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第一节DNA第十一章第一节DNA第十一章DNA一、DNA 生物生物化二、生物化的起点与方真核线真核线 双链:噬菌体 后三、’→三、’→ 四、四、与生物化有关的酶和蛋(一)DNA聚合合成方向:53生物化生物生物化1.大肠杆菌DNADNADNApolymeraseI生物化1)DNApol生物化单链环状DNA生物化单链环状DNA 3'5' 5′→3′3′→5′5′→3′DNADNADNApolDNApolDNApol分子不同种类亚基数1≥≥每个细胞的分子生物学活15'→3'聚合酶活+++3'→5'外切酶活+++5'→3'外切酶活+——聚合速度(核苷酸/分持续合成功生物化3)DNApolⅢ—酶为DNApolI的15倍,除聚合酶活性外,还有多亚基酶含十种亚基(αβγθτδδ’χΨε): 生物生物化DNA数亚基功α2*聚合作εθ22酶(2)35’外切酶的校对功组建τ2使酶二聚γ2依赖DNA的ATP酶,形成γ复合δ1与β亚基结合,形成γ复合1合物形成γ1装配器β形成γ复合两个β亚基形成滑动,以提高酶14能力强生物化酶DNA聚合酶Ⅲ酶二聚延长因DNA聚合酶两亚 生物生物化2.真核生物DNA有DNApolα、β、γ、δ、αβγδε定细胞细胞线粒细胞细胞分子量36-160-聚合方向+++++外切酶活性––+++抑制剂DideoxyN-功合修线粒DNA合核合修生物化DNA高等生物和噬菌体生生物化5'模板接PPPP PPP3'口5'模板PPPPPPP生物化 连环数W比连环差连环数W比连环差生物生物化 E.coli的DNAgyrase(DNA旋转酶,连续引入负超螺真核细胞的TopⅡα,Top生物生物化生物化酶Single-strandSingle-strandbinding端粒酶(omerase):端粒酶是一种含RNACCC生物生物化5´TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTGGGGTTTT3´交5´TTTTGGGGTTTTGGGGnTTTTGGGGTC3´5´移位AAGGGGTTTTGGTTTTG5´TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTGGGGT3´AAAACCCCAAAACCCCnAAAACCCCTCC生物生物化引物合成酶体滞后前导生物化化五、化五、大肠杆 起点ori能量在DnaC的帮助下沿5’→3’ 生物生物化大肠杆菌起点与起始有关的酶与辅助因蛋白功DnaADnaBDna类组蛋白帮助DnaB结合于起DNA结合蛋白,促进起引物合成酶Dna合成RNA单链DNA结合蛋白结合单链RNA聚合促进DnaA活DNA旋转酶释放DNA解链过程产生的张Dam甲基化使起点GATC序列的腺嘌呤甲基生物化化生物生物化生物化叉叉叉叉完终 叉终 叉Ter:终止陷阱,引 终止的特定区域20bp的序列,终止利用物质Tus可识别并结Top六、真核细胞DNA 1 六、真核细胞DNA 1 , 生物生物化4真核生物的DNA通常与组蛋白构成核小体,生物化生物生物化 生物化7.真核生物DNA DNAαpolDNAγDNAδDNAε定细胞细胞线粒细胞细胞外切酶––3’→5’外3’→5’外5’→3’外+––––中低高高抑制蚜肠霉蚜肠霉蚜肠霉功引物合修核DNA修细菌和真核生 体的组组细酶DNA聚合酶细菌和真核生 体的组组细酶DNA聚合酶PCNAγRF-DnaDNA聚合酶RNaseH和DNARNaseH1和MF-DNApolⅠ和DNADNApolε和DNADnaB(定位需DnaTRP- 生物生物化PCR(polymerasechainreaction)PCR技术是 (K.Mullis)在198
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