生化组习题配答案

生化测试一氨基酸一、填空题1.氨基酸的结构通式为。2.氨基酸在等电点时，主要以兼性/两性离子形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以阴离子形式存在，在pH<pI的溶液中，大部分以阳离子形式存在。3.生理条件下（pH7.0左右），蛋白质分子中的Arg侧链和Lys侧链几乎完全带正电荷，但His侧链带部分正电荷。4.测定蛋白质紫外吸收的波长，一般在280nm，主要由于蛋白质中存在着Phe、Trp、Tyr氨基酸残基侧链基团。5.皮肤遇茚三酮试剂变成蓝紫色，是因为皮肤中含有蛋白质（氨基酸）所致。6.Lys的pk1（—COOH）=2.18，pk2（—）=8.95，pk3（—）=10.53，其pI为9.74。在pH=5.0的溶液中电泳，Lys向负极移动。7.Henderson—Hasselbalch方程为pH=pKa+lg[质子受体]/[质子受体]。8.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱（NaOH）来滴定上放出的NH3+/氨基。9.一个带负电荷的氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上，因此需要一种比原来缓冲液pH值小和离子强度高的缓冲液，才能将此氨基酸洗脱下来。10.用N-溴代琥珀酰亚胺试剂可区分丙氨酸和色氨酸。二、选择题1.区分极性氨基酸和非极性氨基酸是根据（C）A.所含的羧基和氨基的极性 B.所含氨基和羧基的数目C.所含的R基团为极性或非极性 D.脂肪族氨基酸为极性氨基2.下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸（D）A.亮氨酸 B.异亮氨酸 C.苯丙氨酸 D.酪氨酸3.下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸：（D）A.精氨酸，赖氨酸 B.谷氨酸，谷氨酰胺C.组氨酸，精氨酸 D.谷氨酸，天冬氨酸4.含硫的必需氨基酸是（B）A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.苏氨酸 D.亮氨酸5.芳香族必需氨基酸包括（D）A.蛋氨酸 B.酪氨酸 C.亮氨酸 D.苯丙氨酸6.含四个氮原子的氨基酸是（B）A.赖氨酸 B.精氨酸 C.酪氨酸 D.色氨酸7.蛋白质中不存在的氨基酸是下列中的哪一种？（D）A.赖氨酸 B.羟赖氨酸 C.酪氨酸 D.鸟氨酸8.在蛋白质中不是L-氨基酸的是（B）A.苏氨酸 B.甘氨酸 C.半胱氨酸 D.谷氨酰胺9.谷氨酸的PK值为2.19,4.25,9.76;赖氨酸的PK值为2.18,8.95,10.53;则它们的PI值分别为（B）A.2.19和10.53 B.3.22和9.74 C.6.96和5.56 D.5.93和6.3610.从赖氨酸中分离出谷氨酸的可能性最小的方法是（D）A.纸层析 B.阳离子交换层析 C.电泳 D.葡萄糖凝胶过滤11.用于确定多肽中N-末端氨基酸的是（C）A.Sanger试剂 B.Edman试剂 C.两者均可 D.两者均不可12.有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱的氨基酸是（C）A.Val(PI5.96) B.Lys(PI9.74) C.Asp(PI2.77) D.Arg(PI10.76)13.下列那种氨基酸属于非编码氨基酸？（D）A.脯氨酸 B.精氨酸 C.酪氨酸 D.羟赖氨酸14.可使二硫键氧化断裂的试剂是（C）A.尿素 B.巯基乙醇 C.过甲酸 D.SDS15.没有旋光性的氨基酸是（C）A.Ala B.Pro C.Gly D.Glu16.Sanger试剂是（B）A.苯异硫氰酸酯 B.2,4—二硝基氟苯 C.丹磺酰氯 D.β-巯基乙醇17.酶分子可逆共价修饰进行的磷酸化作用主要发生在哪一个氨基酸上（B）A.Ala B.Ser C.Glu D.Lys18.当含有Ala,Asp,Leu,Arg的混合物在pH3.9条件下进行电泳时，哪一种氨基酸移向正极(+)（B）A.Ala B.Asp C.Leu D.Arg19.下列哪种氨基酸溶液不使平面偏振光发生偏转（B）A.Pro B.Gly C.Leu D.Lys20.对哺乳动物来说，下列哪种氨基酸是非必需氨基酸（C）A.Phe B.Lys C.Tyr D.Met21.一个谷氨酸溶液，用5ml的1M的NaOH来滴定，溶液中的PH从1.0上升到7.0，下列数据中哪一个接近于该溶液中所含谷氨酸的毫摩尔数为（B）A.1.5 B.3.0 C.6.0 D.1222.下列AA中含氮量最高的是（A）A.Arg B.His C.Gln D.Lys23.下列在280nm具有最大光吸收的基团是（A）A.色氨酸的吲哚环 B.酪氨酸的酚环 C.苯丙氨酸的苯环 D.半胱氨酸的硫原子24.在生理pH值条件下，具有缓冲作用的氨基酸残基是（C）A.Tyr B.Trp C.His D.Lys25.下列关于离子交换树脂的叙述哪一个是不正确的？（D）A.是人工合成的不溶于水的高分子聚合物 B.阴离子交换树脂可交换的离子是阴离子C.有阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类 D.阳离子交换树脂可交换的离子是阴离子26.下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构（D）A.Met B.Ser C.Glu D.Cys27.下列氨基酸中哪个含有吲哚环？（C）A.Met B.Tyr C.Trp D.His三、名词解释1.α-氨基酸：是含有氨基的羧酸，氨基连接在α-碳上。α-氨基酸是蛋白质的构件分子。2.必需氨基酸：机体自身不能合成、必须从外界摄入的氨基酸种类。3.层析：层析技术又称色谱技术，是一种根据被分离物质的物理、化学及生物学特性的差异，使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。4.纸层析：利用滤纸作为层析载体，按照混合物在移动相和固定相之间分配比例的不同，将混合成分分开的技术。5.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。6.氨基酸的等电点：在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。四、问答题（课后题6，7，14，15）

生化测试二蛋白质一、填空题1.决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在，以及以什么形式存在的主要因素是由一级结构决定的。2.用于测定蛋白质溶液构象的各种方法中，测定主链构象的方法有圆二色性和拉曼光谱,测定侧链构象的方法有紫外差光谱和荧光和荧光偏振，能测定主链和侧链构象的有核磁共振。3.测定蛋白质中二硫键位置的经典方法是对角线电泳。4.从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质的主要原理是根据它们之间的溶解度、分子量/分子大小、带电性质、吸附性质、生物亲和力。5.血红蛋白与氧结合是通过变构效应实现的.由组织产生的CO2扩散到细胞,从而影响Hb和O2的亲合力,这称为波尔效应。6.蛋白质二级结构和三级结构之间还存在超二级结构和结构域两种组合体。7.蛋白质多肽链主链构象的结构单元包括α-螺旋、β-折叠、β-转角,，维系蛋白质二级结构的主要作用力是氢键。8.三肽val-tyr-ser的合适名字是缬氨酰酪氨酰丝氨酸。9.蛋白质的-螺旋结构中，3.6个氨基酸残基旋转一周，每个氨基酸沿纵轴上升的高度为0.15nm，旋转100度。10.凡能破坏蛋白质水化层和电荷层的因素，均可使蛋白从溶液中沉淀出来。11.变性蛋白质同天然蛋白质的区别是生物活性丧失，紫外吸收增加，溶解度降低，易被酶消化。12.聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨力之所以很高,是因为它具有电荷效应、分子筛效应、浓缩效应三种效应。13.交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的带电/解离性质。阴离子交换层析在层析柱内填充的交换剂上带正电荷，可吸引带负电荷的蛋白质，然后用带负电荷的溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。14.当蛋白质分子中的一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体的结合能力，此效应称为协同效应。当Hb的第一个亚基与O2结合后，对其他三个亚基与O2的结合具有促进作用，这种效应称为正协同效应。其氧解离曲线呈S型。15.胰岛素原由1条肽链组成。二、选择题1.下列描述中哪些叙述对一直链多肽Met-Phe-Leu-Thr-Val-Ile-Lys是正确的（AC）A.能与双缩脲试剂形成紫红色化合物 B.由七个肽键连接而成C.胰凝乳蛋白酶水解 D.含有-SH2._D__是一种去垢剂,常用在凝胶电泳中,以测定蛋白质的分子量（）A.β-巯基乙醇 B.盐酸胍 C.碘乙酸 D.十二烷基硫酸钠3.以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链的方向和阻断a－螺旋（D）A.Phe B.Cys C.Trp D.Pro4.免疫球蛋白分子中二重链之间，以及重链与轻链之间，均以如下一种键的形式相连（C）A.氢键 B.疏水相互作用 C.二硫键 D.离子键

