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PAGEPAGE21/36下载文档可编辑临床血液学和血液学检验知识点(一)粒细胞系统原始粒细胞(myeloblast :μ,胞体圆或类圆形,核占胞的2/3以上,居中或略偏位,核染色质呈细颗粒状排列均匀,核仁2~5个、较小、清楚;胞浆量少,染天蓝色,有透明感,无颗粒。早幼粒细胞(e μ,较原粒细胞大,核染色质较原粒细胞粗糙,染色质颗粒开始有聚集,核仁可见或消失;胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色,含大小不等、形态不一的紫红色颗粒(即非特异性颗粒)。中幼粒细胞(myelocyte)①中性中幼粒(c myelocyte :μ,胞核椭圆形或一侧开始扁平,可有凹陷,其凹陷处约占细胞的 2/3~1/2核染色质聚集呈索块状,核仁隐约可见或消失;胞浆量多,染淡红或少数区域略偏蓝,含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒(致少有一个区域。②嗜酸性中幼粒(c :μ:核与中性中幼粒③嗜碱性中幼粒(c :μ,核圆形或椭圆形、常常轮廓不清,核染色质较模糊;胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。4、晚幼粒细胞(metamyelocyte)①中性晚幼粒(c metamyelocyte μ核明凹陷呈肾形,马蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超过假设直径的一半,核染色质粗糙,排列更紧密,无核仁;胞浆量多,浅红色,充满中性特异性颗粒。②嗜酸性晚幼粒(c metamyelocyte μ核形及结构与中性晚幼粒相似; 胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。③嗜碱性晚幼粒(c metamyelocyte μ固缩呈肾形,轮廓模糊胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。杆状核粒细胞(stab granulocyte )①中性杆状核粒细胞( c stab e :核凹陷程度超过假设直径的一半, 核径最窄处大于最宽处1/3 以上,呈带状弯曲,核染色质粗糙呈块状;胞浆充满中性颗粒。②嗜酸性杆状核粒细胞(eosinophilic stabe μ核与中性杆状相似;浆内充满嗜酸性颗粒③嗜碱性杆状核粒细胞( c stab e :分叶核粒细胞(segmented granulocyte )①中性分叶核粒细胞(neutrophilic e μ,核呈分叶状,叶与叶之间有细丝相连或全断开,常分2~5叶,核染色质已浓集呈粗的小块状,染深紫红色;胞浆丰富,内含淡红色均匀细小颗粒。②嗜酸性分叶核粒细胞eosinophilic e μ,核多分2叶,核染色质结构与中性分叶核相似;胞浆内充满粗大均匀一致的橘红色嗜酸性颗粒。③嗜碱性分叶核粒细胞(basophilic e μ,核可分4叶或分叶不明显;胞浆分布有少量大小不等的紫黑色嗜碱性颗粒。(二)红细胞系统①原始红细胞(t :μ,呈圆形或椭圆形,边缘常呈钝角状或瘤状突起,核呈圆形,居中或偏位,约占细胞体的4/5 左右核染色质呈颗粒状较原粒细胞粗而密集, 核仁1~3个不等且大小不一,形状不规则,呈浅蓝色或暗蓝色;胞浆量少,染深蓝色、不透明,有油画蓝感,无颗粒。②早幼红细胞(t μ核圆形或椭圆形,约占细胞的2/3核仁模糊或消失;胞浆量增多,染不透明蓝色或深蓝色,边缘可见瘤状突起。③中幼红细胞(c t μ核形,约占细胞的 1/2,核染色质凝聚呈条索状或块状,中间有明显空隙,如压碎饼干样或打碎墨砚感,无核仁;胞浆量相对较多,浆内由于已合成不等量的血红蛋白,可染呈不同程度的嗜多色性。④晚幼红细胞(c t :μ,圆形居中或偏位,占细胞的1/2以下,核染色质致密聚集成结构不清的紫黑色团块状,无核仁;胞浆量较多,因已合成大量血红蛋白,常染浅灰红色或浅红色。⑤网织红细胞(reticulocyte 5μm为晚幼红细胞刚脱核而成,是尚未完全成熟的红细胞,瑞氏染色为多嗜性红细胞 ,用焦油蓝活体染色后在细胞内可见蓝色细颗粒或呈线状或网状结构。⑥红细胞(e :正常红细胞平均为 2μ,呈双微凹之圆盘状,中央较薄,染色浅,边缘较厚,染色深,呈粉红色,无核。(三)单核细胞系统①原始单核细胞(monoblastμ,胞体圆形或椭圆形,1~3胞浆量较其它原始细胞丰富,灰蓝色,不透明,边缘不规则或有伪足状突起。(eμ③单核细胞(monocyte:μ,核形态常不规则,有肾形,状结构,无核仁;胞浆量较多,染不透明的灰蓝色,可见细小红色颗粒。(四)淋巴细胞系统原始淋巴细胞(t :μ,胞体圆形或椭圆形,核呈圆形或椭圆形,核染色质呈细颗粒状,核仁 1~2个;胞浆量少呈淡蓝色,透明,无颗粒。幼稚淋巴细胞(e :μ,核圆形或椭圆形,核染色质仍较细致,核仁可有可无;胞浆量较少,淡蓝色,偶见有少许红色颗粒。淋巴细胞(lymphocyte)密均匀,深紫红色;胞浆量相对较多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的红色嗜天青颗粒。大块状,结构不清楚,染深紫红色;胞浆极少,似裸核样,如可见则呈淡蓝色,一般无颗粒。(五)浆细胞系统原始浆细胞(t :μ,胞体圆形或椭圆形,圆形,占细胞的2/3 以上,居中或偏位,核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁 2~5个;胞浆量多,染深蓝色,不透明,无颗粒。幼稚浆细胞(e :μ,胞体多呈椭圆形,圆形或椭圆形,占细胞的 1/2,居中或偏位,核染色质较原浆细胞粗糙紧密,开始聚集,染深紫红色,核仁模糊或消失;胞浆量多,深蓝色或紫蓝色或呈蓝色火焰状, 不透明,有时可有空泡及少数嗜天青颗粒。浆细胞(eμ,核明显缩小,圆形,占细胞的1/3以下,偏于一侧,核染色质浓集成块状,常排列呈车轮状,无核仁;胞浆量丰富,染蓝色或紫蓝色,不透明,有时有泡沫感,浆内可含有小空泡及/色透明的球状物,称Russell小体,是球蛋白聚集而成。(六)巨核细胞系统1.原始巨核细胞(megakaryoblast μ,胞体圆形或不规形,核大,呈圆形或不规则形,核染色质较其他原始细胞粗,呈粗网状或细条索状结构,染深紫红色,核仁 2~3个,淡蓝色,不清晰,不规则;胞浆量较少,不均匀,不规则,染深蓝色,无颗粒。2.幼稚巨核细胞(e:μ,外形不规则,核亦不规则,有重叠,可扭转呈肾形或分叶状,核染色质呈粗颗粒或粗网状或局部浓集呈小块状,排列紧密,核仁可有可无;胞浆量增多,常有伪足状突出,染蓝色或浅蓝色,在近核处出现或多或少的很细小红色嗜天青颗粒。巨核细胞(megakarycyte)①颗粒型巨核细胞: 可达 外形不规则,较大,形态不规则,多呈分叶状,核染色质较粗糙,排列紧密呈团块状,紫红色,无核仁;胞浆量丰富,染粉红色,夹杂有蓝色,内含大量细小红色颗粒,常聚集呈簇,但无血小板形成。②产板型巨核细胞: 可达 形态大致与颗型巨核细胞相似,唯有不同的一点是胞浆内充满细小的红色颗粒及数量不等的血小板。③裸核型巨核细胞: 是产板型 巨核细胞的胞浆解体后,释放出大量血小板,仅剩一个细胞核,称之为裸核。血小板(t :胞体很小,μ,呈圆形、椭圆形,逗状,不规则形,中心部位有细小紫红色颗粒,无细胞核,涂片上血小板常三五成群堆集出现。(七)其他细胞组织嗜细胞(tissue basophilic cell 又称肥大细胞(mastcell ,μ,呈圆形,椭圆形,梭形,三角形等,核小,呈圆形或椭圆形,居中或偏位,核染色质模糊,结构不清;胞浆充满圆形大小一致的深紫色嗜碱性颗粒。内皮细胞(l cell :μ,形态极不规则,多梭形,核呈圆形或椭圆形,核染色质呈网状,多无核仁;胞浆量少,染淡蓝色,边缘常模糊不清,常沿核长轴的两侧或一端呈尾状伸出,可有细小紫红色颗粒。