷三磷酸荧光标记的样品分子与微点阵上的探针杂交实现多个分子之间的杂交反

(Cy3-dCTP),

应并通过芯片扫描信号的判读来检测样品中特定基因片段的存在最后确定是否为地中海实蝇

,,。

5仪器和用具

扩增仪芯片点样仪芯片扫描仪离心机水浴锅涡旋器冰箱电子天平烘箱磁力搅

PCR、、、、、、、、、

拌器

。

醛基化基片多孔板芯片盖片芯片分隔围栏芯片粘贴工具湿盒杂交盒计时器磁柱芯片架

、、、、、、、、、、

烧杯离心管量筒移液器等

2L、15mL、、。

6试剂

61昆虫基因组提取试剂盒

.DNA。

62快速纯化回收试剂盒

.DNA/。

63去离子水

.。

64

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