标准解读
GB/T 14926.57-2001 是一项由中国国家标准化管理委员会发布的国家标准,全称为《实验动物 犬细小病毒检测方法》。这项标准详细规定了在实验动物领域中,针对犬细小病毒(Canine Parvovirus, CPV)的检测方法和程序,旨在确保实验结果的准确性和可比性,以及提升实验动物管理和疾病防控水平。以下是该标准的主要内容概览:
标准适用范围
本标准适用于实验动物中犬细小病毒的检测与诊断,主要针对使用实验犬进行科研活动的机构,包括但不限于实验室、兽医院、动物繁育中心等。
检测原理
标准推荐使用血清学方法和分子生物学方法(如聚合酶链反应,PCR)来检测犬细小病毒。血清学方法通过检测动物血清中对犬细小病毒的特异性抗体来判断病毒感染状态;而分子生物学方法则直接检测样本中的病毒核酸,具有更高的灵敏度和特异性。
样本要求
标准明确了适合用于检测的样本类型,通常包括新鲜或冷冻保存的粪便、组织样本、以及血液样本(主要用于血清学检测)。样本采集、处理及保存需严格遵循无菌操作,以防止污染和保持病毒活性。
检测步骤
- 样本预处理:根据样本类型,采取相应的方法进行前处理,如粪便样本需进行离心浓缩。
- 病毒抗原或核酸提取:从预处理后的样本中提取犬细小病毒的抗原或核酸。
- 检测实施:
- 血清学方法可能包括酶联免疫吸附试验(ELISA)等,通过特异性抗体与病毒抗原的结合来判定。
- 分子生物学方法,尤其是PCR技术,通过扩增病毒特异性核酸序列来检测病毒的存在。
- 结果判定:依据实验中阳性与阴性对照的结果,判断样本中是否含有犬细小病毒及其感染状况。
质量控制
标准强调了实验过程中必须实施严格的质量控制措施,包括使用标准品进行校准、设立阴性和阳性对照,以及定期进行方法验证和实验室间比对,以确保检测结果的可靠性和准确性。
报告要求
检测报告应详细记录样本信息、检测方法、所用试剂与仪器、实验过程、结果分析及结论等,以便于结果的审核和追踪。
结论
该标准为实验动物中犬细小病毒的检测提供了科学、统一的技术指导,有助于提升实验动物健康管理、疾病监控及研究数据的可靠性,对促进动物福利和保障科研质量具有重要意义。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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文档简介
ICS65.020.30B44中华人民共和国国家标准GB/Tr14926.57-2001实验动物犬细小病毒检测方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofcanineparvovirus(CpV)2001-08-29发布2002-05-01实施中华民民共.和.发布国家质量监督检验检疫总局
GB/T14926.57-2001前本标准规定丁犬细小病毒的检测方法。犬细小病毒性肠炎是犬的主要烈性传染病之一,在我国犬群中广泛流行,是普通级犬和SPF犬的必检项目。因此增加该病毒的检测方法。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:田克恭。
中华人民共和国国家标准实物GB/T14926.57-2001犬细小病毒检测方法Lahorntoryanimal-MethodforexaminationofCanineparvovirus(CPV)范围本标准规定了犬细小病毒(CPV)的检测方法、试剂等本标准适用于犬CPV的检测2引用标准下列标准所包含的条文·通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标淮出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.54-2001实验动物血凝抑制试验3原理根据免疫学原理,采用CPV抗原检测犬血清中CPV抗体:或根据CPV在一定的条件下,能凝集猪红细胞,这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理,检测犬血清中CPV抗体。主要试剂和器材4.1试剂4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原CPV感染FK81细胞·接种3~5d后.当病变达十十十~十十十十时收获。冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成EIISA抗原。4.1.1.2正常抗原FK81细胞冻融破碎后,经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液4.1.2血凝素CPV接种FK81细胞,培养3~5d,当病变达十十十~十十十十时收获。冻融三次或超声波处理后·低速离心去除细胞碎片,上清液分装后低温保存。4.1.3阳性血清CPV实验感染或自然感染的犬血清。4.1.4阴性血清无CPV感染、未经
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