胎膜早破检测试剂盒培训资料

深蓝®IGFBP-1Test胎膜早破检测试剂盒

Diagnosisof

PermatureRuptureOfMembranes(PROM)胰岛素样生长因子结合蛋白-1检测试剂盒（胶体金法）内容★PROM定义、发生率、常规处理方法★PROM产生原因及危害性★目前PROM常用的诊断方法★

PROM检测新方法★深蓝IGFBP-1免疫层析试纸胎膜早破（PROM）凡孕龄＜37孕周的胎膜破裂称为胎膜早破，又称为早产(未足月)胎膜早破。胎膜早破是早产和需要进入加急病房的新生儿并发症（感染、败血症、小肠结肠炎）的最常见原因之一。不能正确地诊断胎膜早破会导致不能实施恰当的产科治疗措施胎膜早破发生率孕妇中有10％被诊断出患有胎膜早破问题。超过50％的怀孕妇女在各种医疗场所接受胎膜早破测验。胎膜早破导致了25％－35％的早产发生。胎膜早破（PROM）常规处理方法在治疗胎膜早破时，医生们会权衡延长孕期和产生严重母婴综合症的风险。处理胎膜早破的方法包括：▲卧床和骨盆支持——促进羊水的重新聚集并且避免感染▲引产——减少感染的可能▲宫缩抑制剂——在胎膜早破出现后采用预防性子宫硫酸镁来延长潜伏期.▲皮质类固醇——减轻呼吸窘迫症状▲抗生素——延长孕期，减少绒毛膜羊膜炎，新生儿脓血症，产后子宫内膜炎，心室出血备注：根据不同孕龄，由临床医生根据孕妇综合情况确定是保胎治疗、避免感染还是中止妊娠行剖腹手术等胎膜早破产生原因胎膜早破的发生与多种因素有关，常见的原因有：1、羊膜炎症：生殖道病原微生物上行感染，导致胎膜炎症，使胎膜局部张力下降导致破裂；2、羊膜腔压力升高：常见于羊水过多或多胎妊娠；3、胎膜受压不均：胎位异常、骨盆异常或胎儿巨大导致头盆不对称时，胎儿先露部（最先进入骨盆入口的胎儿部位）不能很好的入盆，导致胎膜受压不均发生破裂；或由于先天性或创伤导致宫颈内口松弛，胎儿先露部的羊膜囊突入松弛的宫颈内口，至胎膜受压不均及发育不良而破裂胎膜早破产生原因

4、胎膜发育不良：缺乏某些营养因素，如维生素C、锌或铜等，可致使胎膜发育不良，张力下降而破裂；另外，某些细胞因子可破坏羊膜囊而致胎膜早破。

5、子宫颈功能不全：在非妊娠的状态下，子宫颈内口可以无阻力地扩大到8.0号即可以诊断子宫颈功能不全,子宫颈功能不全主要表现在内口松弛和峡部缺欠。

6、创伤和机械性刺激：主要分为医源性和非医源性两类，非医源性常见的为妊娠晚期的性交活动；医源性的包括多次羊膜腔穿刺，多次阴道检查和剥膜引产等胎膜早破危害性1、胎膜早破与难产和感染常常互为因果，产道及胎儿异常（如骨盆形态异常、胎儿巨大或发育畸形等难产因素）既是胎膜早破的常见诱因，胎膜早破又可导致宫内感染及羊水减少，因此而发生宫缩乏力、胎儿宫内窘迫，致使难产和剖腹产机率增加。2、胎膜早破常常会给准妈妈和胎儿造成严重的后果。在胎膜突然破裂的瞬间，随着大量羊水流出，可发生脐带脱垂。脱垂的脐带受胎先露压迫，宫壁紧裹胎体，影响胎盘血液循环，可能引起胎儿宫内缺氧，这时医生就不得不做剖腹产手术。

胎膜早破危害性3、胎膜早破还可引起胎盘早剥（胎盘在胎儿娩出前剥离），可导致胎儿死亡及准妈妈大出血、凝血功能障碍，甚至死亡，危害宝宝和妈妈的生命安全，增加剖腹产率。4、感染是胎膜早破给母体造成的严重后果，感染的程度常常与破膜时间有关。胎膜早破超过24小时，感染率增加5～10倍，准妈妈的感染首先表现为子宫内膜及子宫肌层的炎症，进一步可导致感染中毒性休克的发生。而胎儿的感染可发生新生儿窒息、肺炎、败血症甚至导致新生儿死亡胎膜早破（PROM）胎膜早破是发生于临产前的胎膜破裂，发病率最高可达17%;产科常见并发症之一，常导致母婴患病和死亡：早产（最常见）难产胎儿窘迫症母婴感染产后子宫内膜炎胎儿死亡*AmFamPhysician2006;73:659-64,665-6破膜48小时孕妇分娩后，感染率为5%～20%，败血症率为1：145，死亡率为1：5500。*妇产科学。人民卫生出版社。破膜超过48小时新生儿感染率高达100%。*《中国优生与遗传杂志》2011年第01期

