实验室生物安全管理课件

实验室生物安全管理

实验室生物安全管理

1内容绪论国内实验室生物安全相关法律、法规生物安全实验室的管理和实验室安全操作技术菌（毒）种管理

医疗废弃物的管理

内容绪论2一、绪论（1）微生物实验室是开展微生物检验活动的特别场所，而且是很独特的工作环境，具有使工作其中或其附近的人们感染相关传染病的危险。1941年Meyer和Eddie发表了对美国74例受布鲁氏菌病感染的实验室工作人员的调查情况，结论是：对培养物、标本的操作及吸入含有布鲁氏杆菌的灰尘对实验室工作人员是极其危险的。多数病例是由在处理传染性材料时不小心或技术欠佳引起的。一、绪论（1）微生物实验室是开展微生物3一、绪论（2）1949年，Sulkin和Pike发表了第一篇关于实验室感染的系列调查报告，总结了222个病毒感染病例，其中21例死亡。至少三分之一的病例感染的可能与操作已感染的动物和组织有关。1951年Sulkin和Pike对5000名实验室工作人员进行了问卷调查，发表了第二篇系列调查报告，在发病的1342个病例中，只有三分之一在文章进行了分析报告。在所有报告的实验室感染中，布鲁氏杆菌病病例最多，连同结核病、兔热病、伤寒病和链球菌感染占总细菌感染病例数的72％，占总感染病例数的31％，全部病例数的平均病死率是3％。16％与已知的意外事故有关，主要是嘴吸吸管、针头和注射器的使用不当。1965年对这一调查重新做了修订，增加了641例新的或以前没有报告的病例。1976年再次修订，共搜集3921例病例。其中布鲁氏杆疾病、伤寒、兔热病、肺结核、肝炎和委内瑞拉马脑炎是最多见的病例，与已知意外事故有关的病例不到20％。那些在工作中接触病原体感染的病例中，80％以上的感染怀疑与暴露在含有传染因子的气溶胶有关。一、绪论（2）1949年，Sulkin和Pike发表了第4一、绪论（3）1967年Hanson等报告了428例明显与实验室相关的虫媒病毒感染。原因实验人员无意中受感染所致。最常见的传播途径是暴露于传染性气溶胶。1974年Skinholj发表的调查报告的结果显示，丹麦的临床化验室工作人员肝炎的感染率（2～3/1000），比正常人群高7倍。以上报告显示实验室工作人员发生相关病原体感染的危险性在增加，与正常人群相比实验室工作人员染患肺结核、痢疾和肝炎的几率较高。一、绪论（3）1967年Hanson等报告了428例明显5二、国内实验室生物安全相关法律、法规（1）人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法（2006年7月10日卫生部部务会议通过2006年8月15日卫生部令第50号发布自发布之日起施行）病原微生物实验室生物安全环境管理办法（2006年3月2日国家环保总局2006年第二次局务会议通过2006年3月8日国家环保总局第32号公布自2006年5月1日起施行）人间传染的病原微生物名录（2006年1月11日卫科教发［2006］15号）可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定（2005年11月24日卫生部部务会议通过2005年12月28日卫生部令45号发布自2006年2月1日起施行）病原微生物实验室生物安全管理条例（2004年11月5日国务院第69次常务会议通过2004年11月12日国务院令第424号公布自公布之日起施行）二、国内实验室生物安全相关法律、法规（1）人间传染的高致病性6二、国内实验室生物安全相关法律、法规（2）医疗废物管理行政处罚办法（2004年5月27日卫生部、环保总局令第21号公布自2004年6月1日起施行）卫生部、劳动和社会保障部“关于保障接触病毒或细菌科研人员医疗服务有关问题的通知”（2004年5月9日卫医发［2004］144号）医疗废物集中处置技术规范（2003年12月26日环发［2003］206号）医疗废物专用包装物、容器标准和警示标示规定（2003年11月20日环发［2003］188号）医疗卫生机构医疗废物管理办法（2003年8月14日卫生部部务会议通过2003年10月15日卫生部令地6号发布自发布之日起施行）医疗废物分类目录（2003年10月10日卫医发［2003］287号）医疗废物管理条例（2003年6月4日国务院第十次常务会议通过2003年6月16日国务院令第380号公布自公布之日起施行）二、国内实验室生物安全相关法律、法规（2）医疗废物管理行政处7三、生物安全实验室的管理和安全操作技术（1）

