pcr上岗证试题及答案2021

pcr上岗证试题及答案2021姓名：____________________

一、选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术全称是什么？

A.聚合酶链反应

B.聚合酶反应

C.聚合酶链式反应

D.聚合酶连串反应

2.PCR技术中最关键的酶是什么？

A.Taq酶

B.DNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.限制性核酸内切酶

3.PCR技术中，以下哪个步骤不需要进行？

A.变性

B.复性

C.延伸

D.洗脱

4.PCR反应体系中，以下哪种物质是必须的？

A.引物

B.dNTPs

C.Mg2+

D.以上都是

5.PCR技术可以用于以下哪个领域？

A.分子生物学

B.医学诊断

C.基因编辑

D.以上都是

6.PCR技术中，以下哪个因素会影响扩增效率？

A.引物设计

B.样本质量

C.反应体系

D.以上都是

7.PCR技术中，以下哪个因素会影响特异性？

A.引物设计

B.样本质量

C.反应体系

D.以上都是

8.PCR技术中，以下哪个因素会影响灵敏度？

A.引物设计

B.样本质量

C.反应体系

D.以上都是

9.PCR技术中，以下哪个因素会影响稳定性？

A.引物设计

B.样本质量

C.反应体系

D.以上都是

10.PCR技术中，以下哪个因素会影响保真性？

A.引物设计

B.样本质量

C.反应体系

D.以上都是

二、填空题（每题2分，共20分）

1.PCR技术的基本原理是__________。

2.PCR反应体系中，变性、复性、延伸三个步骤的循环次数一般为__________。

3.PCR反应体系中，引物的作用是__________。

4.PCR反应体系中，dNTPs的作用是__________。

5.PCR反应体系中，Mg2+的作用是__________。

6.PCR技术中，以下哪种因素会影响扩增效率：__________。

7.PCR技术中，以下哪种因素会影响特异性：__________。

8.PCR技术中，以下哪种因素会影响灵敏度：__________。

9.PCR技术中，以下哪种因素会影响稳定性：__________。

10.PCR技术中，以下哪种因素会影响保真性：__________。

三、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR技术可以用于检测病毒的核酸序列。（）

2.PCR技术可以用于检测细菌的核酸序列。（）

3.PCR技术可以用于检测基因突变。（）

4.PCR技术可以用于基因克隆。（）

5.PCR技术可以用于基因编辑。（）

6.PCR技术可以用于基因表达分析。（）

7.PCR技术可以用于基因测序。（）

8.PCR技术可以用于检测遗传疾病。（）

9.PCR技术可以用于检测肿瘤标志物。（）

10.PCR技术可以用于检测药物残留。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR技术的原理和基本步骤。

2.解释PCR技术中引物的作用及其设计原则。

3.列举PCR技术中可能出现的几种常见问题及其解决方法。

4.说明PCR技术在医学诊断中的应用及其优势。

五、论述题（10分）

论述PCR技术在基因工程中的应用及其重要性。

六、实验设计题（10分）

设计一个PCR实验，用于检测某基因序列是否存在突变。包括实验材料、试剂、仪器、实验步骤和预期结果。

试卷答案如下：

一、选择题答案及解析思路：

1.A.聚合酶链反应

解析思路：PCR的全称即为聚合酶链反应，故选A。

2.A.Taq酶

解析思路：Taq酶是从热稳定性DNA聚合酶中提取的，用于PCR反应中的DNA合成，故选A。

3.D.洗脱

解析思路：PCR的基本步骤包括变性、复性和延伸，不包括洗脱，故选D。

4.D.以上都是

解析思路：PCR反应体系中需要引物来定向扩增特定序列，dNTPs作为DNA合成的原料，Mg2+作为酶的激活剂，故选D。

5.D.以上都是

解析思路：PCR技术广泛应用于分子生物学、医学诊断、基因工程等领域，故选D。

6.D.以上都是

解析思路：扩增效率受引物设计、样本质量、反应体系等因素影响，故选D。

7.A.引物设计

解析思路：引物设计直接决定了扩增的特异性，故选A。

8.D.以上都是

解析思路：灵敏度受样本质量、反应体系等因素影响，故选D。

9.C.反应体系

解析思路：反应体系中的成分和比例会影响PCR的稳定性，故选C。

10.A.引物设计

解析思路：引物设计决定了扩增的保真性，故选A。

二、填空题答案及解析思路：

1.聚合酶链反应

解析思路：根据PCR的全称直接填写。

2.变性、复性、延伸三个步骤的循环次数一般为25-35次

解析思路：根据PCR技术的基本步骤和循环次数填写。

3.引物的作用是定向扩增特定序列

解析思路：引物作为DNA合成的起始点，可以定向扩增目标序列。

4.dNTPs的作用是作为DNA合成的原料

解析思路：dNTPs是DNA合成的原料，用于构建新的DNA链。

5.Mg2+的作用是作为酶的激活剂

解析思路：Mg2+可以激活DNA聚合酶，提高其活性。

6.以下哪种因素会影响扩增效率：引物设计、样本质量、反应体系

解析思路：这三个因素都会影响PCR的扩增效率。

7.以下哪种因素会影响特异性：引物设计

解析思路：引物设计决定了扩增的特异性。

8.以下哪种因素会影响灵敏度：样本质量、反应体系

解析思路：这两个因素会影响PCR的灵敏度。

9.以下哪种因素会影响稳定性：反应体系

解析思路：反应体系中的成分和比例会影响PCR的稳定性。

10.以下哪种因素会影响保真性：引物设计

解析思路：引物设计决定了扩增的保真性。

三、判断题答案：

1.√

2.√

3.√

4.√

5.√

6.√

7.√

8.√

9.√

10.√

四、简答题答案及解析思路：

1.PCR技术的原理和基本步骤：

-原理：利用DNA聚合酶在特定引物的作用下，复制特定DNA序列。

-步骤：变性、复性、延伸。

2.解释PCR技术中引物的作用及其设计原则：

-作用：定向扩增特定序列。

-设计原则：确保引物特异性、避免二级结构、保证Tm值相近。

3.列举PCR技术中可能出现的几种常见问题及其解决方法：

-问题：非特异性扩增、扩增效率低、假阳性结果等。

-解决方法：优化反应条件、调整引物设计、增加循环次数等。

4.说明PCR技术在医学诊断中的应用及其优势：

-应用：检测病原体、遗传疾病、肿瘤标志物等。

-优势：快速、灵敏、特异、简便。

五、论述题答案：

论述PCR技术在基因工程中的应用及其重要性：

-应用：基因克隆、基因编辑、基因表达分析等。

-重要性：提高基因研究效率、推动生物技术发展。

六、实验设计题答案：

设计一个PCR实验，用于检测某