目前PROM的诊断方法15Technique:

羊水是碱性的，可以将pH试纸变色。PerformanceMetrics:阳性结果错误率高达17.4%阴性结果错误率为12.9%灵敏度90.7%特异性77.2%Drawbacks:

精液、血液、尿液、BV等会造成干扰。

目前PROM诊断方法一——pH/硝嗪试纸Friedman,MLDiagnosisofrupturedmembranesAJOG1969104;544-55016Technique:

通过显微镜观察羊水干树枝状结晶PerformanceMetrics:阳性结果错误率5-30%阴性结果错误率12.9%灵敏度51.4%(无分娩)特异性70.8%(无分娩)Drawbacks:显微镜，医师经验，灵敏度低。

目前PROM诊断方法二——羊齿状结晶

ReeceEA,Amnioticfluidarborization

Obstet

Gynecol64:248-250,198417Technique:

观察阴道后穹窿出现羊水池Accuracy:

主观性强，与医师经验有关。Drawbacks:

窥镜检查；其它液体干扰。目前PROM诊断方法三——羊水池18Technique:

超声检查可以检测到羊水过少，提示存在胎膜破裂的可能。Accuracy:

单独使用超声检查，结果可信度不高。一般和其它指标合用来确诊。Drawbacks:费时；费钱

目前PROM诊断方法四—超声波检查19Technique:

将稀释的靛蓝胭脂红注射到羊膜腔中，通过阴道内卫生棉球是否被染色判断胎膜是否发生破裂。Accuracy:

诊断胎膜破裂的金标准。Drawbacks:

准确性高，但是具有高度侵袭性（需要羊膜穿刺术），价格昂贵。

目前PROM诊断方法五——羊膜腔灌注染料传统诊断方法检测的问题★

传统方法的要不侵袭性高，要不准确度不够，或者两者都有。★

约3%的无任何症状的PROM，传统方法无法检出（除羊膜腔灌注染料法，此法极少应用）★费时、费力21“…ferntestisneithersensitivenorspecificenoughfordiagnosticdeterminationofprematureruptureofmembranes.Werecommendagainstroutinelyprovidingferntestingaloneforthedetectionofrupturedmembranes.”（羊齿状结晶法的灵敏度和特异性均不足以诊断PROM，我们不推荐单独以此指标来检测胎膜破裂）“…pH/nitrazinetestissensitiveonlywhenusedinwomenforwhommembranestatusisknown.…thetestdoesnotappeartobesufficientlysensitiveorspecificenoughfordiagnosticdeterminationofprematureruptureofmembranes.”（pH/硝嗪法只有在妇女的胎膜状态已知时才是灵敏的，这种方法对于检测PROM没有足够的灵敏度和特异性。NACB.LaboratoryMedicinePracticeGuidelines2007.p142-143.

传统诊断方法检测的问题诊断现状方法原理性能缺点硝秦(pH)试纸羊水呈碱性，因此会使硝秦试纸变成蓝色敏感性高，特异性差1、容易污染；2、容易造成假阳性；3、准确度不高。羊齿状结晶阴道液图片，通过显微镜观察羊齿植物状结晶敏感性差，特异性高1、需要显微镜，需要专业培训；2、容易污染，导致假阳性或者假阴性；3、准确度不高。积液检查在阴道后穹隆观察羊水池依靠医生的主观判断1、主观；

2、尿液，精液等液体很容易被认为是羊水；3、准确度不高超声波利用超声波技术检测羊水的量只能用于确诊需要配有专业的仪器和专家。羊膜腔染料灌注将有色染料注入羊膜腔，在20到30分钟之内观测阴道内是否有有色液体流出检测胎膜破裂的“金标准”1、具有高度入侵性2、可能导致孕期出血，感染，治疗性胎膜破裂，和流产。诊断现状存在的问题准确度不高联合使用费时工作量大专业培训。。。临床需求准确、快速、安全、方便适用整个孕期25目标1:

寻找羊水中的抗原需遵循以下原则:在羊水中要有很高的浓度；在阴道分泌物中含量很低(当胎膜完整时）目标2:

可以开发具有与标志性抗原结合的抗体，且不和其它蛋白发生交叉反应或干扰；目标3:

开发准确、快速的免疫层析的方法检测PROM

——寻找新的PROM的标志性蛋白PROM检测新方法:从上世纪70年代开始，陆续从羊水中发现多种特异性蛋白。PlacentalAlphaMicroglobulin-1(胎盘α微球蛋白-1)PAMG-1PlacentalAlphaMicroglobulin-2(胎盘α微球蛋白-2)PAMG-2AlphaFetaProtein(甲胎蛋白）AFPProlactin(促乳素）PLInsulin-likeGrowthFactorbindingprotein-1胰岛素样生长因子结合蛋白－1(IGFBP-1)FetalFibronectin胎儿纤维连接蛋白(fFN)寻找新的PROM的标志性蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白—1★IGFBP-1负责胰岛素样生长因子的储存和转运，是由母儿肝脏细胞和妊娠蜕膜所产生；IGFBP-1是妊娠3个月后直到分娩前羊水中最主要的蛋白质之一。★在妊娠妇女血清及羊水中发现IGFBP-1，IGFBP-1在羊水中的体积分数比母亲血液中高100～1000倍，其他体液较少，宫颈黏液、精液和尿液对实验均无影响。★当发生胎膜破裂时，羊水中的IGFBP-1可通过胎膜破口漏出到宫颈阴道中，可作为胎膜早破的检测标志。★检测IGFBP-1诊断PROM与孕龄大小无关，对足月及未足月妊娠孕妇具有同样的诊断价值。ActaObstetGynecolScand1998;77:295-297J.Obstet.Gynecol.Res.1998:24:411-417★由于羊水/血清浓度的差异大，IGFBP-1可用来预测胎膜早破和诊断无明显羊水流出的隐匿性胎膜早破，且测试时不受血液，精液的影响。★IGFBP-1检测PROM的灵敏度100%，特异性92%（84%阳性预测率和100%阴性预测率）

EuropeanJ.Obstetrics&GynecologyandReproductiveBiology2005(12):159-163..\欧州妇产杂志IGFBP.pdf胰岛素样生长因子结合蛋白—129

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胎儿纤维连接蛋白是子宫绒毛膜细胞外的基质成分，存在于绒毛膜和蜕膜之间，主要由滋养层细胞产生。

▲

由于孕21周以后，绒毛膜与蜕膜的融合阻止了fFN的释放，而使正常的孕妇在22-35孕周时，fFN的含量极低。

▲只有在绒毛膜与蜕膜分离、绒毛膜与蜕膜界面的细胞外基质遭到机械损伤或蛋白水解酶的降解时，fFN才可见于宫颈阴道分泌物中。

竞品—胎儿纤维连接蛋白(fFN)在正常妊娠的22-3▲

胎儿纤维连接蛋白是子宫绒毛膜细胞外的基质成分，存在于绒毛膜和蜕膜之间，主要由滋养层细胞产生。

▲

由于孕21周以后，绒毛膜与蜕膜的融合阻止了fFN的释放，而使正常的孕妇在22-35孕周时，fFN的含量极低。

▲只有在绒毛膜与蜕膜分离、绒毛膜与蜕膜界面的细胞外基质遭到机械损伤或蛋白水解酶的降解时，fFN才可见于宫颈阴道分泌物中。

5周之间，宫颈阴道分泌物中的fFN的含量<50ng/ml。在此期间，如fFN含量≥50ng/ml，则表明有可能发生早产。

fFNishighinmaternalbloodandseminalfluid.ChorionicreleaseoffFNcanbemistakenforPROMeventhoughthemembranesareintact.(fFN在母亲的血液中和精液中含量高，所以当这些存在是，即使胎膜完好，也可能被误诊为PROM）

Erdemogluetal.ActaObstetriciaetGynecologicaScandinavica.2004,Page:622-626ThesensitivityandspecificityoffFnforthedetectionofPROMare90.5%and61.0%respectively.(fFn检测PROM的灵敏度为90.5%，特异性只有61.0%）

Omuetal.MedicalPrincipleandPractice.1997,Page:1-831深蓝®IGFBP-1Test☆

是一步免疫层析分析技术，结果准确、快速、简单，特别适合于孕检、床边检查与家庭自查。☆精密筛选配对单克隆抗体，针对羊水中的标志蛋白——IGFBP-1，结果非常稳定与可靠。☆深蓝®IGFBP-1Test

