标准解读

《GB/T 25170-2010 畜禽基因组BAC文库构建与保存技术规程》是一项国家标准,旨在为畜禽基因组的细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome, BAC)文库构建及保存提供一套科学、规范的技术指导。该标准适用于所有涉及畜禽遗传资源保护、开发和利用的研究机构或个人。

根据此标准,BAC文库构建过程包括但不限于以下几个关键步骤:首先是对目标生物样本进行高质量DNA提取;其次是通过限制性内切酶切割获得适当大小的DNA片段;接着是将这些片段连接到载体上,并转化进宿主细胞中;最后是筛选阳性克隆并进行扩增培养以形成稳定的文库。对于每一步骤,《GB/T 25170-2010》都给出了具体的操作指南和技术参数要求,比如推荐使用的试剂种类、反应条件设置等,确保实验结果的一致性和可重复性。

此外,该标准还详细规定了如何对已构建好的BAC文库进行长期保存。这涉及到适宜的存储介质选择(如甘油冻存)、温度控制以及定期复苏检测等内容,目的是保证文库在长时间存放后仍能保持其完整性和活性。同时,也强调了记录管理的重要性,要求对每个环节的信息都要有详尽准确的文档记载,以便于后续查询使用。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2010-09-26 颁布
  • 2011-03-01 实施
©正版授权
GB/T 25170-2010畜禽基因组BAC文库构建与保存技术规程_第1页
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文档简介

ICS6502030

B40..

中华人民共和国国家标准

GB/T25170—2010

畜禽基因组BAC文库构建与

保存技术规程

TechnicalregulationoffarmanimalsgenomeBAClibrary

constructionandpreservation

2010-09-26发布2011-03-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T25170—2010

前言

本标准由中华人民共和国农业部提出

本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口

(SAC/TC274)。

本标准起草单位中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

:。

本标准主要起草人关伟军马月辉刘长青潘春留刘洪坤甫亚斌余露露

:、、、、、、。

GB/T25170—2010

畜禽基因组BAC文库构建与

保存技术规程

1范围

本标准规定了畜禽基因组文库构建方法

BAC。

本标准适用于猪牛羊马驴鸡鸭鹅等畜禽的基因组文库构建与保存

、、、、、、、BAC。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款凡是注日期的引用文件其随后所有

。,

的修改单不包括勘误的内容或修订版均不适用于本标准然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究

(),,

是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本标准

。,。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

31

.

基因组文库genomelibrary

用重组技术将某种生物细胞的核的全部片段随机地连接到载体上再转移至适当的宿

DNADNA,

主细胞中通过细胞增殖而形成的各个片段的无性繁殖系的总集

,。

32

.

细菌人工染色体bacterialartificialchromosomeBAC

,

以大肠杆菌致育因子为基础利用现代重组技术体外人工合成的具有容纳高分子量外源

,DNA

的特性载体

DNA。

33

.

DNA连接DNAligation

在连接酶催化下靶片段与载体相邻的端磷酸与端羟基之间形成磷酸二酯

DNA,DNADNA5’3’

键的过程

34

.

感受态细胞competentcells

在特定条件下细胞膜通透性发生改变允许外源进入细胞内的特殊状态下的受体细胞

,DNA。

35

.

电转化electrotransformation

在高压脉冲的作用下将外源导入感受态细胞的过程

,DNA。

36

.

脉冲场凝胶电泳pulsefieldgelelectrophoresisPFGE

,

利用脉冲场电泳系统电场方向周期性交替变化的功能而分离和鉴定生物大分子的技术

37

.

重组体recombinant

两种以上不同来源的

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