（一）、微生物危害程度分级1、我国规定病原微生物分类：在我国的《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《人间传染病原微生物名录》中，根据病原微生物的传染性、感染后对个体或群体的危害程度，将病原微生物分为4类：第一类：是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类：是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类：是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且有效治疗和预防措施的微生物。第四类：是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。三、生物安全实验室的管理和安全操作技术（1）（一）、微生物82、有害微生物的分类类别危害程度代表性微生物1高度危害性霍乱弧菌鼠疫耶尔森菌2中度危害性肉毒梭菌、假单胞菌、葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、李斯特菌、铜绿色假单胞菌、产气荚膜梭菌。3低度危害性黄曲霉4微度危害性无2、有害微生物的分类类别危害程度代表性微生物1高度危害性9中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别大量活菌操作样本检测非感染性材料的实验A/BUN编号粘质沙雷菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1志贺菌属第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1金黄色葡萄球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1表皮葡萄球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1念珠状链球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1肺炎链球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1化脓链球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1链球菌属第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1猪链球菌第三类BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1奇异变形菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-13、人间传染病源微生物名录摘录表中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别10中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别大量活菌操作样本检测非感染性材料的实验A/BUN编号普通变形菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1铜绿假单胞菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1霍乱弧菌第二类AUN2814BSL-2BSL-2BSL-1甲、乙、丙型副伤寒沙门菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1伤寒沙门菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1鼠伤寒沙门菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1产气肠杆菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1致病性大肠埃希氏菌第三类BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1肺炎克雷伯菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1嗜肺军团菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别114、世界卫生组织的规定

世界卫生组织规定的评价标准和等级划分与我国的规定基本一致，但危害程度由1级至4级递减，即1级危害度最低，4级危害度最高。4、世界卫生组织的规定

世界卫生组织规定的评价标准和等级划分12（二）、生物安全实验室分类、分级和技术指标

1、生物安全实验室的分类生物安全实验室可分为一般生物安全防护实验室和试验脊椎动物生物安全防护实验室两类。2、生物安全实验室的分级每类生物安全防护实验室根据实验室操作技术、安全设备和实验设施组合的不同而分为四级生物安全水平。即BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4。BSL-1和BSL-2实验室称为基础实验室，BSL-3称为生物安全防护实验室，BSL-4称为高度生物安全实验室。（二）、生物安全实验室分类、分级和技术指标1、生物安全实13生物安全实验室的适用微生物范围：

1、一级生物安全防护实验室（BSL-1）：结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。2、二级生物安全防护实验室（BSL-2）：适用于对人和环境具有中等潜在危险的微生物3、三级身亡安全防护实验室（BSL-3）：适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。艾滋病病毒的研究（血清学试验除外）应在三级生物安全防护实验室中进行。4、四级生物安全防护实验室（BSL-4）：适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。不明微生物，也必须在四级生物安全防护实验室中进行。生物安全实验室的适用微生物范围：1、一级生物安全防护实验143、生物安全实验室的技术指标名称洁净度级别最小换气次数与又室内向室外方向上相邻相同房间的最小负压差(Pa)温度℃相对湿度%噪声.

dB(A)最低照度Ix一级二级三级四级——7或87或8可开窗可开窗15或1215或12——-10-1018～2818～2718～2518～24≤7030～7030～6030～60≤60≤60≤60≤603003005005003、生物安全实验室的技术指标名称洁净度级别最小换气次数与又室15三）生物安全柜的选择和使用