5.蛋白质分子中α螺旋的特点是（C）A.肽键平面完全伸展 B.靠盐键维持稳定 C.多为右手螺旋 D.螺旋方向与长轴垂6.为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能的方法是加入（A）A.硫酸铵 B.三氯乙酸 C.对氯汞苯甲酸 D.氯化汞 E.NH4Cl

7.下述哪种分离方法可得到不变性的蛋白质制剂（D）A.苦味酸沉淀 B.硫酸铜沉淀 C.常温下乙醇沉淀 D.硫酸钠沉淀 E.加热8.有一个肽用胰蛋白酶水解得：①H-Met-Glu-Leu-Lys-OH②H-Ser-Ala-Arg-OH③H-Gly-Tyr-OH三组片段，用BrCN处理得：④H-Ser-Ala-Arg-Met-OH⑤H-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段，按肽谱重叠法推导出该九肽的序列应为（C）A.3+2+1B.5+4C.2+1+39.蛋白质变性后，不发生下列哪种改变（C）A.生物活性丧失B.易被降解C.一级结构改变D.空间结构改变E.次级键断裂10.两个不同蛋白质中有部分的一级结构相同（B）A.这部分的二级结构一定相同 B.这部分的二级结构可能不同 C.它们的功能一定相同D.它们的功能一定不同 E.这部分的二级结构一定不同11.带电颗粒在电场中的泳动度首先取决于下列哪项因素（C）A.电场强度 B.支持物的电渗作用 C.颗粒所带净电荷数及其大小，形状D.溶液的pH值 E.溶液的离子强度12.关于离子交换色谱的描述下列哪一项不正确（CD）A.离子交换剂通常不溶于水 B.阳离子交换剂常中离解出带正电的基团C.阴离子交换剂常可离解出带正电的基团 D.阳离子交换剂常可离解出带负电的基团E.可用于分离纯化等电点等于7的蛋白质13.对于蛋白质的溶解度，下列叙述中哪一条是错误的（B）A.可因加入中性盐而增高 B.在等电点时最大 C.可因加入中性盐降低D.可因向水溶液中加入酒精而降低 E.可因向水溶液中加入丙酮降低14.向血清中加入等容积的饱和硫酸铵溶液，可使（E）A.白蛋白沉淀 B.白蛋白和球蛋白都沉淀 C.球蛋白原沉淀D.纤维蛋白原沉淀 E.只有球蛋白沉淀15.下列蛋白质中，具有四级结构的是（D）A.胰岛素B.细胞色素C C.RNA酶 D.血红蛋白 E.肌红蛋白16.下列哪种蛋白质不含铁原子（E）A.肌红蛋白 B.细胞色素C C.过氧化氢酶 D.过氧化物酶 E.胰蛋白酶17.下列各项不符合纤维状蛋白理化性质的是（B）A.长轴与短轴在比值大于10 B.易溶于水 C.不易受蛋白酶水解D.不适合用分子筛的方法测其相对分子质量 E.其水溶液黏度高18.血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于（AC）A.O2分压的减少 B.CO2分压的减少 C.CO2分压的增加D.N2分压的增加 E.pH的增加19.关于蛋白质三级结构的描述，下列哪项是正确的（A）A.疏水基团位于分子内部 B.亲水基团位于分子内部C.羧基多位于分子内部 D.二硫键位于分子表面20.镰刀型贫血病患者，Hb分子中氨基酸的替换及位置是（D）A.α链第六位Val换成Glu B.β链第六位Val换成GluC.α链第六位Glu换成Val D.β链第六位Glu换成Val21.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时，最先被洗脱的是（D）A.牛胰岛素（分子量5700） B.肌红蛋白（分子量16900）C.牛β乳球蛋白（分子量35000） D.马肝过氧化物酶（分子量247500）22.每分子血红蛋白可结合氧的分子数是（D）A．1 B．2 C．3 D．423.免疫球蛋白是一种什么蛋白（A）A．糖蛋白 B．脂蛋白 C．铁蛋白 D．核蛋白24.特殊的羟-Pro和羟-Lys存在于下列哪种蛋白质中（A）

A.胶原 B.角蛋白 C.肌球蛋白 D.微管蛋白三、是非题1.蛋白质分子的一级结构决定其高级结构，最早的实验证据是蛋白质的可逆变性（√）。2.原胶原纤维中参与产生共价交联的是羟脯氨酸残基。（×）3.a-螺旋中Glu出现的概率最高,因此poly(Glu)可以形成最稳定的a-螺旋。(×)4.用重金属盐沉淀蛋白质时，溶液的PH值应稍大于蛋白质的等电点。（√）5.phe-leu-ala-val-phe-leu-lys是一个含有7个肽键的碱性七肽。（×）6.pH8条件下,蛋白质与SDS充分结合后平均每个氨基酸所带电荷约为0.5个负电荷。(√)7.在Hb分子中，其F8His和E7His都分别以第五和第六位与血红素中的Fe配位相结合。（×）8.在蛋白质分子进化过程中，其空间结构的变化要比序列的变化更为保守。（√）9.使亚基间缔合成一个蛋白质的主要作用力是次级键，而其中又以疏水基团之间的作用力最为普遍。（√）10.二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构。（×）11.任何一个蛋白质的紫外吸收的峰值都在280nm附近。(×)四、名词解释1.蛋白质变性：蛋白质在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。2.结构域：指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体，称为结构域。3.同源蛋白质:来自不同种类生物的序列和功能类似的蛋白质。4.Edman降解：是一种用来测定多肽和蛋白质氨基酸序列的方法。用苯异硫氰酸酯与多肽的N末端的氨基酸反应，从多肽链的N末端切下第一个氨基酸残基，用层析法可以测定在和这个被切下的氨基酸残基。余下的多肽链（少了一个氨基酸残基），再进行下一轮Edman降解循环，切下N末端的第二个氨基酸残基，并测定。重复循环过程，直到测出整个多肽的氨基酸序列。5.β-转角：多肽链中常见的二级结构，连接蛋白质分子中的二级结构（α-螺旋和β-折叠），使肽链走向改变的一种非重复多肽区。常见的β-转角含有四个氨基酸残基，第一个残基的C=O与第四个残基的N-H氢键键合形成一个紧密的环，第二个残基大都是脯氨酸。此结构多处在蛋白质分子的表面。6.蛋白质的超二级结构：也称之模序（motif），在蛋白质中由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成的有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体。7.肽平面：肽键具有一定程度的双键性质，参与肽键的六个原子C、H、O、N、Cα1、Cα2不能自由转动，位于同一平面，此平面就是肽平面。四、问答题1.某八肽的氨基酸组成是2Lys,Asp,Tyr,Phe,Gly,Ser和Ala。此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNP—Ala。用胰蛋白酶水解该八肽，得到两个三肽及一个二肽，其三肽的氨基酸组成分别为Lys,Ala,Ser和Gly,Phe,Lys。用胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）水解该八肽，释放出游离的Asp及一个四肽和一个三肽，四肽的氨基酸组成是Lys,Ser,Phe,Ala,三肽与FDNB反应后，经酸水解释放出DNP—Gly。根据上述结果分析，写出该八肽的氨基酸排列顺序，并简述分析过程。（分析过程写在反面）Ala-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Tyr-Asp题1,胰蛋白酶、糜蛋白酶水解后氨基酸后“分别为”给人的感觉有歧义,好像是构成一个顺序一样.仔细分析一下题,显然从题意来看水解的片段组成没顺序.