纤维细胞(fibrocyte :胞体较大,不规则,多为长尾形,核圆形或椭圆形(数个核染色质呈或细或粗的网状结构,核仁 个,不清晰,成熟者无核仁;胞浆丰富,多在细胞两端,染淡蓝色,边界模糊,内含纤维网状物及少许嗜天青颗粒。成骨细胞(osteoblast 胞体较大,长椭圆形或不则形,单个或多个成群分布,核圆形或椭圆形,常偏于细胞一侧,核染色质排列呈粗网状,染深紫红色,核仁可有 1~3个;胞浆丰富,深蓝色或灰蓝色,边缘常呈模糊云雾状。破骨细胞(t :胞体巨大,μ,形态不规则,颇象巨核细胞,核小、数量较多, 3~100个不等,圆形或椭圆形,小大致相等,边缘清晰,彼此独立,无核丝相连,随意排列,核染色质呈粗网状,几乎每个核都有一个蓝色核仁;胞浆丰富,染淡蓝色或浅红色,含大小不等的紫红细小颗粒。脂肪细胞(fatty cell :μ,胞体圆形或椭圆形,核较小形状不规则,常被挤压在一边,核染色质呈细致密网状,无核仁胞浆内充满大量空泡。组织细胞(e :胞体较大,μ,形态多样,一般呈圆形或椭圆形及不规则形,核可有圆形,椭圆形,肾形,核染色质呈疏松网状结构,核仁2~4个不等;胞浆多少不一,染色也常不一致有深蓝,淡蓝,灰蓝色等,边缘多不规则或不清楚,无颗粒或含有少量或细或粗或粗细不一的嗜天青颗粒,可有空泡或含异物等。8.吞噬细胞(e:不是一种独立的细胞,而是胞浆内含有吞噬物质的一组细胞的总称。 具有吞噬功能的细胞有单核细胞、 组织细胞、血管内皮细胞,纤维细胞等。吞噬细胞的形态极不一致,由吞噬物的类型及吞噬物的多少而定。其胞核圆形、椭圆形或不规则形,常一个核,有时为双核,核常被挤压至一侧,核染色质较疏松,核仁可有可无。胞浆多少不一,淡蓝色或淡红色,常有空泡,并有数量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、颗粒、有核细胞、红细胞、血小板、碳核、细菌等。有时吞噬细胞成堆存在。第二节 异常血细胞形态学(4学时)了解:初步认识各种异常血细胞形态, 并画出每一台显微镜下的细图像。血细胞形态在病理情况下,可在胞体、胞核、胞浆等方面发生异常改变。(一)粒细胞系统形态异常白血病时粒细胞改变①胞体:大小不等、畸形。②胞浆:Auer小体,颗粒粗大、增多。Auer小体:是在细胞浆内出现结构均匀一致的红色细棒状小体。 生原因是嗜天青颗粒融合而成。常见于急性非淋巴细胞性白血病细胞浆内。③胞核:畸形、切迹、折叠、凹陷、扭曲、分叶等。如急淋时核易破碎,核分裂象增多。④核浆比:增大、发育不平衡( M2。⑤核仁:大、数量增多、亦可不清楚。巨大粒细胞:可见于中、晚、杆、分阶段。常见巨晚幼、巨杆状。①形态特征:与同期相比,胞体大、核大、核染色质较同阶段细胞细致。②形成原因:核酸代谢障碍。③常见疾病:巨幼贫、 M、MD、M2、抗叶酸类药物治疗后。3.中性粒细胞分叶过多:分 5叶以上,常见于巨幼贫、严重感染复期。4.粒细胞中毒变性改变①中毒颗粒:胞浆颗粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫红色。见于严重感染、大面积烧伤等。②空泡:浆或核内空泡。见于严重感染。③杜勒小体(e:蓝斑,在细胞浆内直径约 μ的蓝色区域见于严重感染,肝硬化等。④核变性:核固缩、核肿胀、核碎裂、核溶解。见于严重感染。(二)红细胞系形态异常1.巨幼红细胞①形态特征:与同期细胞相比,胞体大、核大、核染色质细致、排列疏松“幼核老浆”。②产生原因:核酸代谢障碍。③常见疾病:巨幼贫、 M、MD、抗叶酸治疗后等2.低色素性红细胞①形态特征:与同期细胞相比,浆量少、嗜碱性、着色偏蓝,核染色Hb合成障碍(不能说缺铁)③常见疾病:IDA、Hb病、慢性感染性贫血等。3球形红细胞:<6.4性球形红细胞增多症。椭圆形红细胞:横径/0.78症。靶形红细胞:见于低色素性贫血、地贫等。血功能活跃,多见于溶贫、失血性贫血等。存在。表示骨髓再生加速。铅中毒时多见。裂红细胞:即红细胞碎片。可见于微血管病性溶贫、 DIC及损性。红细胞中出现异常结构①豪-周小体(y ,s:属核残余物。可见于巨幼贫、贫、脾切除后、铅中毒等。②卡波环(t,s ring :可见于铅中毒、巨幼贫等。(三)淋巴细胞形态异常异型淋巴细胞:分浆细胞型 单核细胞、幼稚型。可见于出血热传单及其它病毒感染。2.原、幼淋巴细胞:淋巴细胞白血病、淋巴瘤等。(四)单核-巨噬细胞系统形态异常1.恶组:多形性、多核异组。急单、类单核细胞白血病反应等。戈谢细胞(Gauche:戈谢病。尼曼皮克细胞(k皮克病。(五)巨核细胞系统形态异常ITP。小巨核:大小与成熟淋巴细胞相似,形态不规则,有伪足突起核染色质浓集,无明核仁。可见于白血病、 等。巨大血小板:见于巨大血小板综合症。第二章 检验的基本方法第一节 制片方法(1学时)第一次骨髓穿刺患者,骨髓涂片 8张以上或将所抽骨髓液全部涂完,同时涂外周血片4张。复查病人,骨髓涂片 4张,同时涂外周血片 2张二、脱落细胞制片一般包块穿刺,涂片 1~2张。胸腹水及尿液标本,取 50ml以上离心(3000r/分)10分钟,取沉淀物涂片 2张。脑脊液标本,将全部送检物离心( 3000r/分)沉淀,取沉淀物涂片1张。痰液标本,取可疑部分涂片 3~5张。第二节 血细胞及脱落细胞瑞氏 -姬姆萨染色(1学时一、试剂瑞氏染色液: 称1 克瑞氏染粉,加入 1瓶甲醇(分析纯,约500ml)中混匀,室温放置3个月后应用或每天混匀 1次放置室温连续7天后应用。0.5克姬姆萨(吉氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分析纯)中混匀,放℃水浴箱中3~533ml甲醇(分析纯)中,混匀即可应用。磷酸盐缓冲液(6.8(无水,分析纯)5克磷酸氢二钠(含H2,分析纯) 5 蒸馏水 10000ml溶解混匀备用姬姆萨染色液—磷酸盐缓冲液混合比例:姬姆萨染色液约 加磷酸盐缓冲液约 30~40ml混匀即可应用。每天上下午各新鲜配制 1次。二、染色方法血或骨髓涂片在瑞氏染色液中固定 8秒钟。放入姬姆萨染色液—磷酸盐缓冲液混合液中染色 20分钟慢性粒细胞白血病患者涂片染色30分钟,取出凉干或用滤纸吸干即作镜下观察。第三、四节 血象及骨髓象检验分析步骤( 2学时掌握:血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值, 正常骨髓象的正形态特征。熟悉:常见血液病的临床表现及血象、骨髓象的形态学改变特征。了解:其他系细胞的正常形态及异常形态。(一)血象检验1.在做骨髓穿刺的同时须做血象检验⑴BR、、W⑵涂片染色观察。

PLT计数。①红细胞形态有无异常。②白细胞形态有无异常。③血小板形态及数量有无异常。④有无寄生虫及其他异常细胞。2、作用⑴提供思路↓、WBPLT正常→单纯贫血。WBC ↓、Hb及正常→粒细胞减少或缺乏PLT ↓b及WB正常→ITP。bPL↓WBITPMD、巨幼贫。、PLWBA、急白、巨幼贫。⑵提供诊断依据①骨髓象相似,血象有区别如:球形↑症 骨髓红系↑、血象有核红↑、球形 ↑。IDA 骨髓红系↑、血象无有核红、 中心淡区扩大。②血象相似,骨髓象不同如:AA 血象三系↓、骨髓巨核细胞↓及无白血病细胞。非白血病性白血病 血象三系↓、骨髓有白血病细胞MA 血象三系↓,骨髓粒系、红系、巨核系均有巨幼变。③血象有明显变化、骨髓无变化如:传单 血象淋巴细胞↑、异淋↑(> 、骨髓变化。传淋 血象淋巴细胞↑、异淋↓、骨髓无变化。④骨髓有变化、血象无明显变化如:戈谢病 骨髓有戈谢细胞、血象无明显变化。尼曼-皮克病 骨髓有尼曼-皮克细胞、血象无明变化。(二)骨髓象检查凡疑有血液系统或并发血液系统疾病均应作骨髓穿刺检查1、适应症①检查血常规有问题:血象增高、减少。⑵临床体征有不明原因贫血、出血、发热、骨痛、肝脾淋巴结肿大。2、禁忌症①由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。②晚期妊娠作骨穿检查要慎重。