实验三、血清中总胆固醇的测定教学提纲_第1页
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文档简介

血清(xuèqīng)中总胆固醇的测定实验(shíyàn)三（胆固醇氧化酶法）第一页，共9页。一、实验(shíyàn)目的学习胆固醇氧化酶法测定血清(xuèqīng)总胆固醇的原理。掌握血清(xuèqīng)总胆固醇的测定方法及操作技术。第二页，共9页。

（1）（3）H2O2+4-氨基(ānjī)安替吡啉（4-AAP）＋苯酚游离胆固醇＋FAA胆固醇酯酶H2O＋红色(hóngsè)醌类物质过氧化物(ɡuòyǎnɡhuàwù)酶（POD）510nm光吸收法测定相对血清总胆固醇浓度二、实验原理血清总胆固醇游离胆固醇胆固醇酯胆固醇氧化酶胆甾烯酮+H2O2（2）游离胆固醇第三页，共9页。三、实验(shíyàn)器材材料：人血清试剂：总胆固醇测定试剂盒用具(yòngjù)：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅第四页，共9页。（1）取3支试管，按下表加入(jiārù)试剂:试剂试剂空白管标准管样品管1样品管2样品管3工作试剂(mL)1.01.01.01.01.0标准液(uL)–10.0–––血清样品(uL)––10.010.010.0四、实验(shíyàn)步骤充分混匀，37℃水浴(shuǐyù)中保温15min；冷却至室温后，510nm处比色比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。第五页，共9页。（2）计算：依据(yījù)朗伯-比尔定律：A=KLC标准管胆固醇浓度：5.17mmol/L

样品管胆固醇浓度(mmol/L)＝样品管光密度值

标准管光密度值×5.17C样=A样A标×C标第六页，共9页。参考值胆固醇血清参考值：3.0~5.20mmol/L危险(wēixiǎn)阈值：5.20~6.20mmol/L高胆固醇血症：>6.20mmol/L

第七页，共9页。正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的2/3。测定胆固醇所用(suǒyònɡ)的试剂应防止被葡萄糖和甘油三酯污染。微量移液枪的正确使用注意事项第八页，共9页。思考题1、简述胆固醇氧化酶法测

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