DNS-Ala不用说N端第一个氨基酸Ala确定了.胰蛋白酶切割左边精、赖氨酸位点,糜蛋白酶切割左边phe、trp、tyr位点.

糜蛋白酶水解产生游离的ASP不用说八肽C端-phe-ASP顺序确定了.产物四肽含有phe,phe一定在四肽的C末端确定了.

胰蛋白酶水解产物Lys,Ala,Ser,显然Lys一定在C末端,这三肽顺序就确定ala-ser-Lys.又由于四肽包含了三肽Lys,Ala,Ser.显然四肽顺序为Ala-ser-Lys-Phe

现在只剩下2个氨基酸顺序没确定,又胰蛋白酶另一个水解三肽为Gly,Phe,Lys,而这个三肽中的phe又是必定和ASP相连,Gly和Lys被两个phe夹着,要保证胰蛋白酶水解3,3,2的结果,故八肽顺序为：Ala-ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Phe-Asp2.试考虑一个由ala,arg2,glu2,asp2,gly,lys,ser,thr组成的十一肽，用Sanger试剂DNFB处理确定其N-末端为谷氨酸，经部分酸水解后得到下列各肽段：(asp,glu)、(glu,gly)、(asp,glu,gly)、(ala,asp)、(ala,asp,ser)、(asp,glu,lys)、(ser,thr)、(asp,lys)、(arg,thr)、(arg2,thr)、(ala,asp,gly)、(arg,lys)，请直接写出此十一肽的氨基酸全顺序。（注：给出的12个小肽段只表示氨基酸组成，而非顺序）glu-gly-asp-ala-ser-thr-arg-arg-lys–asp-glu或反向序列N末端为Glu而十一肽.Lys只有1个,其为突破口(asp,lys)(arg,lys)可知Lys必然被夹着,又(asp,glu,lys)故glu-ASP-Lys-Arg,当然NC末端还无法确定

由(ser,thr)(arg,thr)可知Thr只有一个也必然被夹着又由于(arg2,thr)可知为Ser-Thr-Arg-Arg.2个Arg已确定故：glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser.又(ala,asp,ser)(ala,asp,gly)可知Ser连接(ala,asp）然后和Gly相连,又(asp,glu,gly)可以确定gly和Asp相连故Ser-Ala-Asp-Gly.又(asp,glu,gly)

可以确定整个顺序Glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser-Ala-Asp-Gly-Glu

推到出来两头都有Glu,此题似乎信息无法确定哪端是N端哪端是C端?

生化测试三酶一、填空题1.酶的活性中心有结合部位和催化部位两个功能部位，其中结合部位直接与底物结合，决定酶的专一性，催化部位是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。2.温度对酶活性的影响有以下两个方面，一方面随着温度的升高酶活性增加，另一方面过高的温度会使酶蛋白变性。3.酶活力是指酶催化一定化学反应的能力，一般用单位时间内酶催化反应产物的增加量表示。4.磺胺类药物可以抑制二氢叶酸合成酶，从而抑制细菌生长繁殖。5.全酶有酶蛋白和辅助因子组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中酶蛋白决定专一性和效率，辅助因子起传递电子、原子或化学基团的作用。6.酶活性的快速调节方式包括变构调节和可逆修饰。7.酶促反应的特点为专一性、高效性、催化条件温和活性可调节。二、选择题1.竞争性可逆抑制剂的抑制程度与下列哪种因素无关（A）A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D.酶与抑制剂亲和力的大小E.酶与底物亲和力的大小2.哪种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度（B）A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用 C.非竞争性可逆抑制作用D.反竞争性可逆抑制作用 E.无法确定3.酶的竞争性可逆抑制剂可以使（C）A.Vmax减小，Km减小 B.Vmax增加，Km增加 C.Vmax不变，Km增加D.Vmax不变，Km减小 E.Vmax减小，Km增加4.下列常见抑制剂中，除哪个外都是不可逆抑制剂（E）A.有机磷化物 B.有机汞化物 C.有机砷化物 D.氰化物 E.磺胺类药物5.溶菌酶在催化反应时，下列因素中除哪个外，均与酶的高效率有关（D）A.底物形变 B.广义的酸碱催化 C.邻近效应与轨道定向 D.共价催化 E.无法确定6.在一酶反应体系中，若有抑制剂I存在时，最大反应速度为V’max，没有抑制剂时的最大反应速度为Vmax，若V’max=Vmax（E0-I0）/E0，则I为（D）A.竞争性可逆抑制剂 B.非竞争性可逆抑制剂 C.反竞争性可逆抑制剂D.不可逆抑制剂 E.不确定7.关于变构酶下列哪一种说法是错的（C）A.变构效应剂多为酶的底物或产物 B.存在催化与调节两个活性部位C.反应符合米-曼氏方程式 D.反应曲线呈S形 E.一般由多个亚基组成8.酶的活化和去活化过程中，酶的磷酸化和去磷酸化的位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上（D）A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E甘氨酸9.以Hill系数判断，具有负协同效应的别构酶（C）A．n>1 B.n=1 C.n<1 D.n大于等于1 E.n小于等于110．酶的抑制剂（B）A.由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降 B.使酶活性下降而不引起酶蛋白变性C.只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响 D.一般为强酸，强碱E.都和底物结构相似11．关于变构调节，正确的是（B）A.所有变构酶都有一个调节亚基，一个催化亚基B.变构酶的动力学特点是酶促反应与底物浓度的关系呈s形而不呈双曲线形C.变构激活和酶被激活剂激活的机制相同 D.变构抑制与非竞争抑制相同12．同工酶的叙述，正确的是（C）A.结构相同来源不同B.由不同亚基组成C.电泳迁移率往往不同D.对同一底物具有不同专一性13．丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于（C）A反馈抑制B底物抑制C竞争性可逆抑制D非竞争性可逆抑制E反竞争性可逆抑制14．下列叙述哪一种是正确的（C）A所有辅酶都包含有维生素组分 B所有的维生素都可以作为辅酶的成分C所有的B族维生素都可以作为辅酶的成分 D只有B族维生素可以作为辅酶的成分E只有一部分B族维生素可以作为辅酶的成分。15.关于酶的必需基团的错误描述是（E）A.可催化底物发生化学反应 B.可与底物结合 C.可维持酶活性中心的结构D.可存在于酶的活性中心以外 E.只存在于酶的活性中心16.某一符合米曼氏方程的酶,当[S]=2Km时,其反应速度V等于（B）A.Vmax B.2/3Vmax C.3/2Vmax D.2Vmax E.1/2Vmax17.酶的非竞争性抑制作用的特点是（D）A.抑制剂与酶的活性中心结构相似B.抑制剂与酶作用的底物结构相似C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关D.抑制作用不受底物浓度的影响E.动力学曲线中Vmax不变,Km值变小18.关于修饰酶的错误描述是（C）A.酶分子可发生可逆的共价修饰 B.这种修饰可引起其活性改变C.修饰反应可在各种催化剂催化下进行 D.磷酸化和脱磷酸是常见的修饰反应E.绝大多数修饰酶都具有无活性和有活性两种形式19.有关全酶的描述下列哪一项不正确（D）A.全酶由酶蛋白和辅助因子组成 B.通常一种酶蛋白和辅助因子结合C.而一种辅助因子则可与不同的酶蛋白结合 D.酶促反应的特异性取决于辅助因子E.酶促反应的高效率取决于酶蛋白20..酶的竞争性抑制作用的特点是（B）A.抑制剂与酶的活性中心结构相似B.抑制剂与酶作用的底物结构相似C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关D.抑制作用不受底物浓度的影响E.动力学曲线中Km值不变，Vmax变小21.下列哪个过程是酶原的激活过程（B）A.前胶原→原胶原 B.胰岛素原→胰岛素 C.凝血因子I→IaD.凝血因子II→IIa E.糖原合成D→I22.已知两种酶互为同工酶（D）A.它们的Km的值一定相同 B.它们的等电点相同 C.它们的分子结构一定相同D.它们所催化的化学反应相同 E.它们的辅基一定相同23.酶促反应的最适温度（E）A.随时间延长而升高 B.是酶的特征性常数 C.在人体内为50℃ D.都不超过50℃E.是在某条件下，酶促反应速度最大时的温度三、是非题1.Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶的底物无关。（×）2.酶的最适PH值是一个常数，每一个酶只有一个确定的最适PH值。（×）3.金属离子作为酶的激活剂，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。（√）4.竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。（×）5.正协同效应使酶促反应速度对底物浓度变化越来越敏感。（√）6.从鼠脑分离的己糖激酶可作用于葡萄糖（Km=6X10-6mol/l）或果糖（Km=2X10-3mol/l），则该酶对果糖的亲和力更高。（×）7.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的比活力和总活力。（√）8.蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser，Thr和Tyr外，还有His，Cys，Asp等。（√）四、名词解释酶的变构调节:酶在效应物的作用下发生构象改变，同时引起酶的活性变化的调节方式。是一种可逆的快速调节方式。酶的活性中心：酶分子中少数几个氨基酸残基组成的特定空间结构，包括结合部位和催化部位。酶的活力单位:是指规定条件（最适条件）下一定时间内催化完成一定化学反应量所需的酶量。是衡量酶活力大小的计量单位。有国际酶学会标准单位和习惯单位。比活力:每单位（一般是mg）蛋白质中的酶活力单位数（酶单位/mg蛋白），可以表示酶的纯度。五、计算题1.测定一种酶的活性得到下列数据：底物的初浓度：1nmol/10ml；反应时间：10分钟；产物生成量：50nmol/10ml；蛋白质浓度：10mg/10ml；反应速度至少在10分钟内与酶活性呈正比，试问此酶的比活力（specificactivity）是多少？把酶的活力单位定义为：在标准的测定条件下，1分钟内生成1摩尔产物所需的酶量。则此酶的比活力为：50×10-9÷10÷10=5×10-10活力单位/mg蛋白质（注意要先根据题意定义酶的活力单位或说明使用国际单位）2.焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸，它的分子量为120000，由6个相同的亚基组成，纯酶的Vmax为2800单位/毫克酶。一个活力单位规定为：在标准的测定条件下，37℃（1）毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物？（2）毫克酶中有多少摩尔的活性中心（假定每个亚基上有一个活性中心）（3）酶的转换数为多少？1）根据Vmax为2800单位/毫克酶以及活力单位的规定可得：2800×10÷（15×60）=31.1μmol=3.1×10-5mol2）根据酶的分子量为120000，由6个相同的亚基组成，并假定每个亚基上有一个活性中心，可得：6×(1÷120000)=0.00005mmol=5×10-8mol3）转换数定义为：每秒钟每摩尔酶（活性中心）催化中心转换底物的摩尔数。则：Kcat=（3.1×10-5）÷（5×10-8）=622S-1