③小儿及不合作患者不宜作胸骨穿刺术。3、标本采集:一般由临床医生作。⑴采集部位:胸骨、脊突、髂骨、胫骨粗隆( 2岁以下小儿。⑵采集质量保证①无菌、严防感染。②死亡病例应在 30分钟内完成。③量不能多,一般不超过 0.2ml,否则导致血稀(混血),影响判诊断。④对某些疾病采取多部位穿刺可提高诊断率。 如转移癌、骨髓瘤等病变或骨痛部位穿刺其阳性率较高;如AA多部位穿刺有利确诊。⑶涂片质量保证①推片时角度太大、太快都使涂片厚,反之则薄。②先涂血片、后涂骨髓片。③骨髓抽太多,制片人应将剩骨髓液的玻片斜立, 用棉花在斜面的部吸去部分血液,再行涂片,底片不能丢。④作好标识:姓名、血片( 、骨髓(。⑤涂片中前3张涂片,对估计 量较好。⑷判定骨髓取材满意的几项指标①抽吸骨髓时病人有特殊的痛感。②骨髓液及涂片均可见骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。③显微镜观察涂片可发现骨髓特有细胞。④含有大量幼粒幼红细胞,粒细胞杆状核与分叶核的比值大于血片中的比值。⑸干抽的概念:是指非技术错误或穿刺位置不当而抽不出骨髓液或只得到少量血液。其常见疾病有:①原发性或继发性骨髓纤维化。②骨髓增生极度活跃,细胞过于浓集。如:白血病、真红。③骨髓增生减低:。④肿瘤骨髓浸润:恶淋、 M、转移癌等4、检验的方法及步骤)低倍镜观察①取材、涂片、染色情况:采用“良好”行评价。②判定骨髓有核细胞增生程度:增生极度活跃:平均约 1增生明显活跃:平均约 1有核细胞与成熟红细胞之比,分五级::1:10增生活跃: 平均约 1:20增生减低: 平均约 1:50增生极度减低:平均约 1:200③观察涂片尾部及边缘有无大的或成群(团)的异常细胞,同时计数全片巨核细胞。)油镜观察①选择部位:在涂片体、尾交界处,选择细胞分布比较均匀处。②有核细胞分类计数:可根据增生程度确定分类总数增生减低及极度减低:分100或200个细胞增生活跃: 分200或500个细胞增生明显活跃及极度活跃:分500个细胞。③观察细胞形态粒系:中毒颗粒、空泡、有无巨幼变粒细胞、 Aure小体等红系:幼红细胞及成熟红细胞有无异常变化。巨核系:小巨核、幼巨产板、巨大血小板、估计血小板量。④注意有无寄生虫。⑤判定低倍镜下观察到的异常细胞性质。)计算结果①根据分类结果计算出各系统及各阶段细胞的百分率。②计算粒红比值:粒细胞系总和 /红细胞系总和。)填写报告①根据骨髓象分类结果,按报告单要求逐项进行填写。②做好骨髓象所见的形态特征描述。)骨髓报告分析及意见①取材、涂片、染色情况:良好、尚可、欠佳。②骨髓增生程度,粒:红 :?。③粒系:④红系:⑤淋巴系或单核系:⑥全片巨核细胞数,根据血小板分布估计其量是多、正常、少。⑦有无寄生虫。⑧血片分类及所见进行描述。⑨写出诊断意见:根据血象、骨髓象和细胞化学染色所见,结合临床资料,提出具体诊断意见或供参考的意见。诊断意见分为以下几种:肯定性诊断:骨髓有特异性变化,临床表现又典型者,如各种白血病M、M、转移癌、戈谢病、尼曼 -皮克病等。支持性诊断:血象、骨髓象有形态改变,可解释临床表现,如 、溶贫等。等,要结合临床、作相应的检查,并动态观察其变化。排除性诊断:如临床上怀疑ITP的患者其骨髓中血小板易见(不少巨核细胞无成熟障碍,即可排除 ITP的可能性。形态学描写:骨髓有些改变,但提不出上述性质诊断意见,可简述其的建议。⑩填写报告日期并签名。5、骨髓象检查的注意事项①由于细胞形态变化多种多样, 故观察细胞时不能根据某一、 二个点就轻易作出肯定性诊断或否定性诊断, 要全面观察细胞的形态变化,结合临床综合分析作出判断。②同一病人的骨髓涂片,可因制作涂片不佳(太厚、太薄) 、染色不好、选择分类或观察的部位不当均易导致判断错误。③观察细胞形态要认识到血细胞的发育是一个连续不断的过程, 对系细胞划分为若干阶段是人为划分的, 在实际观察中常会遇到一些细胞既有上一阶段的某些特征, 又有下一阶段的某些特点,由于血细胞是向成熟方向发育,故一般遇此情况归入下一阶段。④对于个别介于两系统之间的细胞难以判断时,可采用大数归类法(即将此类难以判断的细胞归入细胞多的细胞系) 。如在红系较的骨髓片中,将介于浆细胞与幼红细胞之间的细胞归入红系细胞;介于原粒细胞与原淋巴细胞之间的细胞, 一般情况原粒细胞较原淋巴细胞易见,故应归入原粒;如为急性淋巴细胞白血病的病人,应归入原淋巴细胞。切忌在急性白血病骨髓象中分出多种原始细胞(如原粒、原单、原淋都有)的现象。⑤急性白血病时,各系统原始细胞在理论上虽各有特征, 但有时及为相似很难鉴别,这时应注意观察伴随出现的幼稚细胞、 成熟细胞并与其比较,同时要结合细胞化学染色、血象细胞形态等综合考虑,推测原始细胞的归属。⑥有时可见到难以识别的细胞,可参考涂片上其他细胞后作出判断,如仍不能确定可归入“分类不明细胞” ,但不宜太多,若有一定量,则应通过细胞化学染色、集体阅片或会诊等方法弄清类别。⑦骨髓涂中巨核细胞减少或血小板减,而外周血象中血小板数正常时,则往往是由穿刺凝固或涂片凝固所致。⑧作骨髓细胞学检查时,应同时作血象细胞学检查,这有助于疾病的诊断及化疗后疗效判断。(三)判定骨髓计数值的高低根据骨髓各系统各阶段细胞的计数值与其相应的 SD的离程度进行判断。计数值:在以内 视为正常为减低增高为明显增高

在以下 视在之间 视为在以上 视从第五节起以下的实验课均让学生自已动手做,教师辅导第五节 大致正常骨髓象(4学时)掌握:血象检验结果及骨髓象检验结果的正常值, 骨髓各系统各阶段细胞的正常形态特征,正常骨髓象报告的书写方法。熟悉:其他系细胞的正常形态。一般符合列情况者,可视为大致正常骨髓象。1.骨髓有核细胞增生活跃。21。3.各系统各阶段细胞比值在正常范围,形态无明显异常。①粒系:约占 ,其中原粒< ,早幼粒<,中性中幼粒,中性晚幼粒 ,中性杆状核 ,中性分叶,且杆状>分叶,嗜酸< ,嗜碱<。②红系:约占为主、各约占③淋巴细胞系:约占 ,均为成熟淋巴细胞,原幼淋巴细胞小儿偶见。④单核及浆细胞系:各< 。无原幼单及原幼浆细胞。1.5×3cm的涂片膜上7~35中原巨0,颗粒巨,产板巨,。血小板易见,呈堆存在。⑥其它细胞:可见少量非造血细胞,如组织细胞、内皮细胞、肥大细胞、破骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞等。⑦核分裂象少。⑧无异常细胞及寄生虫。⑨各系细胞形态正常。第六节 临床血液生化和血细胞化一、细胞化学染色(4学时)染色、铁粒染色、床意义。染色、铁粒染色、染色、铁粒染色、染色方法的。(一)碱性磷酸酶染色( )———钙钴法原理 细胞内的碱性磷酸酶在 PH9.2~9.8时将底物β-甘油磷钠水解,产生磷酸根,后者与其质液中的钙离子作用形成磷酸钙,再与硝酸钴起反应,形成磷酸钴,最后与硫化铵作用形成硫化钴黑色沉淀定位于胞浆中。试剂(1)备用试剂:①乙醇 ②l③硝酸钴 ④硫化铵 ⑤β-甘油磷酸钠 ⑥Tris-HCl 缓冲液(PH9.5):Tris6g 溶于400ml水中,加0.1MHCl80ml, 调PH9.5, 加水至500ml(2)孵育液(每次必须新鲜配制):Tris 缓冲液l,20ml,β-甘油磷酸钠 。方法)新鲜血片用乙醇固定10min取出,自然干燥。)将孵育液放入 水浴箱中先预温 5min后,再放入涂片孵育30min, 取出涂片(不冲洗)立即放入硝酸钴中取出用来水充分冲洗干净。)放入硫化铵溶液(每次必须新鲜配制)中 用自来水冲洗干净,用核固红复染 。结果阳性:中性粒细胞胞浆内有棕黑色沉淀。阴性:中性粒细胞胞浆内无棕黑色沉淀。正常参考值成人:积分80 分左右儿童:因年龄而异。临床意义(1)细菌:积分球菌↑↑杆菌,病毒减低或无变化。但 分正常/ ↓,不能除外细菌感染。(2)慢粒↓↓,类白↑~↑↑。正常/ ↓。)恶组↓↓,反应性组织细胞增多↑~↑↑。)增性红细胞增多症↑,继发性红细胞增多正常 。)激素治疗后↑。)妊娠期↑。质量保证)硫化铵每次实验必须新鲜配制。)