GB/T 27531-2011病毒性脑病和视网膜病病原逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测方法

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T27531—2011

病毒性脑病和视网膜病病原逆转录-聚合

酶链式反应RT-PCR检测方法

()

ProtocolofreversetranscritionolmerasechainreactionRT-PCR

ppy()

forthepathogenofviralencephalopathyandretinopathy

2011-11-21发布2012-03-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

病毒性脑病和视网膜病病原逆转录-聚合

酶链式反应RT-PCR检测方法

()

GB/T27531—2011

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100013)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

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年月第一版

20122

*

书号

:155066·1-44037

版权专有侵权必究

GB/T27531—2011

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中华人民共和国深圳出入境检验检疫局

:。

本标准主要起草人刘荭卢体康何俊强史秀杰郑晓聪贾鹏叶奕优杨锦舜

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27531—2011

病毒性脑病和视网膜病病原逆转录-聚合

酶链式反应RT-PCR检测方法

()

1范围

本标准规定了病毒性脑病和视网膜病病原分离和逆

(viralencephalopathyandretinopathy,VER)

转录聚合酶链反应检测方法

(RT-PCR)。

本标准适用于病原的流行病学调查诊断检疫和监测

VER、、。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

出入境动物检疫采样

GB/T18088

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

细胞病变

CPE:(cytopathiceffect)

十六烷基三甲基溴化铵

CTAB:(hexadecyltrimethyammoniumbromide)

焦碳酸乙二酯

DEPC:(diethypyrocarbonate)

溴化乙锭

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

羟乙基呱嗪乙硫磺酸

HEPES:[4-(2-hydroxyerhyl)piperazine-1-erhanesulfonicacid]

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

核酸酶抑制剂

RNasin:(ribonucleaseinhibitor)

病毒性脑病和视网膜病

VER:(viralencephalopathyandretinopathy)

4试剂和材料

41水符合中一级水的规格用处理以除掉酶

.:GB/T6682,DEPCRNA。

42病毒参考株

.VERV。

43胰酶混合消化液见附录中

.-EDTA(AA.1)。

44培养液见附录中

.L-15(AA.2)。

45细胞系用培养液培养

.SSN-1:L-1525℃。

46细胞系用培养液培养

.E-11:L-1525℃。

47逆转录酶保存不要反复冻融或温度剧烈变化

.AMV:20U/μL,-20℃,。

48