生化测试四核酸化学一、填空题1．碱基和核糖构成核苷，核苷和磷酸构成核苷酸，核苷酸残基之间以3’-5’磷酸二酯2．tRNA的二级结构呈三叶草型，三级结构呈倒L型。3．稳定DNA双螺旋结构的作用力有碱基堆积力、氢键和静电作用力（盐键）。4．DNA的稀盐溶液加热至某个特定温度，可使其物化性质发生很大改变，如紫外吸收增加和黏度降低，这种现象叫做变性。其原因是由于由于DNA的空间结构被破，内部碱基暴露。5．Watson－Crick提出的双螺旋结构中，核糖和磷酸处于分子外边，碱基处于分子中央，螺旋每上升一圈bp数为10。6．mRNA分子指导蛋白质合成，tRNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。7．核酸可分为DNA和RNA两大类，其中DNA主要存在于细胞核中，而RNA主要存在于细胞质中。8．双链DNA中若G、C含量多，则Tm值高。9．双链DNA螺距为3.4nm，每匝螺旋的碱基数目为10，这是B型的DNA。10．DNA双螺旋的熔解温度Tm与GC含量、均一性和离子强度有关。11．变性DNA的复性和许多因素有关，包括DNA浓度，DNA长度，均一性，GC含量和离子强度等。12．核酸在260nm附近有强吸收，这是由于碱基环的共轭双键具有紫外吸收的能力。二、选择题1．DNA和RNA两类核酸分类的主要化学依据是（D）A.空间结构不同 B.所含碱基不同 C.核苷酸之间连接方式不同D.所含戊糖不同 E.在细胞存在的部位不同2．mG的中文名称是（C）A.N2，N2—二甲基鸟嘌呤 B.N2，N2—二甲基鸟苷C.C2，C2—二甲基鸟苷 D.2’—甲基鸟苷 E.C2’，C2’3．DNA受热变性，下列叙述正确的是（D）A.在260nm波长处的吸光度下降 B.多核苷酸键断裂成寡核苷酸键C.碱基对可形成共价连接 D.加入互补RNA链并复性，可形成DNA-RNA杂交分子4．在一个DNA分子中，若A占摩尔比为32.8%，则G摩尔比为（C）A.67.2% B.32.8% C.17.2% D.65.6% E.16.4%5．tRNA在发挥其功能时的两个重要部位是（E）A.反密码子臂和反密码子环 B.氨基酸臂和D环 C.TΨC环和可变环D.TΨC环和反密码子环 E.氨基酸臂和反密码子环6．对于tRNA的叙述，下列哪一项是错误的？（D）A.细胞内有多种Trna B.tRNA通常由70—80个核苷酸组成C.参与蛋白质的生物合成 D.相对分子质量一般比mRNA小E.每种氨基酸都只有一种tRNA与之对应7．RNA经NaOH水解，其产物是（E）A.5’-核苷酸 B.2’-核苷酸 C.3’-核苷酸 D.2’和3’-核苷酸 E.28．对DNA片段作物理图谱分析，需要用（E）A.核酸外切酶 B.DnaseI C.DNA连接酶 D.DNA聚合酶I E.限制性内切酶9．下列哪一股RNA能够形成局部双螺旋？（B）A.AACCGACGUACACGACUGAA B.AACCGUCCAGCACUGGACGCC.GUCCAGUCCAGUCCAGUCCA D.UGGACUGGACUGGACUGGACE.AACCGUCCAAAACCGUCAAC10．Westernbootting是用于下列杂交技术中的哪一个（D）A.DNA-DNA B.RNA-RNA C.DNA-RNA D.抗体-抗原结合11．下列关于核酸结构的叙述，那一项是错误的？（B）A.在双螺旋中，碱基对形成一种近似平面的结构 B.G和C是两个氢键相连C.双螺旋中每10对碱基对可使螺旋上升一圈 D.双螺旋中大多数为右手螺旋，但也有左手螺旋E.双螺旋中碱基的连接是非共价结合12．下列几种不同碱基组成比例的DNA分子，哪一种DNA分子的Tm值最高？（A）A.A+T=15% B.G+C=25% C.G+C=40% D.A+T=80% E.G+C=35%13．单链DNA：5’—pCpGpGpTpA—3’，能与下列哪一种RNA单链分子进行杂交？（A.5-pGpCpCpTpA-3’ B.5’-pGpCpCpApU-3’ C.5’-pUpApCpCpG-3’D.5’-pTpApGpGpC-3’ E.5’-pTpUpCpCpG-314．核酶（ribozgme）的底物是（B）A.DNA