Tris-HCl 缓冲液的应控制在9.2~9.8 之间。)温度应严格控制在 左右(上下不超过 。)涂片在孵育液中准确温育 30分钟。(验失败。涂片从硝酸钴中取出时应用自来水冲洗 3分钟,否则涂片太脏,结果不好观察。)每次染色必须作对照。(二)铁染色原理 骨髓小粒中的含铁血黄素称细胞外铁,其中的三价铁与分子中的蛋白质结合不牢固,经稀盐酸处理后而游离,并能在酸性亚铁氰化钾溶液中产生普鲁士蓝反应。 细胞内铁也可用此法显示。根据应的强弱了解骨髓中铁的含量。试剂(1)酸性亚铁氰化钾溶液200g/L 亚铁氰化钾溶液 5 浓盐酸 1 份取200g/L亚铁氰化钾溶液置于试管中,缓缓滴加浓盐酸,边滴边摇匀,至出现白色沉淀,再滴加 200g/L亚铁氰化钾溶液,边滴边摇匀,至白色沉淀消失为止,备用。(2)2g/L 核固红—硫酸铝溶液取硫酸铝2g溶于100ml蒸馏水中,再加入核固红 0.2g,置水浴中1小时,并随时振摇,使溶解,过滤后使用。方法(1) 选髓粒丰富的骨髓片,用甲醇固定 10分钟。(2) 髓片上滴满酸性亚铁氰化钾溶液,染色 30分钟。(3) 用蒸馏水冲洗后,用核固红复染 20分钟。结果判断幼红细胞内出现蓝绿色颗粒为阳性。正常参考值正常:细胞内铁>20,细胞外铁+~+IDA :细胞内铁<15,细胞外铁阴性。质量保证(1) 需观察外铁时玻片最好作去铁处理, 取材涂片后应尽量减少染铁,最好立即进行染色。(2) 配。(3) 酸性亚铁氰化钾溶液必须新鲜配制。(4) 选择髓粒丰富的骨髓涂片。(5) 与细胞不在同一平面。(6) 瑞氏染色后的骨髓片,用甲醇脱色后仍可作铁染色。(7) 作阳性对照。临床意义)细胞内、外铁“↓”、吞噬细胞内无贮存铁,可诊断为 。)AC。)/NHb病。)/N可考虑为环形铁粒幼细胞性贫血( 。)MD、A(三)过氧化物酶染色法( PO)原理 细胞内的过氧化物酶(peroxidase 能将底物的过氧化分解,产生新生态氧。后者将试剂中的联苯胺氧化为联苯胺蓝,它是一种不稳定的中间产物,无需酶的作用进而变成棕色化合物沉淀于酶的所在部位。试剂)第一液联苯胺 0.3g360g/L亚硝基铁氧化钠饱和液 1ml乙醇 加至100ml贮存于棕色瓶中,可保存一年。小瓶分装备用。)第二液(稀过氧化氢液,新鲜配制过氧化氢 0.3ml蒸馏水 3.方法)于新鲜干燥血涂片或骨髓涂片上 , 滴加第一液5~8滴,使盖整个血膜,作用 1~2分钟。)滴加等量的第二液,混匀,染 4~8分钟。)勿倾去染液,直接用水冲洗。)干燥后再用瑞氏染液复染4.结果阴性:无蓝色或蓝棕色颗粒。弱阳性:蓝色或蓝棕色颗粒小,分布较稀疏。阳性:蓝色或蓝棕色颗粒略粗,分布较密集。强阳性:蓝色或蓝棕色颗粒粗大。质量保证(1)联苯胺配制在的乙醇溶液中染色效果较好,勿用内渗入而作用减弱。(2)过氧化氢需新鲜配制,其浓度与加入量勿随意更改。临床意义)白血病类型:原始及幼稚细胞②阳性率<3%:ALL

阳性强:AML弱阳性:AMOL)成熟中性粒细胞过氧化物酶变化)、AAAM、AML(4) )二、血液生化试验(选做 4学时)试验、蔗糖溶血试验、Hb电泳及HbF等试验的操作方法,结果判定,正常值及临床意义。试验、蔗糖溶血试验、Hb电泳及等试验的原理。Hb(一)抗人球蛋白试验( 试验,直接法)原理 抗人球蛋白试验(Coombs试验)是用于检验不完全抗体的试验。用正常人血清、血浆或血浆球蛋白注射免疫家兔,使兔体内产生抗人球蛋白抗体(温反应抗体) 。其方法有直接试验和间接试验两种。直接试验的目的是检查病人红细胞表面的不完全抗体、 即经水洗涤后的致敏红细胞悬液中加入抗人球蛋白血清, 观察是否发生凝集,发生凝集者为 直接试验阳性。试剂抗人球蛋白血清,生理盐水。方法)取受检者脱纤维红细胞用生理盐水洗涤 3次。然后配成细胞生理盐水悬液。)将抗人球蛋白血清按 1:2、1:4、1:8、1:16 的比例稀释。(取一块白瓷板,将上述各稀释度抗血清各 1 滴,然后分别加15分钟后观查结果。结果不凝集为阴性,凝集为阳性。按效价报告。正常参考值正常红细胞Coombs试验直接反应呈阴性。质量保证)标本应新鲜。当天进行试验,否则反应减弱甚至呈阴性。)(冷凝集素很高的血标本,试验前应保持在 并用温热水冼涤。(4)因此以脱纤维蛋白血为好。临床意义)自身免疫性溶血性贫血时 直接试验常为阳性。)部分慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤、传染性单核增多症、巨球蛋白血症、 -重链病、、Evan综合征(ITP伴自免溶贫可出现直接试验阳性。(二)糖水试验原理 低离子浓度的庶糖溶液在 温育条件下,可促进补体成分与红细胞膜的结合,使补体敏感的红细胞形成小孔, 庶糖水溶进入红细胞内引起红细胞膜破裂,发生溶血现象。试剂100g/L38g/L枸橼酸钠溶液。方法)取患者枸橼酸钠抗凝血 0.5ml,放于4.5ml100g/L 蔗糖溶液中。)混合后置℃水浴中30分钟。)低速离心,观察上清液有无溶4.结果阴性:无溶血;阳性:有溶血。质量保证器皿必须清洁干燥,以免溶血。每次实验时作正常对照。临床意义)PNH综合征患者亦可阳性。))健康人呈阴性反应。(三)酸溶血试验(s试验).原理 阵发性睡眠性血红蛋白尿症( PN)病人的红细胞由于有缺陷,对补体溶血效应的敏感性增加,在酸化的正常血清中(PH6.6~6.82.试剂(1)25molHCl溶液。(2)8.5g/LnaCl 溶液。方法)取患者血4ml于有小玻璃珠的三角烧瓶内,轻摇使脱纤维,将此去纤维血用生理盐水洗涤红细胞 3次, 配成红细胞液。)取患者血4ml(不抗凝18/36下载文档可编辑PAGEPAGE40/36下载文档可编辑)按(1()方法取与患者同型或 AB型正常对照的血制备细胞悬液和血清。)2支小试管,按下表操作。实验操作步骤反应物待测管对照管健康人血清(ml)0.50.5悬液(ml)健康人悬液0.25molHCl(ml)0.0250.5—0.025——)两管均加塞,置 水浴中1小时。)直接观察或低速离心后观察两管有无溶血现象。结果判断待测管溶血、对照管无溶血为阳性;两管均无溶血即为阴性。质量保证(用脱纤维蛋白血或抽血后立即注入生理盐水中洗涤。(要沿管壁流下,以免溶血。(3)正常血清要新鲜,以免补体失活,造成假阴性。(酸度,以致溶血程度降低。临床意义 结果阳性主要见于 PN。(四)高铁血红蛋白还原试验( MHb-R)原理 高铁血红蛋白还原试验(methemogobin test, 是用亚硝酸钠使血液中的亚铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白,当红细胞内的 含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的, 作为血液中高铁血红蛋白还原酶的辅酶 ,在递氢体美蓝的参与下,使高铁血红蛋白还原为亚铁血红蛋白。 如含量不足或缺时,则高铁血红蛋白还原速度减慢,甚至不能还原。通过测定高铁血红蛋白的还原速度来间接反应 活性。试剂:)12.5g/L 亚硝酸钠—葡萄糖溶液:亚硝酸钠1.25g加水至,棕色瓶4℃可保存一个月。)0.0004mol/L 美蓝溶液:美蓝 15mg放乳钵中,加少量蒸馏研磨后过滤,再加水至 100ml,室温可保存1~2个月。(3) M 磷酸盐缓冲液(PB424g,KP,加水至。方法)取静脉血3ml,加入已有0.3ml38g/L 枸橼酸钠和30mg葡糖的抗凝管内。)离心,使红细胞与血浆之比为 1:1(去掉多余的血浆)。(摇匀,取 1.0ml 全血,加亚硝酸钠-葡萄糖液和美蓝溶液各50ul颠倒混匀12次使与空气中的氧充分接触。加塞水中浴孵育 3 小时。剩余血未加试剂亦同时放入 水浴中孵育3小时。)取出孵育后摇匀的全血 加入含10ml溶液的试管中,2min后于721分光光度计 635nm处比色,水调零,测其光密度为。)另取未加试剂的全血 0.1ml,同(4)操作,测其光密度为 。再于此液中加亚硝酸钠-—葡萄糖液1滴,摇匀,放置5min比色,测其光密度为 。计算高铁血红蛋白还原率(- AS正常参考值

