自动化方法验证概论

自动化方法验证

2004年7月林振贤博士,Ph.D.加拿大CVG协会

百万个机会数据自动化LIMS数据备份/存档数据采掘物理自动化样品制备/分析筛选合成实验室自动化总况实验室自动化的益处增加产出

改进员工和仪器的使用情况

更少制备工作,更多灵活机动

每时每刻都可以运转改进结果质量

更好的精度和准确度

降低误差

方法转换容易安全性

减少在有毒环境的中的暴露

降低所有溶剂的数量自动化系统含量测定片剂处理工作站-Caliper前置工作站-Caliper溶出AT70溶出系统-Sotax多剂量工作站-Caliper自动化工作站片剂处理工作站图示自动化工作站溶出工作站图示系统性能是自动化分析成功的关键从分析员到工作站建立该系统的可靠性和功效

提供该系统可以准确地、精确地和可靠地执行任务的书面说明系统合格化状况2个可能的状况：1.有手动方法且已经过验证2.没有手动方法典型的分析程序包括:样品制备测量数据处理把手动制备步骤转化成自动步骤

保持相同的浓度(相同的LC浓度)单个自动步骤代替多重稀释步骤顺序处理代替批量处理

恒器或者超声处理代替晃动自动化方法建立自动化方法建立方法建立包括：密度确定体积转移系统兼容性过滤研究温度研究残存度研究溶液稳定性萃取研究溶液密度度重量法溶溶剂配分分或稀释释如果要求求二次稀稀释，准准备好稀稀释液和和过滤液液体积转移移剂型占有有体积如果转移移的体积积很大，，手动和和自动的的结果将将会不一一样自动化方方法建立立使系统单单元的影影响最小小化可以从系系统单元元和过滤滤器中萃萃取的把溶剂通通过过滤滤器或液液体通道道与没有经经过过滤滤的溶剂剂比较系统单元元和过滤滤器活性性保留把被分析析物或样样品通过过过滤器器或液体体通道没有经过过过滤的的样品比比较处理过的的没有经经过过滤滤的样品品之间的的差别不不应该超超出公称称浓度的的1%。自动化方方法建立立过滤研究究过滤预湿湿体积分析与过过滤之间间的平衡衡最佳流速速高流速会会造成过过滤器堵堵塞（回回流压力力）低流速会会造成精精细颗粒粒穿过过滤器的的容积可以有效效过滤的的溶液体体积自动化方方法建立立温度研究究萃取过程程会造成成萃取溶溶剂温度度的显著著上升温度上升升会造成成因溶剂剂密度的的改变导导致稀释释误差要妥善选选择溶剂剂和过程程以使溶溶剂热效效应最小小能够在计计算中纠纠正上述述问题，，或需要要在方法法中附加加浸泡/澄清时间间来允许许溶液降降温到室室温自动方法法建立转接同样的液液体通道道每次都都要使用用每分析一一个样品品后(最浓的)就分析一一个空白白样品标准稳定定性蒸发和降降解样品稳定定性通常常不是一一个问题题在重新测测试稳定定性前，，在典型型的环境境条件下下，存放放这些溶溶液一段段可以达达到希望望的稳定定性的时时间。自动化方方法建立立优化从基基质中回回收药物物崩解单元元的速速度萃取步骤骤时段萃取步骤骤数目浸泡时间间和澄清清时间自动化方方法建立立验证的目目标和范范围自动系统统描述验证参数数实验程序序接受标准准论证极限限偏差与修修正验证方案案基本假设设通过IQ、OQ、PQ和规范的的性能核核实建立立起来的的系统基基本效能能验证参数数等价性(如果存在在有验证证过的手手动方法法）回收率(选项，如果存存在有验证过过的手动方法法）残存度(积累性残存度度)重复性程式化自动化放方法法建立等价性与验证过的手手动方法一致致比较手动与自自动结果分析上还是统统计上的差别别?设置合理的判判据等价性含量均匀性/多重剂型含量均匀性：：在全浓度（（100%公称浓度）范范围内10个确测点（理理想情况测3批总共30个样品）批量含量：在在全浓度（100%公称浓度）范范围内6个确测点（理理想情况测3批总共18个样品）通过手动方法法获得相同批批号样品的数数据手动和自动方方法平均差要要满足3%等价性降解与杂质比较数据；大大致情况应该该类似;所有超出定量量极限的杂质质或降解产物物应该存在，，并且满足以以下限度：<0.5%+0.1%0.5-1.0%+0.2%>1.0%+0.3%确定一个具有有代表性的剂剂型，理想情情况需要两批批不同样品，，还要与手动动方法对这相相同两批样品品进行比较等价性溶出每一个溶出需需要6个全浓度范围围的确测量来来确定(理想情况测3批总共18个样品)通过手动方法法获得相同批批号样品的数数据在样品从同一一次实验中获获得的情况下下,手动方法和自自动方法之间间的平均差异异在Q时间点要