第十章微生物的分布与消毒、灭菌

第十章消毒灭菌2023/2/41看书找答案1、什么是正常菌群？2、什么是灭菌、消毒、防腐、无菌及无菌操作？想想消毒、灭菌和防腐有什么区别？2023/2/42第一节微生物的分布一、微生物在自然界的分布（一）土壤中的微生物（二）水中的微生物（三）空气中的微生物2023/2/43二、微生物在人体的分布（一）正常菌群的定义

－分布在人类的体表及其与外界相通的腔道中，在机体免疫机能正常时是无害的微生物群体。2023/2/44（二）人体微生物的分布2023/2/45

（三）正常菌群的作用1、生物拮抗作用——屏障

2、免疫作用—免疫刺激3、营养与代谢作用——合成维生素4、抑制肿瘤的作用

2023/2/46占位性生物屏障作用2023/2/47细菌方面机体方面正常菌群/非致病菌条件致病菌？寄生部位改变菌群失调免疫功能下降（四）、条件致病菌和菌群失调2023/2/48第二节消毒与灭菌消毒灭菌概念物理方法化学方法生物学方法2023/2/49消毒:杀死物体或介质中的病原微生物的方法（芽胞及非病原微生物不一定能杀死）。灭菌:杀死物体或介质中所有微生物的

方法（包括所有细菌繁殖体及芽

胞）。判断标准？消毒灭菌有关概念防腐（抑菌）:防止或抑制微生物生长繁殖的方法。（微生物不一定死亡）2023/2/410无菌操作:防止细菌进入机体或对象的技术，称无菌操作。无菌:在一定范围内没有活的微生物存在。2023/2/411无菌操作2023/2/412一、物理方法常用方法（一）热力法（干热、湿热）（二）辐射（紫外线、电离幅射、微波）（三）滤过除菌（除菌滤器、适用物品）（四）超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细胞、提取抗原）（五）干燥（六）低温

2023/2/413（一）热力灭菌法原理：使微生物蛋白质变性凝固，酶失活；核糖体解体破坏细胞膜的结构；微生物体内的DNA断裂。热力灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法2023/2/414

焚烧----最彻底的灭菌方法烧灼----直接用火焰灭菌方法如接种环、试管口、三角瓶口干烤----加热160-170℃2h

药粉、玻璃器皿、陶瓷1、干热灭菌法红外线----热效应，与干烤类似灭菌效果：可杀死营养体和芽胞2023/2/415灼烧灭菌法红外线接种环灭菌器2023/2/416干烤灭菌法电热烘箱真空干燥灭菌箱实验室常用设备2023/2/417湿热灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好原因1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固2、湿热的穿透力比干热强3、湿热的蒸汽有潜热2023/2/4182、湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的湿热灭菌法121℃15-20mim（杀芽胞)煮沸消毒法水煮100℃5mim(杀繁殖体)-5h(杀芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法间歇灭菌法水蒸汽100℃15-30mim(杀繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞）较低的温度61℃30mim/71℃30s（杀致病菌）2023/2/419方法：水中煮沸15min灭菌效果：可杀死所有营养细胞和一部分芽胞适用对象：玻璃注射器和外科器械的消毒。Cncnc-micro（1）煮沸法2023/2/420方法：100℃蒸汽持续15－30min效果：杀繁殖体适用范围：外科手术器械、注射器、胶管或食具等（2）流通蒸汽消毒法2023/2/421奶瓶消毒器2023/2/422方法：常压蒸汽反复几次进行灭菌。适用对象：不宜高压灭菌的培养基，

不耐热的药物和营养物、发酵车间的管道等。灭菌效果：可杀死芽胞。（3）间歇灭菌法2023/2/423适用对象：牛奶、奶酪、果汁、酒类、糖浆等食品消毒。方法：61.7－62.8ºＣ处理30min或71.6ºＣ度处理15秒或82℃处理4秒效果：消毒（4）巴氏消毒法（低温消毒法）2023/2/4242023/2/425UHT技术（超高温灭菌瞬时灭菌）135℃~152℃2023/2/4262023/2/427