B.RNA

C.核糖体

D.细胞核膜

E.核蛋白15．有关PCR的描述下列哪项不正确:（D）A.是一种酶促反应 B.引物决定了扩增的特异性 C.扩增的产量按Y=m(1+X)nD.扩增的对象是氨基酸序列 E.扩增的对象是DNA序列16.原核生物和真核生物核糖体上都有（B）

A.18SrRNA

B.5SrRNA

C.5.8SrRNA

D.30SrRNA

E.28SrRNA

三、是非题1．生物信息的流向只能由DNA→RNA，而决不能由RNA→DNA。（×）2．在生物体内存在的DNA分子多为负超螺旋。（√）3．若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC，则另一条链的顺序为pGpApCpCpTpG。（×）4．用碱水解核酸，可以得到2’与3’-核苷酸的混合物。（5．tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要标志。（√）6．导致RNA化学性质更活泼的关键是RNA中的核糖含有2'-OH。（√）7．核酸内切酶是指能切断磷酸二酯键的核酸酶。（×）8．核苷中碱基和戊糖的连接一般为C-C糖苷键。（×）9．双链DNA在纯水中会自动变性解链。（√）10．限制性内切酶特制核酸碱基序列专一性水解酶。（√）11．DNA中碱基摩尔比规律（A=T；G=C）仅适用于双链DNA，而不适用于单链DNA。（√）12．在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先熔解分开。（×）13．RNA的局部螺旋区中，两条链之间的方向也是反向平行的。（√）14．双链DNA中，每条单链的（G+C）百分含量与双链的（G+C）百分含量相等。（√）15．不同来源DNA单链，在一定条件下能进行分子杂交是由于它们有共同的碱基组成。（×）16．DNA是生物界中唯一的遗传物质。（×）17．在体内存在的DNA都是以Watson－Crick提出的双螺旋结构形式存在的。（×）18．在一个生物体不同组织中的DNA，其碱基组成不同。（×）19．用3H-胸苷嘧啶只能标记DNA，而不能标记RNA。（√）20．多核苷酸链内共价键的断裂叫变性。（×）21．tRNA分子中含有较多的稀有碱基。（√）22．mRNA是人体细胞中RNA中含量最高的一种，因为它与遗传有关。（×）23．DNA双螺旋中A、T之间有3个氢键，G、C之间有2个氢键。（×）24．RNA的分子组成中，通常A不等于U，G不等于C。（×）25．在酸性条件下，DNA分子上的嘌呤碱基不稳定，易被水解下来。（√）四、名词解释1.分子杂交：两条来源不同但有碱基互补关系的DNA单链分子，或DNA单链分子与RNA分子，去掉变性条件后互补的区段能够退火复性形成双链DNA分子或DNA/RNA杂交双链分子的过程。2.增色效应：天然DNA分子在热变性条件下，双螺旋结构破坏，碱基暴露，在260nm波长处的吸收明显增加，此现象称为增色效应。Tm值：当50%的DNA变性时的温度称为该DNA的解链温度，即增色效应达到一半时的温度。DNA的变性与复性：DNA的变性是指核酸双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂，变成单链结构的过程。DNA复性是指变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构，其物理性质和生物活性随之恢复的过程。5.H—DNA：又称三股螺旋DNA或铰链DNA，是由部分未缠绕的复合DNA中的一个富嘧啶链，经回折同复合体中伸展的富嘌呤链间形成Hoogsteen氢键而形成的分子内三股螺旋结构，即DNA的双链所形成的三链螺旋。由于形成过程中发生C→C+的转化，故称H-DNA。常出现在基因调控区。6.超螺旋：超螺旋是指双螺旋进一步扭曲或再螺旋的构象。包括正超螺旋（变紧，过旋）和负超螺旋（变松，欠旋）。五、问答题写出cAMP，ATP，DHU，Ψ的结构式。比较DNA与RNA在结构上的异同点。DNA和RNA分子中都含有磷酸、戊糖和碱基。其中戊糖的种类不同，组成DNA的戊糖为D-2-脱氧核糖，而RNA分子中的戊糖为D-核糖；另外，在所含碱基中除共同含有A、C、G三种外，T存在于DNA中，而U出现在RNA中。两者均以单核苷酸作为基本组成单位，通过3’-5’磷酸二酯键连接成核苷酸链，所不同的是构成DNA的基本单位是dNMP，核苷酸残基的数目由几千至几千万个，而构成RNA的基本单位是NMP，核苷酸残基的数目仅有几十到几千个。另外在DNA分子中A=T，G=C，而在RNA分子中A≠它们的一级机构都是多核苷酸链中核苷酸的连接方式、数量和排列顺序。在空间结构上DNA和RNA有显著的差别。DNA分子的二级结构为双股螺旋，三级结构为超螺旋。RNA分子的二级结构是以单链为主，也有少部分卷曲或局部双螺旋结构，进而形成发夹结构。在分子中都存在着碱基互补配对关系：在DNA和RNA中都是G与C配对，并且形成3个氢键，而不同的是DNA中A与T配对，RNA中A与U配对，它们之间都形成2个氢键。DNA双螺旋结构模型的要点有哪些？此模型如何能恰当地解释DNA的生物学功能？①两条反向平行的互补多核苷酸链围绕中心轴成右手双螺旋结构。②碱基间形成氢键，使两条链相连，A=T，G≡C，碱基堆积力和氢键是维系DNA二级结构稳定的重要因素。③每10个核苷酸使螺旋上升一圈，螺距为3.4nm，螺旋直径为2nm。④磷酸和脱氧核糖构成骨架，位于螺旋外侧，碱基位于内侧，碱基平面与中心轴垂直。⑤双螺旋表面形成大小两个凹槽，分别称为大沟和小沟，二者交替出现。DNA双螺旋中两股链中碱基互补的特点，逻辑地预示了DNA复制过程是先将DNA分子中的两股链分离开，然后以每一股链为模板（亲本），通过碱基互补原则合成相应的互补链(子代)，形成两个完全相同的DNA分子,这种复制方式称为DNA的半保留复制。后来证明，半保留复制是生物体遗传信息传递的最基本方式。

生化测试五DNA的复制与修复一、填空题1．DNA复制时，连续合成的链称为前导链；不连续合成的链称为滞后链。

2．DNA合成的原料是dNTP；复制中所需要的引物是一小段RNA。

3．DNA复制时，子链DNA合成的方向是5’→3’。催化DNA链合成的酶是DNA聚合酶Ⅲ。

4．DNA复制时，亲代模板链与子代合成链的碱基配对原则是：A与T配对；G与C配对。

5．DNA的半保留复制是指复制生成两个子代DNA分子中，其中一条链是来自亲本，另有一条链是新合成的二、选择题（在备选答案中只有一个是正确的）1．DNA复制时，下列哪一种酶是不需要的？EA．DNA指导的DNA聚合酶 B．DNA连接酶 C．拓朴异构酶 D．解链酶 E．限制性内切酶2．下列关于DNA复制的叙述，哪一项是错误的？BA．半保留复制 B．两条子链均连续合成 C．合成方向5′→3′ D．以四种dNTP为原料 E．有DNA连接酶参加3．DNA复制时，模板序列5′—TAGA—3′，将合成下列哪种互补结构？AA．5′—TCTA—3′ B．5′—ATCA—3′ C．5′—UCUA—3′

D．5′—GCGA—3′ E．5′—TCTA—3′4．遗传信息传递的中心法则是：AA．DNA→RNA→蛋白质 B．RNA→DNA→蛋白质 C．蛋白质→DNA→RNA