生物安全柜的种类Ⅰ级生物安全柜Ⅱ级A型生物安全柜Ⅱ级B型生物安全柜Ⅲ级生物安全柜生物安全柜的摆放远离实验室门口，空调出风口，减少外部其他气流的干扰；三）生物安全柜的选择和使用生物安全柜的种类16生物安全柜操作的注意事项可产生气溶胶的设备（例如混匀器、离心机等）应靠近安全柜的后部放置；有生物危害性的废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品，应该放在安全柜内的某一侧；将工作区域内的污染物质与洁净物质分开放置，在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行；耐高压灭菌的生物危害性废弃物袋以及吸管盛放盘不应放在安全柜的外面，否则在使用这些物品时双臂就必须频繁进出安全柜，这样会干扰安全柜空气屏障的完整性，从而影响对人员和物品的防护；不要过载；在操作过程中，如果有物质溢出或液体溅出，在将物品移出安全柜前，一定要对其表面进行消毒，实验结束对安全柜内表面全部消毒；生物安全柜操作的注意事项可产生气溶胶的设备（例如混匀器、离心17（四）、实验室感染80%是不明原因的感染。20%感染的原因是明确的。80%是由工作人员操作失误引起的；20%是由设备故障引起的。导致感染最多的4种实验室事故溢出和泼洒针头和注射器锐器、碎玻璃动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤（四）、实验室感染80%是不明原因的感染。181、感染因子的种类：1含有感染因子气溶胶吸入2锐器针头和注射器、锐器、碎玻璃等刺伤3接触溢出和泼洒的感染因子4染菌动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤1、感染因子的种类：1含有感染因子气溶胶吸入192、感染途径：呼吸道、消化道、血液和皮肤接触等2、感染途径：呼吸道、消化道、血液和皮肤接触等203、实验室感染的原因除与实验室建筑、设置、制度、人员素质、清洁、消毒等有关外，检验标本含有大量的、种类繁多的隐匿病原体。检验操作时形成气溶胶检验器材、仪器和环境等被污染一些偶然事故也会造成实验室人员感染工作人员易感性免疫力低下微生物大量侵入3、实验室感染的原因除与实验室建筑、设置、制度、人员素质、清214、实验室感染的预防一般防护禁止非工作人员进入实验室实验操作必须穿工作服，手有伤口时戴手套试验区域内禁止饮食、吸烟、化妆、储存食物等制定实验室生物安全程序移液禁止口吸实验室经常保持清洁严格锐器管理，防止利器损伤所以培养物、废弃物在运出实验室之前必须高压灭菌有效的防鼠防虫措施必要的预防接种特殊防护不同微生物在相应实验室的生物安全设备中操作4、实验室感染的预防一般防护22（五）、实验室生物安全管理

1、成立生物安全委员会生物安全委员会主任由单位法人担任生物安全委员会的主要职责保证生物安全制度管理制度监督有关法规和操作规程的执行决定进入生物安全实验室的工作人员（五）、实验室生物安全管理1、成立生物安全委员会232、生物安全实验室的管理（1）生物安全实验室入口处必须张贴生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、实验室负责人和相关负责人姓名和电话。生物危险标志的颜色应为黑色，背景为黄色。（2）生物安全实验室的准人制度外来进修、学习和参观人员必须学习实验室的一切规章制度和有关操作规程，并经实验室之人批准，（3）实验室主任为该实验室的第一生物安全责任人，有权决定参加实验的人员数量和开展实验的种类。（4）每次进入实验室必须填写工作日志，并严格遵守实验室的一切操作规程。（5）加班工作必须事先征得实验室主任同意并通知安全员尽量避免单独工作，以减少偶然事件发生的危险性。2、生物安全实验室的管理24

