人教版高中生物选修一专题二《微生物的培养与应用》知识点归纳

·培育基：人们依据微生物对养分物质的不同需求，配制出供其生长生殖的养分基质，是进展微生物培育的物质根底。·培育基依据物理性质可分为液体培育基半固体培育基和固体培育基。在液体培育基中参加凝固剂琼脂〔后，制成琼脂固液体培育基固体培育基应用于微生物的分别和鉴定，半固体培育基则常用于观看微生物的运动及菌种保藏等。·依据成分培育基可分为人工合成培育基和自然培育基。合成培育基是用成分的化学自然培育基是用化学成分不明的自然物质配制而成，常用于实际工业生产。·依据培育基的用途，可将培育基分为选择培育基和鉴定培育基。选择培育基是指在培育鉴别培育基同类别的微生物。·水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。·CONaHCO等无机碳源；糖类、石油、2 3花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。·氮源：能为微生物的代谢供给氮元素的物质。如NNHNO-、NH+〔无机氮源〕蛋白质、2 3 3 4氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨〔有机氮源〕等。N。2·培育基还要满足微生物生长对pH、特别养分物质以及氧气的要求。例如，培育乳酸杆菌时需要在培育基中添加维生素，培育霉菌时须将培育基的pH调至酸性，培育细菌是需要将pH中性或微碱性，培育厌氧型微生物是则需要供给无氧的条件·无菌技术·获得纯洁培育物的关键是防止外来杂菌的入侵，要留意以下几个方面：①对试验操作的空间、操作者的衣着和手，进展清洁和消毒。②将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进展灭菌。③为避开四周环境中微生物的污染，试验操作应在酒精灯火焰四周进展。④试验操作时应避开已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触。无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效避开操作者自身被微生物感染。·消毒与灭菌的区分消毒指使用较为温存的物理或化学方法仅杀死物体外表或内部一局部对人体有害的微生物〔不包括芽孢和孢子〕煮沸消毒法，巴氏消毒法〔对于一些不耐高温的液体〕还有化学药剂〔如酒精、氯气、石炭酸等〕消毒、紫外线消毒。灭菌法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培育基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④外表灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。比较项理化因素的作用强度

消灭微生物的数量

芽孢和孢子能否被消灭消毒 较为温存灭菌 猛烈

局部生活状态的微生物 不能全部微生物 能制作牛肉膏蛋白胨固体培育基方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。倒平板操作的步骤：①将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培育基的锥形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿锥形瓶，将瓶口快速通过火焰。〔约10～20mL〕倒入培育皿，左手马上盖上培育皿的皿盖。④等待平板冷却凝固，大约需5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培育皿盖在下、皿底在上。·倒平板操作的争辩培育基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么方法来估量培育基的温度？可以进展倒平板了。为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培育基。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后，皿盖上会分散水珠，凝固后的培育基外表的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培育基外表的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培育基，造成污染。4培育微生物吗？为什么？微生物。纯化大肠杆菌微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基外表连续划线的操作。将聚拢的菌种逐步稀释的子细胞群体，这就是菌落。稀释涂布平板法是将菌液进展一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的外表，进展培育。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚拢在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培育基外表形成单个的菌落，以便于纯化菌种。平板划线法操作步骤：①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。②在火焰旁冷却接种环，并翻开棉塞。③将试管口通过火焰。④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。⑥左手将皿盖翻开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环快速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。留意不要划破培育皿。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开头往其次区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。留意不要将最终一区的划线与第一区相连。⑧将平板倒置放入培育箱中培育。·平板划线操作的争辩为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作完毕时，仍旧需要灼烧接种环吗？为什么？渐渐削减，以便得到菌落。划线完毕后灼烧接种环，能准时杀死接种环上残留的菌种细菌污染环境和感染操作者。在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进展划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。在作其次次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开头划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开头细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减，最终能得到由单个细菌生殖而来的菌落。涂布平板操作的步骤：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。②取少量菌液，滴加到培育基外表。③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s。④用涂布器将菌液均匀地涂布在培育基外表。涂布平板操作的争辩涂布平板的全部操作都应在火焰四周进展。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，2头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周；等等。菌种的保存对于频繁使用的菌种，可以承受临时保藏的方法。①临时保藏方法放入4℃的冰箱中保藏。以后每3～6个月，都要重将菌种从旧的培育基上转移到颖的培育基上。②缺点：这种方法保存的时间不长，菌种简洁被污染或产生变异。对于需要长期保存的菌种，可以承受甘油管藏的方法。3mL1mL1mL充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。疑难解答生物的养分养分是指生物摄取、利用养分物质的过程。养分物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。人及动物的养分物质：水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。植物的养分物质：矿质元素、水、二氧化碳等三类。微生物的养分物质：水、无机盐、碳源、氮源及特别养分物质五类。确定培育基制作是否合格的方法1～2否则需要重制备。素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是由于他们能合成脲酶。尿素最初是从人的尿液中觉察的筛选菌株试验室中微生物的筛选应用的原理人为供给有利于目的菌株生长的条件〔包括养分、温度、pH等〕，同时抑制或阻挡其他微生物生长。选择性培育基培育基，称作选择培育基。配制选择培育基的依据不参加有机物可以选择培育自养微生物；培育基中不参加氮元素，可以选择培育能固氮的微生物；参加高浓度的食盐可选择培育金黄色葡萄球菌等。统计菌落数目测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进展计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。承受此方法的留意事项：130~3002.为了防止菌落集中，影响计数，可在培育基中参加TTC3.本法仅限于形成菌落的微生物设置比照设置比照的主要目的是排解试验组中非测试因素对试验结果的影响排解任何其他可能缘由的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。试验设计等的综合考虑和安排。土壤取样：同其他生物环境相比，土壤中的微生物，数量最大，种类最多。在富含有pH≈7的土壤中取样。铲去3～8cm的土壤层取样。样品的稀释：样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目。在实际操作中，通常选用肯定稀释范围的样品液进展培育，以保证获得菌落数在30300平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用104105 106测定放线菌的数量，一般选用103 104105测定真菌的数量，一般选用102 103 104微生物的培育与观看不同种类的微生物，往往需要不同的培育温度和培育时间。细菌30~37℃1~225~28℃5~725~28℃3~424因培育时间缺乏而导致一楼菌落的数目。一般来说，在肯定的培育条件下〔一样的培育基、唯独及培育时间〕，同种微生物表现出稳定的菌落特征。外形、大小、隆起程度、颜色。疑难解答〔1〕如何从平板上的菌落数推想出每克样品中的菌落数？3克样品中的菌落数=〔C/V〕*M其中，CV〔ml〕，M纤维素，一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。纤维素与纤维素酶棉花是自然界中纤维素含量最高的自然产物，木材、作物秸秆等也富含纤维素。C酶、C酶和葡萄糖苷酶，1 X成葡萄糖，为微生物的生长供给养分。纤维素分解菌的筛选筛选方法：刚果红染色法。能够通过颜色反响直接对微生物进展筛选。刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反响。当我们在含有纤维素的培育基中参加刚果红时，刚通过是否产生透亮圈来筛选纤维素分解菌。分别分解纤维素的微生物的试验流程〔〕→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上→选择产生透亮圈的菌落土壤采集选择富含纤维素的环境。刚果红染色法分别纤维素分解菌的步骤 倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板刚果红染色法种类课题