B)×100%B高铁血红蛋白还原率>75为中间缺乏者(合子<30为显著缺陷(半合子或纯合子)质量保证)红细胞比积对结果有一定影响,比积 <30时,高铁血红蛋白还原率可明显降低。故血浆与红细胞之比应严格控制在 当于红细胞比积 。)38g/L的枸橼酸钠或)血液保温后必须充分混匀,再吸取否则结果可能稍大于 。)如果溶血液显示混浊,则不能直接比色,可能有不稳定血红蛋白存在,也可能因患者有珠蛋白生成障碍性贫血以致红细胞脆性降低。前者可离心后用上清液比色,后者可加入 的素1滴,放置待红细胞溶解后再比色。临床意义 G6PD缺乏时,高铁血红蛋白还原率下降。蚕豆病和伯氨喹啉型药物溶血性贫血等患者,均可出现下降结果。 G6PD中间乏值(杂合子)还原率为 ,脐血为;G6P严重缺乏值(纯合子)还原率小于或等于 ,脐血小于。(五)Hb电泳(HbA2定量)原理 血红蛋白电泳(hemoglobin electrophresis 的目的是检出和确认正常和异常血红蛋白。 由于不同血红蛋白所带的电荷的差别,可将其分离和鉴别。正常人血红蛋白 2,在PH8.6缓冲液中电泳,它们均由负极端移向正极端。其移行速度以 HbA最快、次之、2有简便、快速的优点。试剂)电泳缓冲液(巴比妥缓冲液,离子强度 0.06,PH8.6)巴比妥钠6.38g( 分子量206.18)巴比妥0.83g( 分子量184.19)水加到500ml)(TEBPH9.0,0.12M)Tris 20.2gEDTANa·2O硼酸 1.5g加蒸馏水至1000ml)染色液:氨基黑 0.5g甲醇 50ml冰醋酸 水 40ml)漂洗液:无水乙醇 45ml,冰醋酸5ml,水50ml。)0.4MNaOH方法)制备Hb液:新鲜抗凝血(枸橼酸钠抗凝)离心去血浆,用生理盐水洗涤红细胞 3次,然后加入与红细胞等体积的蒸馏水剧烈震荡,使红细胞彻底溶解,加1/2 体积的四氯化碳,震荡用4000r/min 离心吸取上层血红蛋白液备用(此血红蛋白液浓度为100g/L。)点样:取出醋纤膜(已用浸膜液浸泡至少 用滤纸吸去多余液体,在粗糙面距阴极端 1cm处点上血红蛋白液。同时行点上正常血红蛋白液作对照。点样要求均匀、直、细。将膜置于电泳槽支持板的滤纸桥上(点样面向下) 。)40min。)染色、漂洗:取出电泳后的醋纤膜放于氨基黑 10B染液中染然后用漂洗液漂洗数次至无血红蛋白区带处接近无染料色为止。)定量:剪下带分别放入3ml12ml的0.4MNaOH溶液中,振摇,使色带完全洗脱, 波长,用空白调零。计算A

HbA2ODHbA2OD<0.03。

HbAOD 4质量保证)点样过多,色带易脱落或染色不透(尤其是 HbA带会造2相对增高,出现假阳性结果。)电泳后的2要充分分开,否则影响测定结果。)洗脱时要将Hb完全洗脱,否则影响测定结果。)剪带时将F部份剪入,2带要严格控制。临床意义)、、s、、、等血红蛋白异常疾病。)2病时也在22轻度增加还可见于肝病、肿瘤和某些血液病。(六)抗碱血红蛋白( 测定1.原理 HbF 对碱性物质有较大的抵抗力。当血红蛋白溶液中加入氢氧化钾作用1分钟,不发生变性、而其它Hb在碱溶液中可变性,被加入的酸性半饱硫酸铵沉淀而终止反应, 测定其滤液中Hb含量求抗碱血红蛋白百分含量。试剂)1/12mol/LKOH溶液:用1mol/LKOH溶液稀释后标定。)酸性半饱和硫酸铵:取硫酸铵 400g于500ml水中,置水浴24小时,不断搅拌使达到饱和,再冷却至搅拌一次使过量的硫酸铵析出,上清液为饱和硫酸铵溶液。取出此液加蒸馏水加至800ml,混匀后室温保存。方法)21支为对照管,别1支为测定管。对照管先Hb50ul,混匀待测。)于测定管加入 1/12mol/LKOH1.6ml,在于水浴中预温,待温度衡定后,加入0.1mlHb液同时开动秒表,摇匀数秒钟至1分钟整,立即加入半饱和硫酸铵 3.4ml,倒转混匀6次,静置滤取上清液待测。6. 721分光光度计比色,波长,水调零。8. 计算HbF=

测定管OD对照管OD 4正常参考值新生儿很高,占0.31~0.96,以后逐渐下降,三个月后迅速下降,2岁降至正常成人水平。正常成人 <0.022(血研所。质量保证(Hb 变性后抗碱性能力减弱,可使结果偏低。)碱液的浓度和碱化时间要准确。))经变性后的滤液应在 1小时内进行比色。9. 临床意义)HbF绝对增多珠蛋白合成障碍性贫血时HbF,中间型常,轻型小于。遗传性胎儿血红蛋F。)F相对增多 骨髓纤维化、白血病、浆细胞瘤、再障、 PN卟啉病等均可出现相对增多。)HbF生理性增多 孕妇和新生儿期 增加。(七)异丙醇试验原理 非极性溶剂异丙醇,会使不稳定血红蛋白分子内氢键结合减弱,稳定性下降。正常血红蛋白在 40min内保持稳定。不稳定血蛋白在加入异丙醇后 5min内即变混浊,20min形成絮状沉淀。试剂(缓冲液溶于20ml水中用1mol/LHCl(8ml)pH7.4,加水至。(2)异丙醇-Tris 缓冲液:取异丙醇 加0.1mom/LTris缓冲液至100ml,摇匀,室温可保存 1周。方法)取小试管2支,各加入异丙醇-Tris 缓冲液l,加塞于℃水浴中预温。)分别加入新鲜正常 Hb液和待检Hb液0.1ml,混匀,计时,在水浴中5min出现混浊,40min出现沉淀,则为阳性。正常参考值正常Hb在40min内保持稳定不出现混浊。质量保证)Hb液要新鲜,否则会因 Hb自动氧化为高铁 肽链结合力弱,出现假阳性结果。)异丙醇浓度和温度要严格控制, pH不能低于7.2。)b,即可发生假阳性。)若正常对照管出现混浊,则要求重作此实验。临床意义)不稳定血红蛋白的患者该试验常于 5分钟时出现混浊,20钟开始出现绒毛状沉淀。)在、、含量>4、G6P缺乏、 珠蛋白合成障碍性贫血时均可出现阳性结果。第三章 异常骨髓象检查第一节 急性髓细胞白血一、、a(4学时)掌握:急性白血病(1、)的形态学特征及 FA及我国诊断标准骨髓报告书写方法。了解:急性白血病的临床表现。(一)临床特点起病急、重、常有严重感染、发热、出血。肝、脾、淋巴结肿大较急淋轻。绿色瘤常见于此型。(二)实验室检查1:血常规)、PLWB不定。)多数可见一定数量的原粒及早幼粒, Auer小体。)易见有核红细胞2.骨髓象)增生明显~极度活跃。)粒系↑:1型白血病细胞(原粒Ⅰ型 Ⅱ型早幼粒)>;型白血病细胞(原粒Ⅰ型 Ⅱ型早幼粒)~。)Auer小体。(三)细胞化学染色PO或S染色:白血病细胞阳性率≥ ,但部分1型可<。二、3型(4学时)掌握:急性白血病(3)的形态学特征及 FA及我国诊断标准,骨报告书写方法。(3)的临床表现。(一)临床特点1胃肠道、泌尿道、阴道、颅内等。2.易并发DIC发生机制:(1)PLT减少和功能异常→出血。(异常早幼粒细胞浆内含大量颗粒→颗粒内容物的释放→ a.组凝血活酶→激活外源性凝血系统→促进凝血; b.纤溶酶原激活物(t-PA →纤溶酶原(PL(P。(二)实验室检查血象)三系↓,少数 WB↑。)分类可见异常早幼粒细胞,其特点:大小不一,外形多不规则,圆形、类圆形、肾形、畸形、凹陷、折叠、扭曲或分叶状。核略小、常偏位,可见双核,核仁 3个不等,有的被颗粒遮盖而不清楚。胞浆丰富,染蓝色或灰色,内含大量大小不等的紫红色颗粒,易见胞浆分为内、外两层(即称内外浆),易见Auer小体、可呈束状交叉列。骨髓象)增生明显~极度活跃,少数增生↓。)异常早幼粒细胞明显↑,占 ~(,易见Auer小体。细胞化学染色SB染色:强阳性。染色:积分明显↓。染色:阳性或强阳性。三、M5型(4学时)掌握:急性白血病(5)的形态学特征及 FA及我国诊断标准,骨报告书写方法。(5)的临床表现。(一)临床特点1.是皮肤、粘膜浸润(疡等。2.肝、脾、淋巴结肿大。(二)实验室检查1.血象)三系↓,少数 WB↑。)分类可见一定量的原幼单细胞,部分亦可见成熟单核细胞↑2.骨髓象)增生明显~极度活跃。)以原幼单核细胞增生为主:(M5,原单、幼单、成熟单均可见。)部分患者可见到 1~2条细长的Auer小体。3.细胞化学染色SB染色:原单阴性或弱阳性,幼单阳性。)