D．DNA→蛋白质→RNA E．RNA→蛋白质→DNA5．DNA复制中的引物是：CA．由DNA为模板合成的DNA片段 B．由RNA为模板合成的RNA片段C．由DNA为模板合成的RNA片段 D．由RNA为模板合成的RNA片段E．引物仍存在于复制完成的DNA链中6．DNA复制时，子链的合成是：CA．一条链5′→3′，另一条链3′→5′ B．两条链均为3′→5′ C．两条链均为5′→3′D．两条链均为连续合成 E．两条链均为不连续合成7．冈崎片段是指：CA．DNA模板上的DNA片段 B．引物酶催化合成的RNA片段C．随从链上合成的DNA片段 D．前导链上合成的DNA片段E．由DNA连接酶合成的DNA8．合成DNA的原料是：BA．dAMPdGMPdCMPdTMP B．dATPdGTPdCTPdTTP C．dADPdGDPdCDPdTDPD．ATPGTPCTPUTP E．AMPGMPCMPUMP9．逆转录过程中需要的酶是：EA．DNA指导的DNA聚合酶 B．核酸酶 C．RNA指导的RNA聚合酶D．DNA指导的RNA聚合酶 E．RNA指导的DNA聚合酶10.逆转录酶是一类：CA.DNA指导的DNA聚合酶 B.DNA指导的RNA聚合酶C.RNA指导的DNA聚合酶 D.RNA指导的RNA聚合酶11.大肠杆菌有三种DNA聚合酶，其中参予DNA损伤修复的是BA.DNA聚合酶ⅠB.DNA聚合酶ⅡC.DNA聚合酶Ⅲ12.DNA复制需要：(1)DNA聚合酶Ⅲ；(2)解链蛋白；(3)DNA聚合酶Ⅰ；(4)DNA指导的RNA聚合酶；(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是：DA.(4)(3)(1)(2)(5)B.(4)(2)(1)(3)(5)C.(2)(3)(4)(1)(5)D.(2)(4)(1)(3)(5)13.下列有关大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的描述哪个是不正确的？BA.其功能之一是切掉RNA引物，并填补其留下的空隙 B.是唯一参与大肠杆菌DNA复制的聚合酶C.具有3'→5'核酸外切酶活力 D.具有5'→3'核酸外切酶活力14.1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制？CA.DNA能被复制 B.DNA的基因可以被转录为mRNAC.DNA的半保留复制机制 D.DNA全保留复制机制三、名词解释；1.中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译的过程，以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA自我复制（如烟草花叶病毒等）和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程（某些致癌病毒）是对中心法则的补充。2.半保留复制：DNA复制的一种方式。每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。3.冈崎片段：在DNA滞后链的不连续合成期间先生成的约1000bp的短片段，然后由连接酶连接成完整的子链。四、问答题：1.

为什么说DNA的复制是半保留半不连续复制？试讨论之。2.

DNA复制的高度准确性是通过什么来实现的？维持DNA复制的高度准确性的机制主要包括：（1）DNA聚合酶的高度选择性。（2）DNA聚合酶所具有的3’→5

生化测试六转录一、填空题1.真核生物mRNA转录后的成熟步骤主要包括5’加帽、3’加polyA尾巴、剪接、内部甲基化、编辑2.真核生物mRNA的5'末端有一个帽子结构是m7GpppNP，3'末端有一个尾巴是（AAA）n/polyA3.mRNA前体5/加帽过程中甲基的供体是S酰苷蛋氨酸。4.DNA上某段碱基顺序为5/-ACTAGTCAG-3/，转录后的mRNA上相应的碱基顺序是–ACUAGUCAG-。5.DNA指导的RNA聚合酶由数个亚单位组成，其核心酶的组成是α2ββ＇。6.简单终止子的结构特点为：回文序列特征可形成发夹结构、发夹结构富含GC、发夹结构末端是一连串U。7.mRNA前体5/加帽的功能是防止降解和翻译启始识别位点。8.真核生物的结构基因根据其特点也称为断裂基因，包括内含子和外显子。9.通过逆转录作用生成的DNA称为cDNA。10.tRNA的转录后加工包括在3/加上CCA序列。二、多项或单项选择题1.真核细胞mRNA的加工修饰不包括:（A）A.除去非结构信息部分B.在mRNA的3'末端加polyA尾巴C.经过较多的甲基化过程D.在mRNA的5'末端形成帽子结构E.mRNA由核内不均一RNA转变而来2.逆转录酶催化（A）A.以RNA为模板的DNA合成B.以DNA为模板的RNA合成C.以mRNA为模板的蛋白质合成D.以DNA为模板的DNA合成E.以RNA为模板的RNA合成3.含修饰核苷酸最多的RNA是（B）A.rRNAB.tRNAC.mRNAD.5SrRNAE.hnRNA4.RNA生物合成中包括下列哪种结合（B）A.DNA聚合酶与DNA结合B.RNA聚合酶与DNA结合C.Sigma因子与RNA结合D.解链蛋白与RNA结合E.起动因子与DNA聚合酶结合5.下列有关mRNA的论述何者是正确的（B）A.mRNA是基因表达的最终产物B.mRNA遗传密码的方向是5ˊ→3ˊC.mRNA密码子与tRNA反密码子通过A…T，G…C配对结合D.每分子mRNA有三个终止密码子6.冬虫夏草素是阻止mRNA前体加工成熟过程中的（B）A.5/加帽B.3/加polyAC.拼接D.甲基化7.真核生物RNA聚合酶II完成下列基因的转录（C）A.rRNA编码基因B.tRNA编码基因C.mRNA编码基因D.5StRNA编码基因

