环己氨基磺酸钠含量的测定（试样溶液的测定）

环己氨基磺酸钠含量的测定

技能点：试样溶液的测定主讲：李冰心

试样溶液的制备二标准溶液系列的制备及衍生化三色谱参考条件四标准曲线的制作五色谱分析六

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目录—2

—仪器与设备一仪器与设备一仪器规格仪器规格气相色谱仪带氢火焰离子化检测器（FID）样品粉碎机电子天平1mg、0.1mg微量注射器10μL涡旋振荡器1mL、10mL带盖离心管50mL离心机转速≥4000r/min刻度移液管2mL、5mL、10mL恒温水浴锅冰箱1℃~4℃超声波振荡仪250mL容量瓶50mL试样溶液的制备1.液体试样处理2.固体、半固体试样处理3.衍生化二（1）普通液体试样：摇匀称取25.0g试样（如需要可过滤），用水定容至50mL备用。1.液体试样处理——（1）普通液体试样环己氨基磺酸钠含量的测定5称取25.0g试样定容至50mL普通液体试样（2）含二氧化碳的试样：称取25.0g试样于烧杯中，60℃水浴加热30min以除二氧化碳，放冷，用水定容至50mL备用。1.液体试样处理——（2）含二氧化碳的试样环己氨基磺酸钠含量的测定6称取25.0g试样60℃水浴加热30min定容至50mL含二氧化碳的试样（3）含酒精的试样：称取25.0g试样于烧杯中，用氢氧化钠溶液调至弱碱性pH7～8，60℃水浴加热30min以除酒精，放冷，用水定容至50mL备用。1.液体试样处理——（3）含酒精的试样环己氨基磺酸钠含量的测定7称取25.0g试样定容至50mL含酒精的试样NaOH溶液调至弱碱性pH7～860℃水浴加热30min（1）低脂、低蛋白样品（果酱、果冻、水果罐头、果丹类、蜜饯凉果、浓缩果汁、面包、糕点、饼干、复合调味料、带壳熟制坚果和籽类、腌渍的蔬菜等）2.固体、半固体试样处理——（1）低脂、低蛋白样品环己氨基磺酸钠含量的测定8环己氨基磺酸钠含量的测定8称取3.00g~5.00g打碎、混匀试样于50mL离心管中加30mL水，振摇超声提取20min，混匀3000r/min离心10min过滤，用水分次洗涤残渣，收集滤液定容至50mL低脂、低蛋白样品（2）高蛋白样品（酸乳、雪糕、冰淇淋等奶制品及豆制品、腐乳等）：冰棒、雪糕、冰淇淋等分别放置于250mL烧杯中，待融化后搅匀称取。2.固体、半固体试样处理——（2）高蛋白样品环己氨基磺酸钠含量的测定9称取3.00g~5.00g打碎、混匀试样于50mL离心管中加30mL水，振摇超声提取20min，混匀3000r/min离心10min过滤，用水分次洗涤残渣，收集滤液定容至50mL高蛋白样品加入2mL亚铁氰化钾溶液、2mL硫酸锌溶液，混匀（3）高脂样品（奶油制品、海鱼罐头、熟肉制品等）2.固体、半固体试样处理——（3）高脂样品环己氨基磺酸钠含量的测定10称取3.00g~5.00g打碎、混匀试样于50mL离心管中加25mL石油醚，振摇超声提取3min，混匀1000r/min以上离心10min定容至50mL高脂样品弃石油醚，用25mL石油醚提取一次，弃石油醚60℃水浴挥发去除石油醚残渣加30mL水，振摇，超声提取20min，混匀加入2mL亚铁氰化钾溶液、2mL硫酸锌溶液，混匀3000r/min离心10min过滤，用水洗涤残渣，收集滤液3.衍生化环己氨基磺酸钠含量的测定11准确加入5.00mL正庚烷，加入2.5mL亚硝酸钠溶液，2.5mL硫酸溶液，盖紧离心管盖，摇匀准确移取液体试样溶液、固体、半固体试样溶液10.0mL于50mL带盖离心管中离心管置试管架上冰浴中5min在冰浴中放置30min，其间振摇3次～5次低温离心（3000r/min）10min分层或低温静置20min至澄清分层取上清液放置1℃～4℃冰箱保存以备进样用盖上盖后置漩涡混合器上振动1min（或振摇60次～80次）加入2.5g氯化钠标准溶液系列的制备及衍生化三1.标准溶液系列的制备2.标准溶液系列的衍生化1.标准溶液系列的制备环己氨基磺酸钠含量的测定130.02mg/mL0.05mg/mL0.10mg/mL0.20mg/mL0.50mg/mL0.01mg/mL准确移取1.00mg/mL环己基氨基磺酸标准溶液0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、10.0mL、25.0mL于50mL容量瓶中，加水定容。配成标准溶液系列浓度为0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.50mg/mL。临用时配制。2.标准溶液系列的衍生化环己氨基磺酸钠含量的测定14准确加入5.00mL正庚烷，加入2.5mL亚硝酸钠溶液，2.5mL硫酸溶液，盖紧离心管盖，摇匀准确移取系列标准溶液10.0mL于50mL带盖离心管中离心管置试管架上冰浴中5min在冰浴中放置30min，其间振摇3次～5次低温离心（3000r/min）10min分层或低温静置20min至澄清分层取上清液放置1℃～4℃冰箱保存以备进样用盖上盖后置漩涡混合器上振动1min（或振摇60次～80次）加入2.5g氯化钠色谱参考条件四（1）色谱柱：弱极性石英毛细管柱（内涂5%苯基甲基聚硅氧烷，30m×0.53mm×1.0μm），或等效柱。（2）进样口温度：230℃。（3）升温程序：初始柱温55℃，保持3min，以10℃/min升温至90℃，保持0.5min，20℃/min升温至200℃，保持3min。（4）进样口：230℃。（5）进样量：1μL。（6）进样方式：不分流/分流进样，分流比1:5（分流比及方式可根据色谱仪器条件调整）。（7）载气：高纯氮气，流速12.0mL/min，尾吹20mL/min。（8）氢气：30mL/min；空气330mL/min（载气、氢气、空气流量大小可根据仪器条件进行调整）。（9）检测器：氢火焰离子化检测器（FID），温度260℃。标准曲线的制作分别吸取1μL经衍生化处理的标准系列各浓度溶液上清液，注入气相色谱仪中，可测定不同浓度被测物的响应值峰面积，以浓度为横坐标，以环己醇亚硝酸酯和环己醇两峰面积之和为纵坐标，绘制标准曲线。五色谱分析在完全相同的条件下进样1μL经衍生化处理的试样待测液上清液，保留时间定性，测定峰面积，根据标准曲线得到样液中的组分浓度；试样上清液响应值若超出线性范围，应用正庚烷稀释后再进样分析。