DB5404T 0004-2023 林芝灵芝标准综合体 第2部分：菌种生产技术规程

ICS65.020.20B 05

5404林 芝 市 地 方 标 准DB5404/T0004—2023林芝灵芝标准综合体22022-12-03发布 2023-01-03实施林芝市市场监督管理局  发布DB5404/T0004DB5404/T0004—2023目 次前言 II范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1菌种来源 1场地、设施要求 1原材料要求 1原料 1容器 2培养原料 2培养基参考配方 2一级种 2二级种和三级种 2菌种制做 2拌料 2装袋 3灭菌 3冷却、消毒、接种 3发菌 3后熟培养 3菌丝生长速度 4菌种成熟标准 4入库 4I前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是《林芝灵芝标准综合体》的第2部分，《林芝灵芝标准综合体》已经发布了以下部分：——第1部分：菌种基本要求；——第2部分：菌种生产技术规程；——第3部分：菌袋制作规程；——第4部分：栽培技术规程；——第5部分：采收存储技术规范；——第6部分：分级规范。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由林芝禹翔企业服务中心提出。本文件由林芝市市场监督管理局归口。本文件主要起草人：何天文、洛桑卓玛、罗笑娟、龙莎莎、辛双阳、次仁卓嘎、邵强、次仁罗布、段金华、赵明。II林芝灵芝标准综合体第2部分：菌种生产技术规程范围本文件适用于林芝市灵芝菌种的培育。规范性引用文件（包括所有的修改单适用于本文件。GB/T191 包装储运图示标志GB/T4456 包装用聚乙烯吹塑薄膜GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB/T12728 食用菌术语GB5749生活饮用水卫生标准NY/T528 食用菌菌种生产技术规程NY/T1742 食用菌菌种通用技术要求NY5099 无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求术语和定义GB/T12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。菌种来源密县、察隅县、朗县、墨脱县共7个县（区）现辖行政区域为中心，采集的野生白肉灵芝驯化培育的菌种。场地、设施要求应符合NY/T528的要求。原材料要求原料GB/T4456NY50991GB5749一级种需经出菇试验确认农艺性状和商品性状等种性合格。容器18mm×180mm20mm×200mm750mL121126cm（13cm～17cm～33121℃-126℃高温高压的聚丙烯塑料袋，各类容器都应使用能满足滤菌和透气要求的无纺布塑料盖。培养原料化学试剂类要使用化学纯或以上级别的试剂。生物制剂和天然材料类材料要新鲜，无虫、无螨、无霉、洁净、干燥。培养基参考配方一级种以1000mL计：木屑PDA培养基 马铃薯（去皮、切块或片）200g，杂木屑20g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH自然。PDA培养基 马铃薯（去皮、切块或片）200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH自然。综合PDA（CPDA）培养基 马铃薯（去皮、切块或片）200g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，二钾3硫镁1.5g琼脂20维素B10m水1000mLpH然。二级种和三级种以100g干料计：玉米（小麦、高粱）98g1g1g。高粱（或玉米、小麦）12h-24h自然。77g17g3g2g1g，加水至培养料含水量60%，pH自然。77g17g3g2g1g，加水至培养料含水60pH菌种制做工艺流程备料→拌料→装袋→灭菌→冷却→接种→培养。拌料将培养基按本规范第7章的配方比例称取，拌匀，并掌握好PH值。代料以用手紧握培养料成团，松开后龟裂，手掌有微量水迹为准（含水量60%～65%）。2装袋用长33cm、宽17cm、厚0.05mm塑料菌袋。采用机械或手工装袋。压实填至袋口约4/5处，用菌种套环封袋口。灭菌常压灭菌灭菌锅加温达到100（海拔3000m左右的地方，压力达到0.04MPa时）保持12h～16h，停火2h后将料袋出锅。高压灭菌排气2次,待冷气排净,压力达到0.105MPa～0.15MPa，温度121～12615min～30min或20min，自然冷却至压力表到“0”时打开放气阀，打开炉门，待冷却至可以搬动时，将培养基袋取出。冷却、消毒、接种冷却料袋放置在接种室内，自然冷却至常温。接种场所准备好后，选用2～3菌种符合NY/T528的要求,种菌龄30d～35d。17cm×33cm规格的菌种，每袋接20个～30个料袋。发菌菌袋摆放3环境控制发菌温度控制在20～2550～60发菌管理发菌15d后熟培养菌丝长满菌袋后，要后熟10d～30d。温度（18±2）℃，空气相对湿度40%～60%。3菌丝生长速度一级种在PDA（马铃薯葡萄糖琼脂）培养基上，在避光、适温（25±1）℃条件下，菌丝长速为（8.2±1.1）mm/d，菌丝长满斜面的时间为8d～10d。二级种在适宜培养基上、适宜培养容器里（以使用15cm×28cm聚丙烯塑料菌种袋、装量300g干料每袋为例（25±1（8.0±0.8）mm/d，菌丝长满容器的时间为23d～30d。三级种在适宜培养基上、适宜培养容器里（以使用17cm×33