求3%,否则if则要求满足5%等价性溶出情况比较较回收率(准确率)含量基质的活性成成分回收率等价实验显示示回收率接近近公称浓度的的100%在公称浓度80%-120%之间优化操作作显示较好回回收率每个水平+2%溶出在公称浓度0%-120%之间优化操作作显示较好回回收率每个水平+3%含量均匀性样品基质的活活性成分回收收率是公称浓浓度的70–130%中的最小范围围(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应应该是目标浓浓度的2%批量测试样品基质的活活性成分回收收率是公称浓浓度的80–120%中的最小范围围(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应应该是目标浓浓度的2%回收率(准确率)降解与杂质比较数据；大大致情况应该该类似;所有超出定量量极限的杂质质或降解产物物应该存在，，并且满足在在前面列出的的限度.在安慰剂中掺掺入可以得到到的杂质/降解产物，涵涵盖公称浓度度的定量极限限至130%(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应应该是目标浓浓度的10%回收率(准确率)溶出样品基质的活活性成分回收收率是在Q时间点属性的的20%中的最小范围围(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应应该是目标浓浓度的3%准确率可以通通过满意的专专属性、线性性和精度来保保证回收率(准确率)残存度所有样品使用用相同的液体体通道显示系统有效效的清洗和最最小的交叉污污染程序操作典型的样样品，接着做做空白样品分析在空白中中残留的活性性成分在空白中活性性成分的浓度度小于前面分分析样品的1%或小于公称浓浓度的1%残存度片剂含量分析三个典型型样品，每一一个样品后分分析一个空白白计算观察到的的残存度水平平残存度溶出分离每个容器器的取样线一般来说，一一次活性测试试紧跟一次空空白测试所以容器都具具有共同的取取样线在三个溶出容容器中每一个个都放入一片片药片进行溶出操作作接着进行一次次容器中没有有药片的操作作对其它两个容容器重复上面面的步骤计算观察到的的残存度水平平精度精度精度说明产生生一致性数据据的能力可以比较两个个独立操作的的相对标准偏偏差百分比和和平均值典型的接受标标准含量测试:+2%（平均值）,+2%（相对标准偏偏差百分比的的差值）溶出操作:+3%fo（平均值）+3%（相对标准偏偏差百分比的的差值）含量均匀性100%公称浓度范围围需要10个确测点自动方法相对对标准偏差（（RSD）在手动方法法RSD2%范围，且不得得超过6%没有手动方法法存在，自动动方法的RSD要满足6%批量测试100%公称浓度范围围需要6个确测点自动方法的RSD在手动方法RSD的2%范围没有手动方法法存在，自动动方法的RSD要满足3%精度降解物和杂质质对于已知杂质质数量的单批批样品或掺杂杂样品的制剂剂需要6个确测点对于单个杂质质：RSD<15%对于杂质总量量：RSD<10%精度溶出100%公称浓度范围围需要6个确测点自动方法的RSD不超过手动方方法RSD的2%没有手动方法法存在，自动动方法的RSD要满足3%精度重现性实验室之内：：如果有一个个以上系统实验室之间：：一般作为方方法转让进行行稳定性:样品制备步骤骤的程式化在在大量的方法法建立中都有有描述分析测量的程程式化将类似似于一般的程程式化评价重现性和程式式化参考文献Chapter5:DevelopmentandValidationofAutomatedMethods,ChantalIncledonandHermanLam;AnalytcialMethodValidationandInstrumentPerformanceverification,ChungChowChan,Y.C.Lee,HermanLamandXueMingZhang,WileyInterScience,2004.DevelopmentandValidationofAutomatedMethodsforFinishedProductTesting,AWalshetal,PharmaceuticalTechnologyEurope,p44May,2000.DevelopmentandValidationofAnalyticalMet