苯乙胺类拟肾上腺素药物

苯乙胺类拟肾上腺素药物

目的与要求熟悉本类药物的结构和性质。熟悉苯乙胺类药物的鉴别、检查和含量测定方法。内容:结构与性质1鉴别与检查2特殊杂质与检查3含量测定4体内药物分析5第一节基本结构与化学性质

具有收缩血管、升高血压、舒张支气管等药理作用，临床用于升压、平喘、充血治疗等，应用广泛。具有碱性的脂肪乙胺侧链，易被氧化结构特点苯环上有活泼的酚羟基取代代表药物：拟肾上腺素类药物一、基本结构*

为拟肾上腺素类药物，具苯乙胺的基本结构，苯环上有酚羟基，有的有2个邻位的酚羟基，与儿茶酚类似，都属于儿茶酚胺类药物。肾上腺素邻二酚羟基易氧化脂烃胺手性碳*1）弱碱性：烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性。

游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水.*二、基本性质2）酚羟基特性：

邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在碱性溶液中更易变色。3）光学活性：手性碳原子，具有旋光性4）苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基:紫外、红外吸收特性盐酸去氧肾上腺素酚羟基：

三氯化铁反应溴代反应脂烃胺手性碳Cl－反应

常见的苯乙胺类药物盐酸克仑特罗硫酸沙丁胺醇主要反应类型(一）与三氯化铁反应(二）甲醛－硫酸反应(三）氧化反应(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱(五）与亚硝基铁氰化钠(六)双缩脲反应第二节鉴别试验三、鉴别试验1.三氯化铁反应:酚羟基

翠绿色[o]H+紫色紫红紫色红色被氧化成具有醌式结构的有色化合物肾上腺素：红色盐酸异丙肾上腺素：棕色至暗紫色重酒石酸去甲肾上腺素：淡红色盐酸去氧肾上腺素：玫瑰红→橙红→深棕红

2.与甲醛—硫酸反应

与三氯化铁反应、与甲醛－硫酸反应

药物

三氯化铁

甲醛－硫酸肾上腺素Adrenaline0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色

红色重酒石酸去甲肾上腺素Noradrenalinebitartrate翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色

淡红色盐酸去氧肾上腺素Phenylephrine

hydrochloride紫色玫瑰红，橙红，深棕红盐酸异丙肾上腺素Isoprenalinehydrochloride深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色

棕色，暗紫色盐酸多巴胺Dopaminehydrochloride墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫红色3、氧化反应

（还原性反应）碘、过氧化氢、铁氰化钾具有酚羟基例：盐酸异丙肾上腺素加硫代硫酸钠使过量碘的棕色消失溶液显淡红色

H+例:肾上腺素

例:重酒石酸去甲肾上腺素(与异丙肾上腺素和肾上腺素区别)肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素可被氧化产生明显的红棕色或紫色在pH为的条件下，是无法区分H2O2肾上腺素红显血红色H+棕色多聚体4、双缩脲反应——盐酸麻黄碱侧链具有氨基醇结构,可显双缩脲反应：5.与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应不能含甲醛6、UV和IR药物溶剂浓度(mg/ml)λnm(nm)吸收度(A)重酒石酸间羟胺水0.10272盐酸异丙肾上腺素水0.052800.50盐酸多巴胺0.5%硫酸0.03280盐酸芬氟拉明0.1mol/L盐酸0.25263,270盐酸苯乙双胍水0.012340.60盐酸克伦特罗0.1mol/L盐酸0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274盐酸伪麻黄碱水0.50251,257,263第三节特殊杂质检查（一）酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。降解产物肾上腺素红多聚体原理：利用酮体在310nm处有吸收，而药物本身在此波长处没有吸收，测定一定浓度下样品溶液在此波长处的吸收度值，来控制酮体的限量。

药物杂质

溶剂C(mg/ml)λ(nm)A肾上腺素

肾上腺酮HCl(9→2000)

