光学显微镜的使用及动物基本组织切片观察

基础生物学技术试验光学显微镜的使用及动物基本组织切片观察实验目的1、光学显微镜的使用2、基本组织切片的观察与记录3、实验报告的书写与要求4、生物量级、生物系统的层次以及生物类别5、各个胚层细胞发育方向二、实验原理1、生物量级：残基（氨基酸，核苷酸，脂肪酸，甘油）→生物大分子→亚细胞结构（subcellularstructure）→细胞器→细胞→组织（器官）→系统→种群→群落→生态系统→生物圈物理量级：基本粒子（夸克，轻子）→电子（自旋反平行）→质子→原子→分子（物体：生物量级）→天体→星系→星云→宇宙→宇宙膜2、生物系统：系统发育无生命的有机行星（残基→RNA,PR,DNA）→生命产生→多类型细胞→真细菌（包括支原体衣原体）→古细菌（甲烷菌，盐细菌，硫化细菌等）→真核生物生物界类群：原核生物界：真细菌，古细菌原生生物界：原生动物，藻类，黏菌（无细胞膜，无菌丝，多细胞）真菌界：接合菌（菌丝体无隔），子囊菌（除酵母菌单细胞），担子菌（初、次生菌丝，形成担子，担孢子），半知菌（只有无性或有性阶段未发现）植物界：苔藓类植物，维管植物（无种子：石松、木贼、真蕨类），有种子（裸子、被子（单子叶，双子叶））动物界：侧生动物（海绵），辐射对称动物（刺胞动物门，水母水螅，栉水母动物门，海胡桃），两侧无体腔动物（涡虫），假体腔动物（线虫），真体腔动物（原口动物：环节、软体、节肢；后口动物：棘皮、半索、脊索），3、各胚层细胞发育走向：外胚层：神经系统（脑、脊髓、脊神经、自主神经、视网膜、内耳、肾上腺髓质），表皮（毛发、汗腺、油脂腺、乳腺、晶体、口腔黏膜）中胚层：肌肉、骨骼、血液、真皮、心脏血管系统、泌尿生殖系统以及结缔组织（固有结缔组织、骨与软骨、血液）内胚层：消化系统、呼吸系统的上皮和有关腺体（胰，肝）、膀胱上皮口诀：外表感神经，内组消胰肝4、分辨力：能分辨最小间隔的能力，单位距离（人眼距目标物25cm处）R=Kλnsin(a2)K是透镜品质，光镜在0.61~1.0之间，λ光波波长或电子波长，n是光镜介质折射率，5、镜种：暗视场（背景黑色，接受标本反射光线，利于分辨颗粒物，观察活细胞），相差显微镜（镀铝膜，将光推迟1/4+1/4相位，背景亮，标本黑），干涉显微镜，荧光显微镜。6、光学显微镜使用：提拿时注意手握镜臂，下方托住底座；粗调时抬起后放下，调节，禁止抬升载物台防止物镜压坏玻片；双目镜注意视野重叠；油镜多使用香柏油，以二甲苯清除香柏油。动物与器材实验材料：组织标本实验设备：光学显微镜方法与步骤1、实验分组2、实验原理讲解3、显微操作、观察安放显微镜检查显微镜是否有故障插入电源对光，调节亮度放入组织切片，调焦低倍镜观察换高倍镜，调焦，观察实验结果纤毛细胞核杯状细胞纤毛细胞核杯状细胞假复层纤毛柱状上皮细胞软骨假复层纤毛柱状上皮细胞软骨实验结论假复层纤毛柱状上皮(pseudostratifiedciliatedcolumnarepithelium)由纤毛细胞、杯状细胞、基细胞、刷细胞和弥散的神经内分泌细胞组成。细胞高矮不等，细胞核的位置参差不齐，好似有多层，但每个细胞的基底部都附于基膜上，所以称假复层。纤毛细胞呈柱状（柱状细胞），游离面有纤毛，每个细胞约有三百根，核卵圆形，位于细胞中部，纤毛向咽侧快速摆动，将粘液以及附于其上的尘粒细菌等推向咽部被咳出，故纤毛细胞对净化吸入空气有极大作用。杯状细胞结构与肠道上皮的杯状细胞类似，顶部细胞质内含有大量粘原颗粒，细胞分泌的黏蛋白为大分子蛋白，与管壁内腺体的分泌物在上皮表面构成一道粘液性屏障，粘附吸入空气中的异物，溶解吸入的SO2、CO等有害气体，随粘液咳出。基细胞呈锥形，于上皮深部，为未分化的细胞，有增殖分化能力，可分化成前述两种细胞。问题解答1、慢性气管炎会影响男性精子活性？慢性气管炎是假复层细胞纤毛摆动无力，可能有关基因出现问题，同时造成精子游动缓慢，导致男性不育。2、光学显微镜组成？机械系统，光学系统，光源系统3、为什么被称作假复层细胞？细胞高矮不等，细胞核的位置参差不齐，好似有多层，但每个细胞的基底部都附于基膜上，所以称假复层。4、干涉显微镜和荧光显微镜的工作原理？荧光显微镜可观察细胞中的荧光。当用激发光照射时，细胞发射荧光。这种荧光被称为原发荧光，由细胞中固有的荧光物质[比如还原辅酶I(NADH)]发出的。另一种是用荧光染料对细胞中的成分进行特异染色，再经激发光照射。照射后经化学反应使组织中的非荧光物质转变为荧光物质所发的荧光成为诱发荧光。其他的还有免疫荧光等。微分干涉显微镜术是用平面偏振光经棱镜折射后分成两束，于不同时间经过样品的相邻部位，此后又经另一棱镜将此两束光汇合，使样品厚度的微小区别形成明暗差异，增强样品反差并具立体感。参考文献普通生物学第三版