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文档简介

细胞器切片的制作1、取材：小白鼠小肠或肝2、固定：入Regaud固定液固定天（每天需更换一次固定液）3、媒染：入3%重铬酸钾水溶液中媒染7天（每两天更换一次新液）4、冲洗：先用自来水冲洗24小时，然后用蒸馏水浸洗数次。一、线粒体切片标本的制作

5、脱水透明：在酒精中从低浓度到高浓度依次脱水，100%以下的浓度每次1小时，在100%酒精中2次，每次30分钟，转入二甲苯2次透明，每次30分钟。6、浸蜡包埋：等量二甲苯与软蜡1次，软蜡1次，硬蜡1次，每次30分钟，用纸盒或金属包埋盒包埋。（包埋时注意切面方向）

7、切片贴片烤片：载玻片上涂少许蛋白甘油，切片厚度2-4微米，在贴片容器中贴片，入37。C恒温箱中烘烤24小时。8、脱蜡入水：二甲苯2次，每次10min,100%酒精中2次,每次5min,100%以下的浓度每次2min，下行至蒸馏水。9、媒染：入5%铁明矾水溶液中媒染24小时（37。C恒温箱中）。10、染色：蒸馏水速洗后入苏木精染液中染色24小时。11、分色：蒸馏水速洗后入2.5%铁明矾水溶液中分色，数秒后，显微镜下镜检，见细胞核和线粒体呈黑色，细胞质呈无色或灰色即可。此步骤非常关键，一定要不间断镜检。12、返蓝：自来水浸泡数小时13、脱水透明：与第8步骤（脱蜡入水）相反方向操作即可。14、镜检封固：镜下检查，染色合格的切片滴1滴中性树胶，盖上盖玻片。放入凉片盒中。二、高尔基体切片标本的制作1、取材：猫或兔的神经节2、固定：入高尔基体固定液固定8-18小时3、冲洗：用蒸馏水速洗2次。4、镀银：入2%硝酸银水溶液中镀银48小时（室温下、避光）5、冲洗：用蒸馏水速洗2次6、还原：入硝酸银还原液中24小时7、冲洗：用蒸馏水速洗2次8、脱水透明：在酒精中从低浓度到高浓度依次脱水，100%以下的浓度每次40分钟，在100%酒精中2次，每次20分钟，转入二甲苯2次透明，每次20分钟。9、浸蜡包埋：等量二甲苯与软蜡1次，软蜡1次，硬蜡1次，每次20分钟，用纸盒或金属包埋盒包埋。

10、切片贴片烤片：载玻片上涂少许蛋白甘油，切片厚度3-6微米，在贴片容器中贴片，入37。C恒温箱中烘烤24小时11、脱蜡入水：二甲苯2次，每次10min,100%酒精中2次,每次5min,100%以下的浓度每次2min，下行至蒸馏水。12、调色：入1%氯化金水溶液中2小时13、冲洗：用蒸馏水速洗2次14、固定：入5%无水硫代硫酸钠水溶液中3min15、冲洗：用自来水冲洗5min16、脱水透明：与第

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