2.0

310≤0.05盐酸去氧肾上腺素

酮体

水2.0310≤0.20重酒石酸去甲肾上腺素去甲肾上腺酮

水2.0310≤0.05盐酸异丙肾上腺素

酮体

水2.0310≤0.15盐酸甲氧明

酮胺

水

1.5

347≤0.06紫外分光光度法检查酮体的条件及要求

样品溶液，310nm处的吸收度不得大于，已知酮体的吸收系数E=453，限量是多少?根据：A=E×C×LC=A/（E*L）（C/100）*1000/2*100%=0.06%思考？？？（二）光学纯度的检查大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子结构中存在手性碳原子，具有光学活性特征。中国药典（2010版）采用测定比旋度值进行光学纯度检查，以控制药品的质量。最佳方法：手性拆分分析：液相色谱法和电泳法（三）有关物质1、肾上腺素中有关物质——HPLC（不加校正因子的主成分自身对照法），样品液中杂质峰面积之和不得大于对照液主峰面积的倍(0.5%),单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.2%)2、盐酸去氧肾上腺素有关物质——TLC:自身对照法3、盐酸苯乙双胍——PC:纸色谱法供试样品制备：本品→甲醇溶解→20mg/ml对照样品制备：取供试品溶液→对照溶液色谱条件：硅胶G薄层板;

展开剂:异丙醇-三氯甲烷-浓氨溶液(80:5:15);

显色剂:重氮苯磺酸试液分析：供试液如显杂质斑点，与对照溶液主斑点比较，颜色不得更深。1、盐酸去氧肾上腺素有关物质的检查方法

2、盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查

检查方法：纸色谱法（PC）分离后，洗脱，照分光光度法于232nm波长处测定吸收度，控制吸收度以控制有关双胍的量。

第四节含量测定原料：非水溶液滴定法、溴量法,亚硝酸钠法制剂：比色法、紫外分光光度法、高效液相色谱法原料药,脂烃胺基侧链，显弱碱性

测定条件:用冰醋酸做溶剂，加入醋酸汞试液消除氢卤酸的干扰，并以结晶紫指示液指示终点，的高氯酸作滴定液。同时作空白试验。(一)非水溶液滴定法酸碱滴定是在水溶液中进行的溶剂--水局限性：(1)许多弱酸或弱碱,Ka或Kb小于10-8，不能直接滴定(2)有些有机酸或有机碱在水中溶解度小，使滴定不能直接准确进行

1、酸碱滴定的局限

(3)-些多元酸或碱，混合酸或碱由于Ka(Kb)值较接近，不能分步或分别滴定。

（1）溶剂分类1）质子溶剂能给出质子或接受质子的溶剂，称为质子溶剂。

酸性溶剂按接受质子的能力大小，可分为碱性溶剂两性溶剂

2、非水溶剂①酸性溶剂给出质子的能力较强的溶剂，称为酸性溶剂。如甲酸、冰醋酸、丙酸等是常用的酸性溶剂。适于作滴定弱碱性物质的介质。②碱性溶剂能接受质子的溶剂称为碱性溶剂。如乙二胺、乙醇胺、丁胺等为常用的碱性溶剂。碱性溶剂适于作滴定弱酸性物质的介质。既易接受质子又易给出质子的溶剂称为两性溶剂。★特点：溶质是较强的酸时，溶剂显碱性溶质是较强的碱时，溶剂显酸性★种类：醇类;如甲醇、乙醇、异丙醇、乙二醇等★两性溶剂(或与极性小的溶剂混合)适于作滴定不太弱的酸、碱的介质③两性溶剂2）无质子溶剂