3、实验室人员管理（1）实验室负责人的职责组织实验室的各项工作，保证实验室运行的安全和实验室工作质量的准确可靠组织对新工作人员的培训，对培训的结果进行考核，包括实验室安全知识和实验室操作技术考核，以决定工作人员进入实验室控制区域工作的资格。定期检查实验室的各项技术参数，组织对实验室装备的常规保养在实验室内发生事故或紧急情况时，决定并采取紧急处置措施，并报告上级。实验室负责人由高级职称的人员承担，必须具有如下资质：具有强毒微生物实际工作经验对所操作的病因微生物有全面、完整的了解具有组织实验室工作的能力对工作有高度责任心3、实验室人员管理25（2）实验室工作人员的一般行为规范生物安全实验室为专用实验室，只允许进行实验目的的规定操作，与此无关的活动一律不得进行。必须按规定着装，方可进入实验室控制区实验室内禁止吸烟、饮食、访客和喧哗保持实验室环境的整洁，每项工作完成之后，必须清洁台面，恢复实验室的待运转状态。注意个人的健康状况，出现身体不适情况，应及时向负责人报告（2）实验室工作人员的一般行为规范26（3）实验室工作人员的技术要求必须了解实验室的安全原理，熟悉安全手册的各项规定，收集紧急情况下的正确应对措施。必须熟悉微生物学技术和感染性病原菌的知识，正确、安全地使用菌毒株，避免污染，已获得准确可靠的实验结果。必须熟悉所研究疾病的国家标准，能够完成标准所规定的任务。（3）实验室工作人员的技术要求27（4）实验室工作人员的培训新工作人员必须经过培训，方可取得进入实验室控制区域工作的资格。培训由实验室组织进行，由负责人指定熟悉实验室工作的人员担任辅导。培训内容包括：阅读并理解微生物操作规程以及安全手册 实验室各种设备的使用方法着装方法微生物学基本技术及无菌操作方法实验室清洁及消毒方法（4）实验室工作人员的培训28（5）实验室工作人员的资格考试新工作人员经过培训后，由实验室负责人组织考试。包括口试、笔试与实际操作考核。通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作三个月，才能获得进行强毒微生物操作的正式资格。（5）实验室工作人员的资格考试29（6）实验室工作人员的适合工作状态实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室的控制区域工作。出现下列情况不应进入上述区域：身体出现开放性损伤患发热性疾病、感冒、上呼吸道感染、或其他导致抵抗力下降的情况妊娠六个月以上已经在控制区域连续工作4个小时以上，或其他原因造成的疲劳状态（6）实验室工作人员的适合工作状态304、实验室仪器设备管理仪器设备作业指导书仪器设备维护保养仪器设备使用记录包括仪器使用前后状况、使用时间、使用人、使用日期等仪器设备的维修送修前的消毒仪器设备的鉴定专业机构4、实验室仪器设备管理31（六）样本的采集运输和接收1、标本采集人员的防护（1）所有采集标本的操作要戴手套，穿工作外套、口罩、甚至护目镜。（2）所有标本容器必须防漏，运送也应装入密封防漏的塑料袋中，袋上附有一表格用于填写日期、时间、姓名之用。（3）决不能将针头暴露的注射器送到实验室。应将注射器中的标本注入无菌试管中。或采用防护手段取掉针头，再盖上注射器并放入密封防漏的塑料袋中送检。（4）不得将装有标本的破损容器送往实验室，也不能对其进一步处理。应该及时向医生通报容器渗漏，解释如果留用标本，会带来的潜在危害性并要求重新送检。如果新标本送来，则将泄漏的标本高温高压处理后再废弃掉。（5）采集标本污染器材的处理对所有采集标本的污染器材均应按照《实验室废物处理制度》进行处理。（六）样本的采集运输和接收1、标本采集人员的防护322、生物标本运送、接收安全要求生物危险材料不仅包括来自病菌人的各种标本，而且包括来自生物医学实验室的各种材料，这些来自人体的标本和来自实验室的材料都可能含有传染性病原体或其毒素，为保障对环境、对人体的安全，保障原体不向外扩散，做到安全运输和安全接受标本和材料，在整个实施过程中必须遵守如下操作规则。2、生物标本运送、接收安全要求333、生物危险材料的运输（1）运输器材：运输生物危险材料必须使用专业专用的器材，以防止造成传染性物质和有毒有害物质扩散。