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会计学1DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶DNA聚合酶催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键不需要模板需要DNA的一条链为模板游离的DNA片段单个的脱氧核苷酸形成完整的DNA分子形成DNA的一条链基因工程DNA复制相同点不同点模板作用对象作用结果用途第1页/共6页PCR技术与DNA复制的比较DNA复制PCR技术解旋酶催化DNA在高温作用下变性解旋细胞内（主要在细胞核内）细胞外（主要在PCR扩增仪内）DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等耐热的DNA聚合酶（Taq酶）细胞内温和条件需控制温度，在较高温度下进行区别解旋方式场所酶温度条件合成的对象DNA分子DNA片段或基因联系①模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成②原料：均为四种脱氧核苷酸③酶：均需要DNA聚合酶进行催化④引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸第2页/共6页基因工程的概念基因工程的别名DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果人类需要的新的生物类型和生物产品第3页/共6页目的基因导入受体细胞微生物细胞

农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射法

常用方法生物种类体细胞或受精卵将含有目的基因的表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物以农杆菌转化法为例：将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达转化过程植物细胞动物细胞

Ca2+处理法受体细胞受精卵原核细胞Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子第4页/共6页目的基因的检测与鉴定方法检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了目的基因,采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA，采用分子杂交技术分子水平检测导入DNA

分子转录

翻译

除了分子检测外，还需要进行个体生物学水平的鉴定，如做抗虫

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