非特异性酯酶染色:阳性,可被 NaF抑制。(弱阳性;幼单呈阳性。第二节 慢性白血一、慢性粒细胞白血病( 4学时)掌握:慢性粒细胞白血病的形态学特征及诊断标准, 骨髓报告书写方法急性白血病(5)的临床表现。慢粒(chronic myelocytic a )是一种获得性血干细胞恶性克隆性疾病,主要涉及髓系。(一)临床特点常因左下腹肿块而就诊。乏力、轻度贫血。脾大最突出,常为巨脾。半数肝轻度大,淋巴结大罕见。临床自然病程分:慢性期、加速期、急变期。(1)慢性期:不易感染及发热。(可发生绿色瘤或骨髓纤维化。(浸润等。(二)实验室检查1.血象9(1)b早期正常,少数轻度↓, WB及PL↑(WB常>×0/L,9PLT10~×/L、可高达×9/L。(分类:有不同分化阶段的粒细胞,并以中性中幼粒以下阶段偏成熟的为主,原粒ⅠⅡ<;嗜碱粒细胞↑、可高达 ~(慢粒的特征之一);嗜酸性粒细胞及单核细胞可↑;伴贫血者可见有核红细胞;随病情进展,加速期原粒可> 急变期可>。2.骨髓象)增生极度活跃。)粒红比例明显↑,可高达 10~50:1。)红细胞系:早期正常,晚期受抑制。(分类:中性中、晚幼粒及杆状核↑;原粒及早幼粒易见,原粒ⅠⅡ<;嗜碱和嗜酸↑。加速期和急变期原始细胞逐渐↑,其中加速期原粒Ⅰ+Ⅱ或原幼淋或原幼单> <,急变期:原粒Ⅰ Ⅱ或原幼淋或原幼单≥ 少数病例可见与 cell 和海蓝组织细胞(Blue sea cell 相似的吞噬细胞。细胞化学染色NAP 染色:阳性率明显↓,积分明显↓、甚至为 0分;但急变可↑。血液生化检查:血清乳酸脱氢酶、尿酸、溶菌酶↑。(三)鉴别诊断:应与下列疾病鉴别类白血病:特点为(1)WCPLT正常。分类可出现一定量的中晚幼粒细胞,甚至有原粒、早幼粒,但无嗜碱性粒细胞↑, ↑↑。(/或中毒变性改变。骨髓纤维化:特点为)一般无贫血,脾肿大没有 明显。)成熟异常红细胞增多,明显易见泪滴状红细胞。)WB正常,少数↑。积分↑或↑↑,亦可正常。(核细胞↑。1)ph染色体(。)bcl/abL 融合基因(。二、慢性淋巴细胞白血病(发几张涂片让大家知晓其特点)(一)临床特点多见于60岁以上的老年人,男多于女。起病缓慢,早期无症状。全身淋巴结进行性肿大(一般二个区域以上)肝、脾轻度肿大。易并发自身免疫性溶血性贫血。晚期可贫血、出血。患者的死因之一。病程长短悬殊大,生存期平均约为 4~6年,短至于~2年、长至5~10年、甚至20年。慢淋急变极少,仅占 。(二)实验室检查血象99(1)bPLTWB×0/L6.0×10/L。99(血片中蓝细胞↑,分类可见少量原始及幼淋巴细胞、其特点:原始及幼淋巴细胞核染色质疏松,核仁较明显,胞浆呈蓝色或浅蓝色、量较多。骨髓象)增生明显~极度活跃。)分类淋巴细胞比值明显↑,≥ ,原始及幼稚淋巴细胞>。)粒红二系增生↓,但粒红比例可正常。)当发溶血时,幼红细胞可明显增生。)巨核细胞系正常,但晚期减少3.细胞化学染色PAS 染色:淋巴细胞呈阳性(或粗颗粒状阳性) 。4.血液生化检查部分病例直接抗人球蛋白试验( ’s)阳性。(三)鉴别诊断:诊断 CLL并不困难,但必须除外其它引起淋巴胞增高的疾病,故应与下列疾病相鉴别。传淋:儿童多见。(1)百日咳(2)结核:外周血淋巴细常增高,但骨髓象一般淋巴细胞< 。幼淋巴细胞白血病:幼淋> 。多毛细胞白血病:多数细胞边缘有毛刺状或毛发状突起。第三节 急性淋巴细胞白血病L1、、L3型(4学时)掌握:急性淋巴细胞白血病( L1、、L3 型)的形态学特征及诊标准,骨髓报告书写方法。(、、L3型)一、临床特点多见于儿童及青壮年,且男多于女。肝、脾、淋巴结肿大较其他白血病明显。易出现骨关节疼痛及胸骨压痛。在所有急性白血病中最易并发中枢神经系统白血病。二、实验室检查(一)血象1WB、PLT常↓。23.背景涂沫细胞↑。4.无Auer小体。5有核红细胞及幼稚粒较少见。(二)骨髓象增生程度多为极度活跃,极少数增生可↓。粒细胞系、红细胞系、巨核细胞系↓。原幼淋巴细胞明显↑。涂沫细胞常↑(这是急淋的特征之一) 。(三)细胞化学染色或SB染色:原幼细胞阳性率< 。染色:积分明显↑。PAS排列。T-ALLB-ALL阴性。第四节 多发骨髓瘤(4学时)(一)概念:多发性骨髓瘤( multiple myeloma ,M:是骨髓单一浆细胞株异常增生的一种恶性肿瘤。(二)临床特点:多见于中老年人,50岁以上多见,少数 40岁以上,男多于女。常有贫血及出血。最突出的症状是骨痛(是本病的主要症状之一) ,且逐渐加重。易发生病理性骨折。易出现骨骼肿物(瘤细胞浸润所致)头颅骨等。易反复或持续感染。易发生肾脏损害(是本病较常见的特征性临床表现) 。高钙血症。高粘滞综合征:血中产生大量 M蛋白→血粘度↑→血液浓缩障碍→微循环瘀血→缺氧等一系列症状。(三)实验室检查1.血象②血涂片红细胞常呈“缗钱状”排列。③ESR明显增快。④WB正常或偏低。分类淋巴细胞可相对增多,部分病例可见少量常浆细胞,多为 。⑤PLT正常或偏低。2.骨髓象①增生活跃~(包括原幼浆细胞及成熟浆细胞)70~90%与浆细胞极为相似,大小不等,一般较大,形态不一,多成堆分布。呈圆形、椭圆形或不规则形,核呈圆形或卵圆形,可有凹陷,胞体大的可有双核或多核,常偏位,核染色质较正常浆细胞细致, 呈粗的疏松网状结构,可有1~2个核仁,胞浆量丰富,边缘常不整齐,呈深蓝、灰蓝或略带红色,不透明,可有空泡,偶见少量细小颗粒,个别病例可见紫红色粗大的包涵体( Russell 小体,为Ig 的轻链形成②红细胞系、粒系、巨核系可正常,但常受抑制。3.其它检查)血液生化检查血中出现大量异常的单克隆免疫球蛋白引起高球蛋白血症是本病的重要特征之一。①血清白蛋白/球蛋白比值倒置。②查血清钙:钙↑。③查肾功能:常有肾功能异常,尿素氮及肌酐↑,内生肌酐清除率↓。④血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳:异常增多的单克隆免疫球蛋白表现为一浓集的窄带,经密度扫描仪绘出的图象为一窄底的高峰, 即为成(或称蛋白成分可出现在γ区(IgGIgβ或α2(IgA当成分显著↑时,其他免疫球蛋白及血清蛋白常明显↓。⑤免疫电泳:表现为异常沉淀弧,在出现一种异常重链沉淀弧和一种异常轻链沉淀弧的同时,另一种轻链和其他类型重链常明显减少。 根据免疫电泳结果可以确定单克隆免疫球蛋白类别, 从而对多发性骨髓瘤进行分型,即 IgG型(多见、IgA型、IgM型、IgD型、IgE型、轻链型、双克隆或多克隆型、不分泌型(极少见,血清中无 成分尿中无B-J蛋白。⑥聚合酶链反应(PC近年来采用PC技术检测免疫球蛋白重链基因重排作为单克隆 B细胞—浆细胞恶性增生的标记,用于本病的诊及与良性反应性免疫球蛋白增多的鉴别诊断。)尿液检查①常规检查:有蛋白尿、镜下血尿、管型尿(少见)等,有时可见到浆(瘤)细胞。②查蛋白(又称凝溶蛋白)Ig游离的轻链(κ或λ链通过肾小球从尿中排出形成。轻链型血浆中无M蛋白。故查J蛋白阳性者具有诊断意义。(3)X线及其他影象学检查:在本病的诊断中具有重要意义。可有以下几点异常:①弥漫性骨质疏松。常见于脊柱、肋骨、骨盆、颅骨及四肢长骨等。②溶骨性病变,是由骨质疏松病变进一步发展而造成的。③病理性骨折,常见于胸椎、上腰椎及肋骨等。多表现为压缩性骨折。(四)诊断与鉴别诊断主要诊断依据(1)40岁以上,有骨痛、贫血、 增快,高血钙。)血清中有大量 蛋白或尿中有J蛋白。)骨髓中浆细胞增多大于 ,若为典型的 M,比例在~之间也可考虑本病。)无其它原因的溶骨性损害或广泛性骨质疏松。与反应性浆细胞增多的鉴别)反应性浆细胞增多可出现于慢性炎症、感染、伤寒、肝病)反应性浆细胞增多本身的临床表现和特点与无相同之处,而浆细胞数量也没有M蛋白,骨骼亦无样改变。第五节缺铁性贫血(4学时)(方法。了解:缺铁性贫血的临床表现及其他检查结果。缺铁性贫血(irondeficiencyanemia ,是指由于体内贮存铁耗尽而缺乏,又不能得到足够的补充,致使用于合成 Hb的铁不足所引起的贫血。体内铁缺乏有一个发展过程, 最早是在体内贮存铁耗尽(缺铁早期,ID,继之红细胞内发生缺铁,称为缺铁性红细胞生成(ID,最后才发生缺铁性贫血( ID。铁缺乏症是 ID、IDIDA三个阶段的总称。(一)临床表现贫血的常见症状是头晕、头痛、乏力、易倦、心悸、活动后气短、眼花、耳鸣等。(二)实验室检查血常规(100g/L;(2明显小低贫特征(MC<l MC<2.骨髓:增生活跃或明显活跃;粒:红↓;粒系:↓/N,形态无明显异常,注意 。