经常使用的工具有计划免疫专用冷藏包、冷藏箱和大小不等的冰瓶（广口保温瓶）。无论是冷藏包还是冷藏箱，在使用时一般都必须带冰排，而冰瓶在使用时常常放入冰块或碎冰。由于冷藏包和冷藏箱是通过箱壁的泡沫保温，所以运输过程中不怕磕碰；而对于冰瓶来说，由于它是通过双层玻璃抽真空保温，玻璃易碎，所以运输过程中需轻拿轻放。3、生物危险材料的运输（1）运输器材：运输生物危险材料必34（2）包装传染性物品的方法：在运输生物危险材料之前必须进行适当的检查和准备工作。首先要认真检查所运输的材料是否已经装好，如检查瓶口、试管口、离心管口的旋盖或盖子是否施紧或盖紧，容器是否完好，是否存在不易查出的破损等等，然后再进行包装。目的是减少被运输物与运输工具之间的震荡和摩擦，减少被运输物破损的机会，保证对人员和环境的安全。（2）包装传染性物品的方法：在运输生物危险材料之前必须进行35第一层包装：将病原样品装入事先检查好的容器中，如带旋盖的试管、离心管或培养瓶中，然后拧紧旋盖并使用封口膜封好。不要使用胶带，因为胶带遇液体后会张开；每一个容器应分别密封包装。一个包装中样品不能超过50ml或50毫克。第二层包装：使用足够的吸水性材料（如卫生纸或棉花）包装容器，目的是，如果容器破碎，能够保证所有渗漏的样品被吸收。一般最好是一个容器—包装。如果是小型容器，还可以把它们最后再汇集到一起，相互之间使用缓冲减压材料隔开，最后再在外面包上缓冲材料并套上至少两层塑料带。放入冷藏箱、冷藏包或冰瓶后，用缓冲材料填充，防止撞击破碎。在包装过程中一定要带两层乳胶手套，当套上第一层塑料带时，就可以脱掉外层手套，套第二层塑料带。使用消毒液擦试运输器材的外表面，作好消毒工作。以上包装只适合于专人专车的运输。当需要借助于公共设施进行运输时，还必须把上面提到的运输器材再放入木质箱子中，并填充大量缓冲保温材料，箱外贴上生物危险标志。第一层包装：将病原样品装入事先检查好的容器中，如带旋盖的试管36A类感染性物质的包装A类感染性物质的包装37B类感染性物质的包装B类感染性物质的包装38（3）运输条件：一般情况下运输生物危险材料都需要在低温条件下。需要冷冻（-20以下）的样本应放入干冰，冷藏（4℃）的样品放入冰排、或冰袋，以确保样本的质量。（3）运输条件：一般情况下运输生物危险材料都需要在低温条件下39（4）样品登记和清单：被运输的生物危险材料一定要做好登记工作，详细登记被运输样品名称、病原名、危险级别、数量、联系电话、联系人等详细信息，把该清单放在箱子里面和外面各一份，同时备好一份以备查验。（4）样品登记和清单：被运输的生物危险材料一定要做好登记工作40（5）生物危险材料的接受查验：拿出放在运输箱外面的运输清单，根据运输清单上标明的运输样本的性质、病原体种类和危险级别，决定把该运输设备放在几级实验室或是否需要放在生物安全柜内。由于液体运输物会因运输途中震荡而产生气溶胶，故应把该运输箱放置在合适位置静止至少1小时，再打开。开箱：打开运输箱时应空好隔离衣裳和防护用品。在开箱前先预备好盛包装材料的塑料袋，准备好消毒液。开箱后先检查盛样品的容器是否有破损，如容器有破损首先应使用含消毒液的湿纱布覆盖，过一段时间后再擦拭消毒处理；如果无破损可直接擦拭容器外壁，近需要的温度条件保存样品。检查样品是否与清单所列样品一致。最后，注意将废弃的包装材料高压灭菌，并对运输设备进行消毒。（5）生物危险材料的接受414、实验室标本的安全操作移液管、移液、接种针等辅助器材的使用离心管的选择离心速度、搅拌、样品稀释吸吹力度适中。血清凝集防止外溅污染环境尽量使用一次性器，4、实验室标本的安全操作42（七）高压蒸汽灭菌器的使用1、高压蒸汽灭菌的原理就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌。高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。（七）高压蒸汽灭菌器的使用1、高压蒸汽灭菌的原理432、高压蒸气灭菌器的种类下排气上排气预真空3、高压灭菌器的基本操作4、不同样品的灭菌要求注意：密封的废物袋中的温度有可能比灭菌舱温度低最高达10℃2、高压蒸气灭菌器的种类44冷空气排除量对温度（℃）的影响

