标准解读

《GB/T 14926.55-2001 实验动物 免疫酶组织化学法》作为一项国家标准，为实验动物研究中的免疫酶组织化学技术提供了详细的操作规范和要求。与未明确提及的前一版标准或同类方法相比，该标准引入了多项改进和更新，以提升实验的准确性和可重复性。以下几点概括了其主要变更内容：

  1. 技术细节优化：标准细化了实验准备步骤，包括样本固定、脱水、包埋及切片等预处理过程的具体操作指南，旨在减少因技术差异导致的实验变异性。

  2. 试剂与抗体选择指导：新增了关于抗体特异性和工作浓度选择的推荐指导，以及酶标二抗的选择原则，帮助研究人员更科学地选择实验材料，提高检测灵敏度和特异性。

  3. 染色与显色条件：对染色步骤进行了详细规定，包括底物显色时间、温度控制等，确保染色结果的一致性和稳定性。同时，引入了优化的对照组设置要求，以便于结果的准确判读。

  4. 结果评价与记录：标准明确了结果观察与评价的标准，包括如何通过显微镜下观察判断阳性信号的强度和分布，以及如何进行客观量化分析。同时，强调了实验记录的完整性，要求详细记录实验条件和步骤，便于复核和追踪。

  5. 质量控制与实验室管理：增加了质量控制方面的内容，如定期校准仪器、使用标准化阳性及阴性对照等，确保实验结果的可靠性和实验室间的可比性。此外，对实验室环境、人员培训等方面也提出了具体要求。

  6. 安全与伦理考量：虽然未直接提及与前标准的对比，但该标准强调了实验操作过程中的生物安全和个人防护措施，以及遵循实验动物伦理原则的重要性，体现了对科研活动人文关怀的提升。

这些变更综合反映了实验动物免疫酶组织化学领域方法学的最新进展，旨在促进实验结果的准确性和实验过程的规范化。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2001-08-29 颁布
  • 2002-05-01 实施
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ICS65.020.30B44中华人民共和国国家标准GB/T14926.55-2001实验动物免疫酶组织化学法Laboratory2001-08-29发布2002-05-01实施中华民：共和玉发布国家质量监督检验检疫总局

GB/T14926.55-2001前本标准规定了免疫酶组织化学法所用试剂、器材和操作步驿等.本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口，本标准起草单位：中国实验动物学会。本标准主要起草人：贺争鸣。

中华人民共和国国家标准实验动物免疫酶组织化学法GB/T14926.55—2001Laboratoryanimal-lmmunohistochemistry(IH)范围本标准规定了免疫酶组织化学法(IH)所用试剂、器材和操作步骠等。本标准适用于实验动物病毒抗原的检测，2原理用已知的特异性抗体与标本中待测抗原反应,如待测抗原是特异性抗体的相应抗原则形成抗原抗体复合物。此抗原抗体复合物仍保持其抗原活性，可与相应的第二抗体酶结合物结合,遇酶底物产生颜色反应。在普通显微镜下，根据颜色的反应判定结果。主要试剂与器材3.1试剂3.1.1抗病毒单克隆抗体或抗血清3.1.2羊或兔抗小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、兔、犬、猴1gG抗体标记辣根过氧化物酶3.1.3PBS(0.01mol/L.pH7.6)氯化钠8.5g磷酸二氢钠(NaH.PO，·2H.O)0.20g磷酸二氢钠(NaH.PO,·12H.O)3.12g蒸馅水加至1000mL3.1.4底物溶液33,3-二胺基联苯胺盐酸盐(DAB)40mgPBS100mL丙酮5mL3%过氧化氢0.1mL3.2器材3.2.1石蜡切片机或冰冻切片机3.2.2载玻片及盖玻片。3.2.3普通显微镜4操作步骥4.1冰冻切片风干后用丙酮固定10～15min,石蜡切片，常规脱蜡至PBS(切片应用白胶或铬矾明胶做粘合剂，以防脱片)。4.2去内源酶用0.3%过氧化氢甲醇溶液或1%盐酸酒精37C作用30min.

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