检测范围很宽，

IGFBP-1浓度(20ng/ml至350µg/ml)均能检出。快捷最短10秒最长不超过6分钟适应我国就诊人数多的现状提高医疗效率孕妇更早得到最佳处理降低并发症的发病风险“一过即出线”安全不良事件为“0”避免操作者与检测样本和检测试剂的直接接触减轻对环境的潜在污染简单、方便配备齐全即开即用无需特殊培训，节约社会资源避免错误操作和结果错判适用范围——胎膜早破的首选辅助诊断工具：1、疑似病例的诊断；2、疑难病例的诊断；3、需要提供更多客观诊断依据的诊断；4、高危孕妇的日常监测；5、羊水量少需要确定是否胎膜早破的诊断；6、需要排除胎膜早破可能性的其他病例的诊断；。。。※特别是当前就诊人数多、诊断压力大、医患矛盾突出的医疗环境下，要求医务工作者提供客观证据，也要求医生具有自我保护的能力！☆该产品主要原材料全部采用进口优质产品。其中，配对的单克隆抗体、硝酸纤维素膜均优选国际顶尖企业产品，通过实验比较，该产品相比国内外其它同类产品，检测结果具有更高的灵敏度与特异性。☆孕37周前针对胎膜早破特别是隐匿性胎膜早破；孕37周后针对胎膜破裂，可预测分娩时间：据文献报道试验阳性后24h~48h内正常分娩；而试验阴性者24h~48h内均未有临床症状。深蓝®IGFBP-1Test☆试纸条：含PVC胶版、吸水纸、硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜、聚酯纤维膜、羊抗鼠多克隆抗体、胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体A和胰岛素样生长因子结合蛋白-1单克隆抗体B。☆棉拭子☆样本管：内含10mM，pH=7.4的PBS缓冲液1.0mL。IGFBP-1检测试剂盒组成深蓝®IGFBP-1Test检测步骤第一步:

将棉拭子置于阴道中（5－7厘米深）取样。第二步:

将棉拭子置于缓冲液中旋转稀释1min。第三步:

取出棉拭子，将试纸条置于含有样本的缓冲液中。第四步:5-10min后取出试纸条，读结果，15min后结果无效。

→→深蓝®IGFBP-1Test结果判断1.阳性：在检测区（T）及控制区（C）各出现一条带，检测结果为阳性。2.阴性：仅在控制区（C）出现一条色带，检测结果为阴性。3.无效：控制区（C）无色带出现，表明试验无效，应重新进行检测。阳性阴性无效CT☆特异性强：针对性检测羊水中的IGFBP-1；☆灵敏度高：1μL羊水量即可检出，可检测出隐匿性的胎膜早破；☆快速准确：5~10分钟即可读结果；☆操作方便：不需要扩阴镜或其他设备；☆抗干扰性强：不受血液、精液、尿液和宫颈黏液的影响。☆人为因素影响少，无需专业知识。深蓝®IGFBP-1Test特点以下症状推荐使用本产品1.感染：孕期出现过妇科感染，如阴道炎、宫颈炎容易引起胎膜感染，导致胎膜破裂。因此，妊娠晚期应禁止性生活，预防生殖道感染，以确保母子安全。对出现过感染的孕妇，至少在孕中后期进行多次检查。2.有习惯性流产或早产病史；孕期应进行检查，并应让孕妇家庭备用，检查阳性应立即来医院进一步检查3.妊娠周期异常情况如阴道分泌物突然增多，必须及时检查，检查频率最少两次，至少有一次应在分泌物明显增多的情况下测试；以下症状推荐使用本产品4.妊高征、胎位异常、双胎妊娠、羊水过多孕妇：由于羊膜腔内压力过高，容易发生胎膜早破。臀位、横位及头盆不称的孕妇，可因羊膜腔内压力不均而发生胎膜早破，如果医院诊断为以上症状，建议医生至少开三次检查量让孕妇在家庭自查，只要发现一次有阳性，必须立即到医院进行进一步的诊断。5.创伤和机械性刺激之后，立即进行检查，第二天或者第三天再进行一次检查；创伤和机械性刺激主要分为医源性和非医源性2类。非医源性常见的为妊娠晚期的性交活动；医源性的包括多次羊膜腔穿刺，多次阴道检查和剥膜引产等以下症状推荐使用本产品6.先天性羊膜发育异常及遗传性羊膜过薄，由于胎膜的强度主要依靠