花粉生活力测定

实验一花粉生活力的测定

一、实验目的学习和掌握花粉生活力测定的方法测定在不同温度保存下的花粉生活力的变化情况花粉二、实验原理作物杂交工作中，往往会遇到父母本花期不遇，必须采集花粉短暂贮藏，经贮藏的花粉及其生活力如何，必须经过测定，以保证杂交效果。此外，花粉的生理研究，作物雄性不育和远缘杂交都要鉴定花粉育性和生活力。正常条件下花粉在雌蕊上萌发的能力，就是花粉的生活力。

花粉生活力的高低直接影响植物授粉、受精乃至坐果。花粉生活力测定的方法较多，常用的有：形态鉴定、花粉发芽鉴定、染色鉴定

。形态鉴定：

花粉有无生活力在形态上有明显差异，即形态是否发育正常，其内部淀粉等内含物是否充实。发育不正常的花粉，内含物不充实而空秕，形状也不规则，大小参差不齐。而正常花粉内含物充实饱满，形状规则，大小整齐。因内部含有较多淀粉粒而遇1%I-IK溶液呈深紫色反应，遇水易吸涨而破裂。一般适用于不育系及远缘杂交后代花粉形态和育性的鉴定。★简便，但是一般用于要求不严格新采集的花粉花粉发芽鉴定：配制一定浓度的蔗糖溶液等作培养基，在人工控制条件下进行花粉发芽试验，根据花粉发芽率的高低衡量花粉生活力。也可以在授粉数小时后直接观察柱头花粉萌发伸长情况。

染色鉴定：用不同的化学试剂如氯化三苯基四氮唑（2，3，5-triphenyltetrazoliumchloride、C12H15N4Cl，简称TTC或四唑）、联苯胺茶酚等快速鉴定花粉生活力。三、实验用品1、材料正在开花的植株花粉（大樱桃美早）2、器具盖、载玻片凹式载玻片培养皿滴管镊子吸水纸恒温箱

天平

烧杯玻棒电炉普通显微镜3、药品蒸馏水硼酸

蔗糖琼脂六偏磷酸钠四、内容与方法（花粉萌发）（一）培养法：1、配置培养基取100ml蒸馏水中，加1~2g（即1%~2%）琼脂煮开，使之溶解，然后再加入一定量的蔗糖或葡萄糖和0.01g硼酸，制成不同浓度（5%、10%、15%、20%）的蔗糖琼脂培养基。2、制片用玻棒蘸少许培养基，趁热滴入凹形载玻片，放置片刻，待凝固后，撒上少许花粉粒。注意要均匀，不可过多，否则，在显微镜下，不易分清数目。3、培养将制好的玻片放于培养皿，下面垫有滤纸，加入少量水，以保持湿度。将培养皿盖好，置于20~25℃恒温箱中。22℃4、镜检在显微镜下隔一定时间检查一次（花粉发芽快的经过几个小时即可观察到已经发芽，慢的需24小时以上），若发现花粉已发芽时，就随机地在显微镜下取5个视野，记录花粉粒总数和发芽数，算出平均值，将观察结果填入表内。

花粉发芽的标准，以花粉管伸长超出花粉直径为准。若花粉发芽率在5%以下，为极弱，不能采用。（花粉发芽率=发芽花粉总数\花粉总数）培养过程要密切观察，不可使花粉管萌发的太长，否则难以计数。★培养基法能够统计出百分率，准确度高，但是操作相对复杂，而且花粉发芽条件与实际不完全相符易受培养基配方的影响导致结果的偏差。配置培养基（100ml水+1g+琼脂+0.01g硼酸+5-20g糖）

煮沸溶化用玻棒分装与凹玻片中

播撒花粉置于培养皿中20-25℃恒温培养数小时

保持湿度在显微镜下镜检计数【注意事项】1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同，应依植物种类而改变培养条件。

2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度，离体时间，环境条件等因素对花粉活力的影响。3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发，本法适用于易于萌发的(葫芦科等)植物花粉活力的测定。不同时间萌发率图时间平均萌发率冰箱保存常温保存365.60%48.90%649.60%39.40%947%33.20%1245.40%29.50%1537%29.30%1830.10%21.50%2126.90%15.20%2422%10.30%2716.20%9.60%3010.20%8.23%同期花粉萌发率对比图五结果与数据分析

六结论柱状图：不同温度保存相同时间下，冰箱保存的萌发率高于常温保存随时间增长两者萌发率都呈下降趋势折线图：3-6天内冰箱保存萌发率下降较快出现平缓的趋势，可能是实验存在