灭菌效果：杀芽孢适用范围：耐高温的物体，如普通培养基、生理盐水、玻璃器皿、敷料、手术器械、某些注射液、手术衣等。湿热灭菌法中效果最好的方法（5）高压蒸气灭菌2023/2/428①高压蒸汽灭菌法温度/℃压力/kPa(kg/cm2)时间/min11040.52(0.4)4011570.91(0.7)30120101.3(1.0)20125141.82(1.4)15130182.34(1,8)10灭菌条件最常用是：121℃，103.1kPa，15-20min2023/2/429高压蒸汽灭菌锅2023/2/430常用设备：手提式热压灭菌器2023/2/431①高压蒸汽灭菌法常用设备：卧式热压灭菌柜2023/2/432高压蒸气灭菌注意点:检查压力表是否灵敏，压力与温度是否对应灭菌初期先排净锅内冷空气;灭菌时间计算：达到规定压力和温度开始计。锅内水分要充足;灭菌物品装量不宜太满;灭菌结束需缓慢减压；灭菌结束，趁热取出物品。2023/2/433（二）辐射1、日光与紫外光

紫外线杀菌机理：波长265nm的杀菌作用最强干扰DNA的复制与转录

穿透力较弱表面消毒：不耐热物品特点：适用范围：空气消毒：手术室、传染病房、车间、微生物实验室

灭菌效果:杀营养体使用时注意防护！2023/2/434杀菌机理：适用范围：2、电离辐射包括高速电子、X射线和γ射线产生游离基,破坏DNA。一次性医用塑料制品的消毒食品的消毒-不破坏其营养成分

2023/2/435（三）滤过除菌法物理阻留方法：

除去液体或空气中的细菌滤菌器滤膜孔径0.22－0.45μm,

不能除病毒、支原体

适用范围血清、毒素、输液、生物制品、抗生素以及空气等的除菌2023/2/436过滤灭菌2023/2/4372023/2/4382023/2/4392023/2/4402023/2/441（四）超声与超声波：使微生物细胞裂解破碎。2023/2/442（五）干燥：脱水和盐类浓度增高。2023/2/443（六）低温：抑制生长繁殖。4－10℃存活数月；－273℃可长期保存菌种。2023/2/4442023/2/445

常用的物理消毒灭菌方法种类方法效果适用范围干热灭菌法焚烧法直接燃烧灭菌废弃污染物、或焚烧炉有传染性的内燃烧动物尸体等

烧灼法直接用火焰烧灭菌接种环、试管口或瓶口干烤法干烤箱内灭菌耐高温物品160～170℃2-3h灭菌玻璃物品、瓷器等

2023/2/446种类方法效果适用范围湿热灭菌法

巴氏消毒法62.1-62.8℃30min

消毒牛奶、酒类、

或71.1℃15～30s

糖浆、果汁

煮沸法l00℃5-10min

杀死繁殖体外科手术器械、

注射器、

胶管或

食具等流通蒸气消毒法阿诺氏灭菌器消毒同上或普通蒸笼进行间歇灭菌法反复多次的灭菌不耐热物流通蒸气品或特殊条

件下的灭菌

2023/2/447种类方法效果适用范围高压蒸气灭菌法高压蒸汽灭菌耐高温高

灭菌器内

压手术器

15磅121.3℃15～20min

械、手术

衣、敷料等

一般培养基

10磅115℃15～30min含糖培养基

或注射剂2023/2/448种类方法效果适用范围紫外线消毒法紫外线灯照射消毒空气或物体30—60min

表面消毒品过滤除菌法细菌滤器血清、抗毒素、

生物制品、维生素、蛋白质

2023/2/449二、化学方法利用化学药物破坏微生物的化学组成、物理结构和生理活动，达到防腐灭菌目的。2023/2/450类型名称及使用方法作用原理应用范围醇类70%—75%乙醇脱水、蛋白质变性皮肤、器皿醛类0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）蛋白质变性房间、物品消毒（不适合食品厂）酚类3%—5%石炭酸2%来苏儿3%—5%来苏儿破坏细胞膜、蛋白质变性地面、器具皮肤地面、器具氧化剂0.1%高锰酸钾3%过氧化氢0.2%—0.5%过氧乙酸氧化蛋白质活性基团，酶失活皮肤、水果、蔬菜皮肤、物品表面水果、蔬菜、塑料等（一）化学消毒剂

1、化学消毒剂的种类2023/2/451类型名称及使用方法作用原理应用范围重金属盐类0.05%—0.1%升汞2%红汞0.1%—1%硝酸银0.1%—0.5%硫酸铜蛋白质变性、酶失活变性