0.32。红系:↑,以中晚幼红为主,细胞体积小,边缘不规则,呈锯齿状,胞质偏蓝,质量少;核较小,染色质较深。此即 IDA的“核老幼”现象。巨核:注意量和形态,如有出血时,作巨核细胞分类。3(三)诊断缺铁早期(ID:或称潜在缺铁期,此时公有体内贮存铁的消耗。符合以下任何一条即可,① ;②骨髓铁染色骨髓小可染铁消失。缺铁性红细胞生成期(ID:指红细胞摄入铁较正常时为少,但细胞内Hb的减少尚不明显。符合缺铁的诊断标准,同时有以下任何一条者即可诊断:①转铁蛋白饱合度< 。②红细胞内游离原啉>0.9umol/L 或>4.5g/gHb。缺铁性贫血(ID:指除上述两个阶段改变外,红细胞内 减少明显,呈小细胞低色素性贫血。诊断依据:①小细胞低色素性贫血。②有明确的缺铁原因和临床表现。③符合 ID和IDE中的任何两条者。④铁粒幼细胞< 外铁阴性。⑤用铁剂治疗有效。第六节 巨幼红细胞性贫血(4学时)掌握巨幼细胞性贫血的形态学特征及诊断标准, 骨髓报告书写方法了解:巨幼细胞性贫血的临床表现及其他检查结果。巨幼红细胞性贫血(megalobastic,M)和(或)叶酸缺乏或其他原因导致合成障碍,使细胞核发育障碍所致的一类贫血。本病患者骨髓中粒系、红系和巨核系三系出现巨幼变为其特征,外周血表现为大细胞性贫血并有中性粒细胞核右移,可同时有三系细胞减少。(一)临床表现除具有一般贫血的症状外尚有:)牛肉样舌:舌乳突萎缩,舌面呈苍白光滑或红而光滑。)黄疸:面容柠檬色——原位溶血引起。(二)实验室检查血常规:(100g/L;)MC↑、MC↑、↑;)WC多数↓,中性粒细胞分叶过多, 5叶>,6叶>;9(骨髓:增生活跃/明显活跃,粒:红↓。

/L,PD↑。红系(有核红):特征:胞体大,胞质丰富;胞核大,染色质呈疏松网状或点网状,副染色质明显,核着色较正常幼红细胞浅;核、质发育不平衡,细胞质较核成熟,呈“核幼质 老”改变。可双核及多核巨幼红细胞。核分裂象多见。粒系:巨晚幼、巨杆状(特征:胞体增大,直径可达 核肿胀、粗大,形态可不规则,核染色质疏松,可有空泡或染色不良现象。巨核:体积增大,分叶可以增多。铁染色:①内外铁均↑,单纯 M;②内铁↓,双相性。(三)诊断病史:有引起 VitB12 、叶酸缺乏的原因,如营养问题、化道疾病。临床表现:贫血等系列症状。血象:三系↓,中性粒细胞分叶过多(右移,重度感染亦引起,但有中毒颗粒, ↑。骨髓:有巨幼改变,但应根据以下情况:①如是小孩、青少年患者出现以上表现,可诊断 M。如消化道检查()→M。消化道检查(-)→诊断性治疗,观察疗效。M——红系巨幼变一般 h消失,最晚h内应消失,但粒系幼变消失很慢,可能要几个星期。MD5.混合性贫血:)MA+ID(双相性贫血):红系可有大、巨幼变,亦可有小低贫表现,铁染色提示缺铁,具有双相性,如变成人则应考虑有消化道疾病。病:长期慢性溶血导致叶酸、VitB12需要量↑,治疗效果不好,则要考虑是否有可能是Hb病。但粒系)MD——治疗无效。第七节再生障碍性贫血(4学时)掌握:再生障碍性贫血的骨髓象特征及诊断标准,骨髓报告书写方法,临床表现及其他检查结果。再生障碍性贫血(aplasticanemia ,是一组由于化学、物理、生物因素及不明原因引起骨髓造血组织显著减少, 被脂肪组织代,导致骨髓造血功能衰竭的一组综合病征。(一)特点TWB↓→感染。(二)临床表现主要为贫血、出血及感染。临床表现的轻重取决于 、WB、TC减少的程度。在此基础上分为急性再障( AA)和慢性再障(。(三)实验室检查血常规:(1)L:正细胞正色素。9(2)WBWB0×0/L:中性↓,有中毒颗粒;淋巴↑(相对。9(100×10/L。99(10/L。骨髓象:增生↓,有些病例可以增生活跃,但至少有一部位增生↓,因此要求作多部位穿刺。粒系:增生↓,各阶段比值↓,中毒变性改变。红系:增生↓/N,晚幼红可见“脱核障碍”现象。巨核:数量↓,TC↓。淋巴:相对↑。非造血细胞: ↑除外其它引起全血细胞减少的疾病。细胞化学:↑,细胞内外铁 /↑。(四)诊断AA年,宝鸡会议)(1)全血细胞减少,网织红细胞绝对值减少。(2)(3)骨髓检查显示至少一个部位增生减低或重度减低。(如增生活跃,须有巨核细胞明显减少)查(4)能除外其他引起全血细胞减少的疾病,如 PN、MD—急性造血功能停滞、骨纤、急白、恶组。 (一般抗贫血治疗无效。AA诊断标准(内脏出血。)血象:除血红蛋白下降较快外,须具备以下 3项中之2项:15×109/L0.5。)骨髓象:①多部位增生减低,三系造血细胞明显减少,非造血细胞增多。如增生活跃需有淋巴细胞增多。 ②骨髓小粒中非造细胞及脂肪细胞增多。AA诊断标准:(1)临床表现:发病慢,贫血、感染、出血均较轻。()血象:血红蛋白下降速度较慢, 、WB、中性粒细胞TC值常较急性AA为高。(3)骨髓象:①三系或二系减少,至少一个部位增生不良,如增生良好,红系中常有晚幼红(炭核)比例增多,巨核细胞明显减少。②骨髓小粒中非造血细胞及脂肪细胞增多。AA不同于成人AA的特点:儿童AA 成人AA体征 1/3 肝大,肋下1~3cm 一般无肝大血象 b 、T↓,WB减少不明显 三系↓约 0109/L骨髓象 粒系、红系明显低于成人 淋巴、非造血细胞明显高成人。疗效 异基因骨髓移植儿童 成人 免疫抑制剂治疗成人。成人>儿童(五)鉴别诊断AA与其它全血细胞减少疾病的鉴别诊断要点:AA与其它全血细胞减少疾病的鉴别诊断要点:全血细胞PNHMDS-RA骨纤(非白血性恶组(M)急性造血功能停滞MA脾亢骨髓转移癌特点AA糖水、试验(病态造血脾大、血片有幼红、幼粒髓象有原、幼白血病细胞脾大、异常组织细胞自限性,巨大原红血片中性↑粒、红系均有巨幼改变血片有幼红幼粒,骨髓成堆癌细胞无无无无无巨大原红,血片淋巴↑无0无第八节 特发性血小板减少性紫癜( 4学时)掌握:特发性血小板减少性紫癜的骨髓象特征及诊断标准, 骨髓报书写方法,临床表现。概念:特发性血小板减少性紫癜 (ITP)是一种免疫性血小板减少疾病。儿童、急性;成人、慢性;女 男一、病因及发病机理1.免疫因素:病人血清中抗血小板抗体,与血小板 Ⅲa结合→单核-巨噬系统清除。2.(2)3.血小板无效生成:巨核、血小板共同抗原性,抗体→巨核成熟障碍,原位破坏。PAGEPAGE22/36下载文档可编辑鼻腔、口腔粘膜出血。也可内脏出血,自限性。1.急性型:3~7岁婴幼儿,紫癜出现前 1~3周常有上呼吸道感染史起病急骤,常伴发热、皮肤紫癜、粘膜和内脏出血。2.慢性型:青壮年,女男,反复发作皮肤紫癜、口腔刷牙出血,月经量过多,内脏出血少。反复发作可轻度脾大,贫血。三、实验室检查1.血象:血小板减少(急性 <2×/L、慢性×9/L,伴有体积增大、畸型、可伴小低贫。2.骨髓象:巨核细胞代偿性增生,急性:幼巨↑、颗粒巨↑、产板巨↓;慢性:颗粒↑、产板↓。 PAIg和PA3测定:PAIg和/或PA3↑。血小板寿命测定:MD(丙二醛)法,寿命缩短。四、诊断标准1巨核细胞增高或正常,伴成熟障碍。无明显脾大。无结缔组织病及其他继发性血小板减少症。符合下列三项之一)皮质激素或切脾有效。)PAIgPA3增高。)血小板寿命缩短EvanITP试验阳性。血栓性血小板减少紫癜( TT:微血管病性贫血,PLT减少。征有:发热、出血、溶血、神经症状及肾脏损害。脾亢:血象三系减少、骨髓粒红二系成熟障碍、明显脾大。(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收获,努力就一定可以获得应有的回报)1 总则1.1 为了加强公司的环境卫生管理,创造一个整洁、文明、温馨的购物、办公环境,根据《公共场所卫生管理条例》的要求,特制定本制度。