分子中无转移性质子的溶剂称为无质子溶剂①偶极亲质子溶剂★溶剂分子中无转移性质子，与水比较几乎无酸性亦无两性，但却有较弱的接受质子的倾向和程度不同的成氢键的能力。★种类：酰胺类、酮类、乙腈、二甲基亚砜、吡啶等皆是。其中二甲基甲酰胺、吡啶和二甲基亚砜的碱性较明显，成氢键的能力较丙酮、乙腈强。★适于作弱酸或酸强度不同的混合物的滴定介质★二甲基酰胺和吡啶也常被认为是碱性溶剂。②惰性溶剂★溶剂分子本身几乎无酸碱性，不参与溶质酸碱反应，也无成氢键的能力，这种溶剂称为惰性溶剂★种类：苯、甲苯、氯仿等★惰性溶剂常与质子溶剂混合使用，以改善样品的溶解性能，增大滴定突跃，从而使终点时指示剂变色敏锐

对供试品的溶解能力要大，并能溶解滴定产物(2)

能增强供试品的酸碱性，而又不引起副反应(3)

溶剂应能使滴定突跃明显。降低溶剂的介电常数(ε)，能使滴定突跃明显。

（三）溶剂的选择溶剂的极性大小是以介电常数为判断的，介电常数大的极性大，介电常数小的极性小。

(4)考虑使用完全、价廉、粘度小、挥发性低、易于回收和精制等。（四）基本原理——非水碱量法

1、适用范围：主要用于Kb﹤10-8的有机碱盐例：▼Kb在10-8～10-10时，选用冰醋酸做溶剂▼Kb在10-10～10-12时，选用冰醋酸和醋酐的混合溶液做溶剂▼Kb在﹤10-12时，选用醋酐做溶剂（六）问题讨论无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：高氯酸＞氢溴酸＞盐酸＞硫酸＞＞硝酸＞其它弱酸（磷酸、有机酸）

2酸根的影响如果置换出的HA酸性太强，则影响终点，不能直接滴定。

由于有机酸系弱酸，被高氯酸置换出的HA，对滴定无干扰，能准确滴定。

1）有机酸盐的测定

取本品约60mg，精密称定，加冰醋酸20ml溶解后，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（）滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（）相当于22.07mg的C19H23N3O2·C4H4O4。马来酸麦角新碱ChP(2010)

若被置换出的有机酸不溶于冰醋酸，应先将样品碱化，有机溶剂提取游离碱后，再非水碱量法测定。

一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)2的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。

理论量1～3倍

2）氢卤酸盐的测定取本品约，精密称定，加冰醋酸10ml，加热溶解后，加醋酸汞试液6ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（）滴定至溶液显翠绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（）相当于20.17mg的C10H15NO·HCl。盐酸伪麻黄碱ChP(2010)

生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫酸氢盐。直接滴定3）硫酸盐的测定硫酸阿托品

HClO4直接滴定时，反应摩尔比为1∶1

因HNO3具有氧化性，可使指示剂变色，一般电位法指示终点。如硝酸士的宁、硝酸毛果芸香碱

4）硝酸盐的测定

取本品约，精密称定，加冰醋酸20ml，振摇使溶解，照电位滴定法（附录ⅦA），用高氯酸滴定液（）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（）相当于的C21H22N2O2·HNO3。硝酸士的宁ChP(2000)

按常法测定，如磷酸氯喹、磷酸可待因5）磷酸盐的测定总结：非水溶液滴定法(弱碱性)

冰醋酸为溶剂醋酸汞消除氢卤酸的干扰结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲，也可电位法指示终点）若碱性较弱则加醋酐使突跃明显加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐例：重酒石酸去甲肾上腺素－－直接滴定盐酸克伦特罗－－加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱性较弱，电位法指示终点硫酸沙丁胺醇－－加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂重酒石酸去甲肾上腺素的测定

取本品，精密称定，加冰醋酸10ml，振摇溶解后(必要时微温)，加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸滴定液（）滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液（）相当于的C8H11NO3.C4H4O6。

由于重酒石酸在冰醋酸溶液中酸性较弱，不干扰高氯酸的滴定和结晶紫指示剂终点颜色的变化。故可以高氯酸直接滴定。硫酸沙丁胺醇的测定

取本品约，精密称定，加冰醋酸10ml，微热使溶解，放冷，加醋酐15ml和结晶紫指示液1滴用高氯酸滴定液（）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液（）相当于的（C13H21NO3)2H2SO4