8.原核生物基因转录的启动子一般包括以下组分（ACE）

A.起始子B.增强子C.-10序列D.基因内启动子E.-35序列

9.基因表达式的顺式作用元件包括以下成分:（A）

A.启动子B.结构基因C.RNA聚合酶D.转录因子

10.端粒酶是属于（B）

A.限制性内切酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.肽酰转移酶

11.真核生物mRNA帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，其方式是：（D）A.2'－5’B.3’－5’C.3’－3’D.5’－5’12.反转录酶除了有以RNA为模板生成RNA－DNA杂交分子的功能外，还有下列活性（C）A.DNA聚合酶和RNaseAB.DNA聚合酶和S1核酸酶C.DNA聚合酶和RNaseHD.S1核酸酶和RNaseH13．嘌吟霉素的作用是（D）A.抑制DNA合成B.抑制RNA合成C.抑制蛋白质合成的延伸D.抑制蛋白质合成的终止14．DNA分子上被依赖于DNA的RNA聚合酶特异识别的顺式元件是（C）A.弱化子B.操纵子C.启动子D.终止子15.真核生物RNA聚合酶的抑制剂是（D）A.利福霉素B.放线菌素C.利链霉素D.a鹅膏蕈碱三、是非题1.DNA复制与转录相同点在于都是以双链DNA为模板，以半保留方式进行，最后形成链状产物。（×）2.基因表达的最终产物都是蛋白质。（×）3.RNA病毒不含DNA基因组，根据中心法则它必须先进行反转录，才能复制和增殖。（×）4.DNA拓扑异构酶I的作用与DNA复制有关，拓扑异构酶II与基因转录有关。（×）5.基因转录的调节涉及蛋白质因子与DNA调控序列，以及蛋白质因子之间的相互作用。（√）6.转录酶又称为依赖DNA的RNA聚合酶。（√）7.转录的模板链也称为正链。（×）8.RNA聚合酶所催化的反应需要引物。（×）9.RNA聚合酶依赖其σ亚基实现对RNA链的特异结合。（√）10.利福平是RNA合成起始时β因子活性的抑制剂，因此利福平可以抑制转录起始。（√）11.通过选择性拼接、编辑和再编码，一个基因可以产生多种蛋白质。（√）四、名词解释1.转录后加工：在转录中新合成的RNA往往是较大的前体分子，需要经过进一步的加工修饰，才转变为具有生物学活性的、成熟的RNA分子，这一过程称为转录后加工。主要包括剪接、剪切和化学修饰等。2.转录因子：是起正调控作用的反式作用因子。转录因子是转录起始过程中RNA聚合酶所需的辅助因子。真核生物基因在无转录因子时处于不表达状态，RNA聚合酶自身无法启动基因转录，只有当转录因子(蛋白质)结合在其识别的DNA序列上后，基因才开始表达。3.外显子：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。4.套索RNA：真核生物中的初级转录产物hnRNA在去除内含子时，剪接体使内含子区段弯曲成套索状，称为套索RNA，由此相邻外显子可相互靠近并发生转酯反应连接起来。5.启动子：指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。6.反转录：以RNA为模板合成DNA，这与通常转录过程中遗传信息从DNA到RNA的方向相反，故称为反（逆）转录作用。7.同源体：一个基因的转录产物在不同的发育阶段、分化细胞和生理状态下，通过不同的拼接方式，可以得到不同的mRNA和翻译产物，所产生的多个蛋白质称为同源体。8.hnRNA：称为核内不均一RNA，是在真核生物mRNA成熟前的各中间阶段形成的不稳定、大小不均的一组高分子RNA的总称。这些hnRNA还要在细胞核内进行首尾修饰、切除内含子拼接外显子等加工过程之后才能形成成熟的mRNA作为蛋白质合成的模板。9.抗终止：在基因转录中，有些终止子的作用可被特异的因子所阻止，使酶越过终止子继续转录，这种作用称为抗终止。五、问答题hnRNA的转录后加工包括哪些主要步骤，各有何意义？(1)在5’末端加上“帽子”结构—m7GpppNP，已知对mRNA5’末端的稳定和对mRNA上翻译起点的识别与结合有利。(2)在3’末端加上polyA的“尾巴”，已知是mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式，同时对mRNA3’末端的稳定性有利。(3)mRNA的剪接，除去内含子，把外显子连接起来，才能形成成熟的RNA分子。内部甲基化，可能对mRNA的加工起识别作用。(3)mRNA的编辑，包括U的插入或切除，C、A、G的插入和CU，UC，嘌呤霉素和链霉素，利福霉素和放线菌素D分别抑制蛋白质和RNA的生物合成，它们各自的作用特点如何？嘌呤霉素：分子结构与氨酰-tRNA3’链霉素：能与核糖体30S亚基上的蛋白质结合，引起核糖体构象发生改变，使氨酰-tRNA与mRNA上的密码子不能正确地结合，引起翻译错误。利福霉素：能结合在细菌RNA聚合酶β亚基上，而对此酶发生强烈的抑制作用。它抑制RNA合成的起始而不抑制其延长。放线菌素D：可与DNA的鸟嘌呤之间形成特殊的氢键结合，因而抑制DNA作为转录模板的功能。已知DNA的序列为:

W:5'-AGCTGGTCAATGAACTGGCGTTAACGTTAAACGTTTCCCAG-3'C:3'-TCGACCAGTTACTTGACCGCAATTGCAATTTGCAAAGGGTC-5'---------------------------------------->上链和下链分别用W和C表示,箭头表明DNA复制时,复制叉移动方向.试问:

A.哪条链是合成后滞链的模板?

B.试管中存在单链W,要合成新的C链,需要加入哪些成分?

C.如果需要合成的C链中要被32P标记,核苷酸中的哪一个磷酸基团应带有32P?

D.如果箭头表明DNA的转录方向,哪一条链是RNA的合成模板?A.WB.引物CTGGGAAACG，dATP、dGTP、dCTP、dTTP，TaqDNA聚合酶，Mg2+。C.γ磷酸基团D.C链4.如果下面的DNA双链从右向左进行转录，问①哪条是有义链？②产生什么样的mRNA顺序？③mRNA顺序和DNA的反义链顺序之间的信息关系是怎样的？_______5′-A-T-T-C-G-C-A-G-G-C-T-3′链1_______3′-T-A-A-G-C-G-T-C-C-G-A-5′链2←---------转录方向---------------（1）链2是有义链（2）5'

AGCCUGCGAAU

3'（3）碱基互补关系

生化测试题七翻译一、填空题1.在反密码子与密码子的相互作用中，反密码子IGA可识别的密码子有UCU、UCC和UCA。2.如果GGC是mRNA(5ˋ→3ˋ方向)中的密码子，其tRNA的反密码子(5ˋ→3ˋ方向)是GCC。3.E.Coli合成的所有未修饰的多肽链，其N端应是甲酰甲硫氨酸（哪种氨基酸）。4.在遗传密码词典中只有一种密码子编码的氨基酸是Met和Trp。5.起始密码子是AUG，终止密码子是UAA、UAG和UGA。6.在原核生物蛋白质合成中，第一个氨基酸是甲酰甲硫氨酸，而在真核生物蛋白质合成中第一个氨基酸是甲硫氨酸。7.密码子的变偶性发生在密码子的第3位碱基。8.原核生物肽链合成起始复合体由mRNAfMet-tRNAfMet和70s核糖体组成。9.肽链延伸包括进位、肽键形成和移位三个步骤。10.核蛋白体的P位是肽酰tRNA的部位，A位是氨酰tRNA的部位。11.蛋白质生物合成的第一步是氨基酸的活化。12.请写出下列物质的活化形式：G（葡萄糖）—UDPG，脂肪酸—脂酰CoA，氨基酸—氨酰tRNA。二、多项或单项选择题1.反密码子是位于（D）A.DNA B.mRNA C.rRNA D.tRNA E.多肽链2.下面哪些因素可防止DNA上的一个点突变表现在蛋白质的一级结构（ABC）A.DNA的修复作用 B.密码的简并性 C.校正tRNA的作用D.核糖体对mRNA的校正 E.以上都正确3.氨基酸活化酶（C）A.活化氨基酸的氨基 B.利用GTP作为活化氨基酸的能量来源C.催化在tRNA的5’磷酸与相应氨基酸间形成酯键D.每一种酶特异地作用于一种氨基酸及相应的tRNA4.在蛋白质合成中不消耗高能磷酸键的步骤是（C）A.移位 B.氨基酸活化 C.肽键的形成 D.氨基酰-tRNA进入A位点5.下列参与原核生物肽链延伸的因子是（D）A.IF-1B.IF-2C.IF-3D.EF-TuE.RF-16.下列有关真核生物肽链合成启动的论述，哪一项是正确的（C）A.只需ATP提供能量B.只需GTP提供能量C.同时需ATP和GTP提供能量D.30S亚基与mRNA结合E.50S亚基与30S亚基结合7.冬虫夏草素是阻止mRNA前体加工成熟过程中的（B）A.5/加帽B.3/加polyAC.拼接D.甲基化8.白喉毒素能够抑制真核生物细胞质的蛋白质合成，是因为它抑制了蛋白质合成的哪个阶段？（D）A.氨基酸的活化B.起始C.氨酰tRNA的进位D.移位反应三、是非题1.肽链合成时，延伸方向是从N端到C端。（×）2.5'...GAAGCAUGGCUUCUAACUUU...3'序列接近3'端的UAA并不引起肽链合成的终止。（√）3.蛋白质生物合成时氨基酸的氨基先要活化。（×）4.密码子的不重叠性决定了生物体不存在重叠基因。（×）5.氨酰tRNA合成酶既能识别氨基酸，又能识别tRNA，使他们特异结合。（√）6.肽酰tRNA结合在核蛋白体A位，氨酰tRNA结合在P位。（×）7.原核生物一个mRNA分子只含有一条多肽链的信息。（×）8.在蛋白质生物合成中，所有的氨酰tRNA都是首先进入核糖体的A部位。（×）四、名词解释1.密码子：mRNA上每3个相邻的核苷酸编码蛋白质多肽链中的一个氨基酸，这三个核苷酸就称为一个密码子或三联体密码。2.密码子的简并性：由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为密码子的简并性，密码子的简并性可以减少有害突变。五、问答题1.已知一种突变的噬菌体蛋白是由于单个核苷酸插入引起的移码突变的，将正常的蛋白质和突变体蛋白质用胰蛋白酶消化后进行指纹图分析。结果发现只有一个肽段的差异，测得其基酸顺序如下：正常肽段Met-Val-Cys-Val-Arg突变体肽段Met-Ala-Met-Arg(1)指出此肽段在该蛋白质分子中的位置.（2）什么样的突变（什么核苷酸插入到什么地方）导致了氨基酸顺序的改变？（3）推导出编码正常肽段和突变体肽段的核苷酸序列.（10分）提示：有关氨基酸的简并码ValGUUGUCGUAGUGCysUGUUGCArgCGUCGCCGACGGAGAAGGAlaGCUGCCGCACGC1）此肽段在该蛋白质分子的C末端。2）UMP插入到正常肽段Met-Val-Cys-Val-Arg的第一个Val密码子的前两个碱基之间。3）正常肽段核苷酸序列：AUGGUAUGCGUUAGA/G突变体肽段核苷酸序列：AUGGCUAUGCGUUAGA/G2.何谓遗传密码？它有哪些特点？DNA（或mRNA）中的核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系称为遗传密码。遗传密码具有以下基本特点：1）每个密码子三联体决定一种氨基酸。2)两种密码子之间无任何核苷酸或其它成分加以分离，即密码子无逗号。3)密码子具有方向性。4)密码子有简并性，一种氨基酸有几个密码子，或者几个密码子代表一种氨基酸的现象称为密码子的简并性。除了Met和Trp只有一个密码子外，其它氨基酸均有二个以上密码子。5)共有64个密码子，其中AUG不仅是Met或者fMet(在原核细胞)的密码子，也是肽链合成的起始信号，故称AUG为起始密码子。UAA、UAG和UGA为终止密码子，不代表任何氨基酸，也称为无意义密码子。6)密码子有通用性，即不论是病毒、原核生物还是真核生物密码子的含义都是相同的。但真核细胞线粒体mRNA中的密码子与胞浆中mRNA的密码子有以下三点不同：一是线粒体中UGA不代表终止密码子，而是编码Trp；二是肽链内的Met由AUG和AUA二个密码子编码，起始部位的Met由AUG、AUA、AUU和AGG均为密码；三是AGA和AGG不是Arg的密码子，而是终止密码子，即UAA、UAG、AGA和AGG均为终止密码子。3.请分别指出DNA复制、RNA合成、蛋白质合成三个过程的忠实性是如何保持的？请分别指出DNA复制、RNA合成、蛋白质合成三个过程的忠实性是如何保持的？在DNA复制中保持其忠实性的因素主要包括：（1）DNA聚合酶的高度选择性。（2）DNA聚合酶所具有的3’→5在转录过程中，RNA合成酶是严格以DNA为模板进行作用的，并且在转录过程中有各种因子参与作用，以保证其准确性。保证翻译忠实性的关键有两方面因素：一是氨基酸与tRNA的特异结合，依靠氨酰-tRNA合成酶的特异识别作用实现；二是密码子与反密码子依靠碱基互补配对的特异结合实现，也有赖于核糖体的正确构象。真核生物蛋白质合成后，还需要进行哪些加工修饰？蛋白质加工修饰方式主要有一下几个方面：（1）水解剪切①N端（甲酰）甲硫氨酸的切除。②切除信号肽。③切除蛋白质前体中不必要的肽段。（2）氨基酸侧链的修饰（如甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化等）。（3）二硫键的形成（链内、链间）。（4）加辅基。（5）蛋白质的折叠。