1.2 集团公司的卫生管理部门设在企管部,并负责将集团公司的卫生区域详细划分到各部室,各分公司所辖区域卫生由分公司客服部负责划分,确保无遗漏。2 卫生标准2.1 室内卫生标准2.1.1 地面、墙面:无灰尘、无纸屑、无痰迹、无泡泡糖等粘合物、无积水,墙角无灰吊、无蜘蛛网。2.1.2 门、窗、玻璃、镜子、柱子、电梯、楼梯、灯具等,做到明亮、无灰尘、无污迹、无粘合物,特别是玻璃,要求两面明亮。2.1.3 柜台、货架:清洁干净,货架、柜台底层及周围无乱堆乱放现象、无灰尘、无粘合物,货架顶部、背部和底部干净,不存放杂物和私人物品。2.1.4 购物车(筐)、直接接触食品的售货工具(包括刀、叉等):做到内外洁净,无污垢和粘合物等。购物车(筐)要求每天营业前简单清理,周五全面清理消毒;售货工具要求每天消毒,并做好记录。2.1.5 商品及包装:商品及外包装清洁无灰尘(外包装破损的或破旧的不得陈列)。2.1.6 收款台、服务台、办公橱、存包柜:保持清洁、无灰尘,台面和侧面无灰尘、无灰吊和蜘蛛网。桌面上不得乱贴、乱画、乱堆放物品,用具摆放有序且干净,除当班的购物小票收款联外,其它单据不得存放在桌面上。2.1.7 垃圾桶:桶内外干净,要求营业时间随时清理,不得溢出,每天下班前彻底清理,不得留有垃圾过夜。2.1.8 窗帘:定期进行清理,要求干净、无污渍。2.1.9 吊饰:屋顶的吊饰要求无灰尘、无蜘蛛网,短期内不适用的吊饰及时清理彻底。2.1.10 内、外仓库:半年彻底清理一次,无垃圾、无积尘、无蜘蛛网等。2.1.11 室内其他附属物及工作用具均以整洁为准,要求无灰尘、无粘合物等污垢。2.2 室外卫生标准2.2.1 门前卫生:地面每天班前清理,平时每一小时清理一次,每周四营业结束后有条件的用水冲洗地面(冬季可根据情况适当清理),墙面干净且无乱贴乱画。临床血液学和血液学检验知识点(一)粒细胞系统原始粒细胞(myeloblast :μ,胞体圆或类圆形,核占胞的2/3以上,居中或略偏位,核染色质呈细颗粒状排列均匀,核仁2~5个、较小、清楚;胞浆量少,染天蓝色,有透明感,无颗粒。早幼粒细胞(e μ,较原粒细胞大,核染色质较原粒细胞粗糙,染色质颗粒开始有聚集,核仁可见或消失;胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色,含大小不等、形态不一的紫红色颗粒(即非特异性颗粒)。中幼粒细胞(myelocyte)①中性中幼粒(c myelocyte :μ,胞核椭圆形或一侧开始扁平,可有凹陷,其凹陷处约占细胞的 2/3~1/2核染色质聚集呈索块状,核仁隐约可见或消失;胞浆量多,染淡红或少数区域略偏蓝,含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒(致少有一个区域。②嗜酸性中幼粒(c :μ:核与中性中幼粒③嗜碱性中幼粒(c :μ,核圆形或椭圆形、常常轮廓不清,核染色质较模糊;胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。4、晚幼粒细胞(metamyelocyte)①中性晚幼粒(c metamyelocyte μ核明凹陷呈肾形,马蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超过假设直径的一半,核染色质粗糙,排列更紧密,无核仁;胞浆量多,浅红色,充满中性特异性颗粒。②嗜酸性晚幼粒(c metamyelocyte μ核形及结构与中性晚幼粒相似; 胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。③嗜碱性晚幼粒(c metamyelocyte μ固缩呈肾形,轮廓模糊胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。杆状核粒细胞(stab granulocyte )①中性杆状核粒细胞( c stab e :核凹陷程度超过假设直径的一半, 核径最窄处大于最宽处1/3 以上,呈带状弯曲,核染色质粗糙呈块状;胞浆充满中性颗粒。②嗜酸性杆状核粒细胞(eosinophilic stabe μ核与中性杆状相似;浆内充满嗜酸性颗粒③嗜碱性杆状核粒细胞( c stab e :分叶核粒细胞(segmented granulocyte )①中性分叶核粒细胞(neutrophilic e μ,核呈分叶状,叶与叶之间有细丝相连或全断开,常分2~5叶,核染色质已浓集呈粗的小块状,染深紫红色;胞浆丰富,内含淡红色均匀细小颗粒。②嗜酸性分叶核粒细胞eosinophilic e μ,核多分2叶,核染色质结构与中性分叶核相似;胞浆内充满粗大均匀一致的橘红色嗜酸性颗粒。③嗜碱性分叶核粒细胞(basophilic e μ,核可分4叶或分叶不明显;胞浆分布有少量大小不等的紫黑色嗜碱性颗粒。(二)红细胞系统①原始红细胞(t :μ,呈圆形或椭圆形,边缘常呈钝角状或瘤状突起,核呈圆形,居中或偏位,约占细胞体的4/5 左右核染色质呈颗粒状较原粒细胞粗而密集, 核仁1~3个不等且大小不一,形状不规则,呈浅蓝色或暗蓝色;胞浆量少,染深蓝色、不透明,有油画蓝感,无颗粒。②早幼红细胞(t μ核圆形或椭圆形,约占细胞的2/3核仁模糊或消失;胞浆量增多,染不透明蓝色或深蓝色,边缘可见瘤状突起。③中幼红细胞(c t μ核形,约占细胞的 1/2,核染色质凝聚呈条索状或块状,中间有明显空隙,如压碎饼干样或打碎墨砚感,无核仁;胞浆量相对较多,浆内由于已合成不等量的血红蛋白,可染呈不同程度的嗜多色性。④晚幼红细胞(c t :μ,圆形居中或偏位,占细胞的1/2以下,核染色质致密聚集成结构不清的紫黑色团块状,无核仁;胞浆量较多,因已合成大量血红蛋白,常染浅灰红色或浅红色。⑤网织红细胞(reticulocyte 5μm为晚幼红细胞刚脱核而成,是尚未完全成熟的红细胞,瑞氏染色为多嗜性红细胞 ,用焦油蓝活体染色后在细胞内可见蓝色细颗粒或呈线状或网状结构。⑥红细胞(e :正常红细胞平均为 2μ,呈双微凹之圆盘状,中央较薄,染色浅,边缘较厚,染色深,呈粉红色,无核。(三)单核细胞系统①原始单核细胞(monoblastμ,胞体圆形或椭圆形,1~3胞浆量较其它原始细胞丰富,灰蓝色,不透明,边缘不规则或有伪足状突起。(eμ③单核细胞(monocyte:μ,核形态常不规则,有肾形,状结构,无核仁;胞浆量较多,染不透明的灰蓝色,可见细小红色颗粒。(四)淋巴细胞系统原始淋巴细胞(t :μ,胞体圆形或椭圆形,核呈圆形或椭圆形,核染色质呈细颗粒状,核仁 1~2个;胞浆量少呈淡蓝色,透明,无颗粒。幼稚淋巴细胞(e :μ,核圆形或椭圆形,核染色质仍较细致,核仁可有可无;胞浆量较少,淡蓝色,偶见有少许红色颗粒。淋巴细胞(lymphocyte)密均匀,深紫红色;胞浆量相对较多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的红色嗜天青颗粒。大块状,结构不清楚,染深紫红色;胞浆极少,似裸核样,如可见则呈淡蓝色,一般无颗粒。(五)浆细胞系统原始浆细胞(t :μ,胞体圆形或椭圆形,圆形,占细胞的2/3 以上,居中或偏位,核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁 2~5个;胞浆量多,染深蓝色,不透明,无颗粒。幼稚浆细胞(e :μ,胞体多呈椭圆形,圆形或椭圆形,占细胞的 1/2,居中或偏位,核染色质较原浆细胞粗糙紧密,开始聚集,染深紫红色,核仁模糊或消失;胞浆量多,深蓝色或紫蓝色或呈蓝色火焰状, 不透明,有时可有空泡及少数嗜天青颗粒。浆细胞(eμ,核明显缩小,圆形,占细胞的1/3以下,偏于一侧,核染色质浓

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