。有机碱的硫酸盐，因硫酸在滴定液中酸性很强，只能滴定至HSO4-。*为何在放冷的条件下加醋酐？---防止氨基被乙酰化非水碱量法（原料药）药物取样冰HAc量HgAc2量指示剂终点肾上腺素0.15g10ml/结晶紫蓝绿重酒石酸去甲肾上腺素0.2g10ml/结晶紫蓝绿盐酸多巴胺0.15g25ml5ml结晶紫蓝绿盐酸异丙肾上腺素0.15g30ml5ml结晶紫蓝色盐酸芬氟拉明0.2g20ml5ml结晶紫蓝色盐酸氯丙那林0.2g20ml3ml结晶紫蓝绿盐酸甲氧明0.2g10ml5ml萘酚苯甲醇黄绿硫酸沙丁胺醇0.4g10ml醋酐15ml结晶紫蓝绿盐酸克仑特罗0.25g20ml5ml电位法盐酸苯乙双胍0.1g30ml5ml电位法为什么有的要加HgAc2？什么情况下采用电位法？硫酸沙丁胺醇的滴定度T如何计算？重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液采用溴量法测定含量。测定原理：药物分子中具有苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的Na2S2O3滴定液的量，即可计算含量。（二）溴量法1、游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失.2、不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量2％为宜。3、平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。测定方法：取样品，精密称定，指碘量瓶中，加水20ml是溶解，精密加溴液（）50ml，再加盐酸5ml，立即密塞，放置15min并振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠液（）滴定，致近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（）相当于的C9H12NO2.HCl案例分析·计算：·中国药典2005规定：当量以1molBr2计故根据反应式，1mol的Br2相当于1/3mol的去氧肾上腺素，即滴定当量·T=E*mol/L=M/3*0.05=3.395(mg）（v0W(mg)×100％含量测定（三）提取酸碱滴定法(溶解性差异)

方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。

■盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂

依据性质■游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂方法一：方法二：

碱化有机溶剂提取（四）亚硝酸钠法芳伯胺基，在酸性条件下与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，作永停滴定法指示终点。1）UV——苯乙胺基本结构

盐酸异丙肾上腺素注射液、重酒石酸间羟胺注射液、盐酸甲氧明注射液、硫酸沙丁胺醇注射液及其胶囊。（四）UV和比色法2)比色法

利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3＋络合显色，进行比色测定；也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色，进行比色。盐酸克仑特罗栓

（1）具芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应对照法定量注意：偶合剂N-（1-萘基）-乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂N-（1-萘基）-乙二胺。盐酸多巴胺注射液（2）具有酚羟基，与亚铁离子配位显色对照法测定方法:精密量取对照品溶液和供试品溶液各5ml，分别置100ml量瓶中，各加新制的硫酸亚铁－酒石酸盐溶液（……）5ml，再加缓冲溶液（……）稀释至刻度；照紫外－可见分光光度法，在520nm的波长处测定吸光度，计算，即得。（五）HPLC法

利用液相色谱的高效分离、高灵敏度和高选择性的测定方法，不但对本类药物制剂进行常规分析，而且还广泛用于本类药物的临床药浓监控和体内药物动力学研究。

盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、硫酸沙丁胺醇片等例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定采用RPIP-HPLC-UV法；用外标一点法进行定量测定。例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定采用RPIP-HPLC-EChD法；用标准曲线法进行定量测定。第五节体内药物分析动物组织中盐酸克仑特罗残留的测定1.提取动物肝脏组织样品5g加乙酸乙酯15ml，NaCO3溶液3ml

匀质，离心，取上清（重复一次），加盐酸，混合，离心，取水层（重复萃取一次），合并萃取液，调节pH至2.净化上样于固相萃取小柱水5ml、甲醇5ml淋洗4%氨化甲醇5ml洗脱

收集洗脱液。3.测定

BSTFA（双三甲基硅烷三氟乙酰胺）衍生化，GC/MS分析。外标法计算。1．盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有A.重氮化