生化测试八生物氧化与氧化磷酸化一、填空题1.真核细胞的呼吸链主要存在于线粒体内膜，而原核细胞的呼吸链存在于细胞膜。2.呼吸链上流动的电子载体包括CoQ和cytC。3.内膜上能够产生跨膜的质子梯度的复合体是复合体Ⅰ、复合体Ⅲ和复合体Ⅳ。4.复合体的主要成分是Cytb、Fe-S蛋白和Cytc1。5.P/O值是指氧化磷酸化过程中，每消耗1mol氧原子所消耗无机磷酸的摩尔数，NADH的P/O值是3，OAA的P/O值是0，还原性细胞色素C的P/O值是1，在DNP存在的情况下，琥珀酸的P/O值是0。6.氰化物使人中毒的机理是氰化物阻断了电子从cytaa3向O2的传递，从而抑制了ATP（能量）的生成。7.在长期的进化过程中，复合体Ⅳ已具备同时将4个电子交给一分子氧气的机制。8.生热素的生理功能是在棕色脂肪组织里作为天然的解偶联剂产热。9.在呼吸链上细胞色素C1的前一个成分是细胞色素b，后一个成分是细胞色素c。10.除了含有Fe以外，复合体Ⅳ还含有金属原子Cu。11.解释氧化磷酸化机制的学说主要有结构偶联、构象偶联和化学渗透三种，基本正确的学说为化学渗透。12.给小白鼠注射FCCP，会导致小白鼠体温的迅速升高，这是因为FCCP作为解偶联剂使质子梯度不能形成，自由能转变成热能。13.线粒体呼吸链中电位跨度最大的一步是在细胞色素aa3→O2。14.F1/F0—ATP合成酶被称为最小的分子马达。15.代谢物在细胞内的生物氧化与体外燃烧的主要区别是在细胞内进行、条件温和和酶催化。16.生物氧化主要通过代谢物脱氢反应实现的，生物氧化产生的H2O是通过反应物脱下的氢通过电子传递链与氧结合产生H2O形成的。17.典型的呼吸链包括NADH呼吸链和FADH2呼吸链两种，这是根据接受代谢物脱下的氢的初始受体不同而区别的。18.填写电子传递链中阻断电子流的特异性抑制剂：NAD→FAD→CoQ→Cytb→Cytc1→Cytc→Cytaa3→O2、19.化学渗透学说主要论点认为：呼吸链组分定位于线粒体内膜上。其递氢体有质子泵作用，因而造成内膜两侧的质子浓度差，同时被膜上ATP合成酶所利用，促使ADP＋Pi→ATP。20.呼吸链中氧化磷酸化生成ATP的偶联部位是复合体Ⅰ、复合体Ⅲ和复合体Ⅳ。21.体内CO2的生成不是碳与氧的直接结合，而是通过有机物的脱羧基反应。22.线粒体内膜外侧的α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是NAD；线粒体内膜内侧的α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是FAD。23.动物体内高能磷酸化合物的生成方式有氧化磷酸化和底物水平磷酸化两种。24.NADPH大部分在磷酸戊糖途径中生成，主要用于合成代谢，但也可以在脱氢酶酶的催化下把氢转给NAD+，进入呼吸链。25.呼吸链电子传递速度受ADP浓度控制的现象称为呼吸控制。26.Ph8.0时ATP带负电荷。27.能荷的公式为[ATP]+1/2[ADP]/[ATP]+[ADP]+[AMP]。28.生物体中产能最多的生化反应过程是三羧酸循环。29.偶联化学反应各反应的自由能变化是可以加和的。30.含有ADP成分的辅酶有FAD、NAD和CoA。31.EMP途径产生的NADH•H＋必须依靠磷酸甘油穿梭系统或苹果酸天冬氨酸穿梭系统才能进入线粒体，分别转变为线粒体中的FADH2和NADH。二、选择题在生物化学反应中，总能量变化符合下列哪一项？（E）A.受反应的能障影响 B.因辅助因子而改变C.和反应物的浓度成正比D.在反应平衡时最明显 E.与反应机制无关2.哺乳动物肌肉中能量的主要储存形式是（E）A.ADPB.PEPC.cAMPD.ATPE.磷酸肌酸3.如果将琥珀酸（延胡索酸/琥珀酸氧