淀粉液化酶(-amylase)的测定_第1页
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文档简介

Enzyme1:

澱粉液化酶(α-amylase)的測定

器具及材料:原理:器具:試管、微量吸管、恆溫水槽材料:使用稀釋適當的酵素培養液、可溶性澱粉溶液、

0.1N碘溶液(碘0.2g與碘化鉀20g溶解於純水成為100ml)

、磷酸緩衝液使用Wolgemuth法,求出力價的方法。步驟:準備六支試管(a~f),各加不同量的酵素液,並各加磷酸緩衝液(Mcllvainebuffersolution)1ml。各式管加預溫至40℃的1%可溶性澱粉溶液5ml,立即混合,於40℃的恆溫槽反應30分鐘。等冷卻後,各加0.1N碘溶液三滴,觀察呈色,選出紫色。計算方法由成色為紫色之試管的酵素添加量算出被酵素液分解的1%澱粉溶液ml數,此酵素液的力價,依下列公式求出。D:澱粉液化力(力價)A:酵素液量(ml)n:稀釋倍數

D30=——×5×nA140注意事項:如果酵素力價太高,全部褪色至紅褐色以下時,碘澱粉反應的變化則不在範圍內呈現,此時應將原來的酵素溶液稀釋,用稀釋液依照本法操作,力價D依照原來的酵素溶液算出,乘以稀釋倍數n,D:澱粉液化力(力價)A:酵素液量(ml)n:稀釋倍

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