压力（磅）

冷空气排除量全排除2/31/21/3全未排5109.100949072101151091051009015121115.511210910020126121.5118115109冷空气排除量对温度（℃）的影响

压力（磅）冷空气排除量全455、压力蒸汽灭菌效果的监测化学指示剂：利用其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。指示卡或指示胶带的颜色或性状均变至规定的条件，可认为该灭菌过程已完成。只能指示灭菌温度，指示物品是否经过灭菌处理，不能表明灭菌物品是否达到灭菌要求。生物指示剂：是最关键的灭菌测试。化学指示剂≠生物指示剂的监测嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或SSIK31)，监测建议：化学指示剂要求每锅进行；生物监测每月进行一次；5、压力蒸汽灭菌效果的监测466、压力蒸汽灭菌失败的原因冷空气排除不彻底，在同一温度下进行灭菌，热空气比蒸汽所需时间延长3-10倍；灭菌时间不够；包装形式、摆放位置及装载量不正确。包装材料应用带气孔的器具，允许物品包内部的空气排出和蒸汽的透入；装载量小于80%；灭菌物品不能贴靠门和四壁；6、压力蒸汽灭菌失败的原因47（八）消毒剂的合理使用1、消毒剂的合理使用高效消毒剂：过氧乙酸、甲醛、戊二醛、二氧化氯、含氯消毒剂中效消毒剂：碘类、醇类、酚类低效消毒剂：苯扎溴胺、醋酸氯己腚等双胍类2、微生物对消毒剂的抗性（由低到高依次为）：细菌繁殖体、亲脂病毒、真菌、亲水病毒、细菌芽孢、朊蛋白3、实验室消毒常用的消毒剂（八）消毒剂的合理使用1、消毒剂的合理使用484、实验室消毒常用的消毒方法皮肤表面及手的消毒：碘类、醇类、双胍类、季胺盐类物体表面的消毒：含氯消毒剂金属器材的消毒：戊二醛玻璃器皿的消毒：过氧乙酸、含氯消毒剂4、实验室消毒常用的消毒方法49（九）实验室污染性材料和废弃物处理

1、定义医疗废物是指医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。（九）实验室污染性材料和废弃物处理

1、定义502、处理方法

包装物和容器污染性材料专用包装袋或容器（防渗漏），应当有明显的警示标识说明。消毒灭菌处理对盛放感染性废弃物进行高压灭菌处理，包装袋口不要扎得过紧。对经高压灭菌处理后重复使用的感染性材料，要先消毒后清洗。对盛放锐器的感染性废弃物要进行焚烧或经高压灭菌处理后，使用防遗撒的专用运送工具，按照本单位确定的内部医疗废物运送时间、路线，将医疗废物收集、运送至暂时贮存地点；医疗卫生机构应当根据就近集中处置的原则，及时将医疗废物交由医疗废物集中处置单位处置；2、处理方法

包装物和容器51四、病原微生物菌（毒）种的管理（一）、感染性物质1、定义：是指那些已知或有理由认为含有致病原的物质。致病原是指能使人或动物感染疾病的微生物。2、感染性物质的分类A类感染性物质当人或动物与之接触时，能导致永久性的残疾构成生命威胁或致死疾病。B类感染性物质未达到A级标准的感染性物质。四、病原微生物菌（毒）种的管理（一）、感染性物质52（二）、感染性物质的包装感染性物质在运输过程中需使用三层包装系统1、三层包装标准主容器：玻璃、金属或塑料，防漏密封。但菌种管最好用塑料进口的。辅助包装：在-40℃至+55℃温度范围内必须能承受不低于95kPa内部压力而无渗漏外包装：强度满足其容积、重量及使用要求。（二）、感染性物质的包装532、包装要求除固体感染性物质，必须在主容器和辅助包装之间填充足量的吸附材料，能够吸收所有内装物；多个主容器装入一个辅助包装时，应将它们分别包裹或隔离，以防彼此接触；在冷藏或冷冻条件下运输物质：冰、干冰或其它冷冻剂必须放在辅助包装周围，内部有支撑物固定辅助包装。必须在辅助包装和外包装之间放置一份所有内装物的详细清单A类感染性物质A类感染性物质的包装B类感染性物质的包装

2、包装要求543、标签和标识（1）标签直接写在容器上

直接写在标签上手写标签存在的一些问题油墨容易被擦涂，造成难于阅读或无法阅读；浪费标签空间；高压或长期低温保藏墨水容易褪色；化学溶剂腐蚀墨水；（2）热转移打印标签可连接电脑支持中英文打印可手持文本图象，条形码，序列号可打印各种规格的标签3、标签和标识55（3）标识1）内标签写明感染物质名称、编号、来源接种日期菌毒种代数2）外包装托运人姓名地址收运人姓名及地址编码感染性物质紧急联系人姓名电话液体物质要外层包装上用上箭头标明，液体总量小于30ml的可不标明。（3）标识56（三）感染性物质的运输运输高致病性病原微生物菌(毒)种或者样本，应当经省级以上人们政府为谁主管部门批准：在省、自治区、直辖市行政区域内运输的，由出发地的省、自治区、直辖市人们政府卫生主管部门批准；需要跨省、自治区、直辖市运输或者运往国外的，由出发地的省、自治区、直辖市人们政府卫生主管部门初审后分别报国务院卫生主管部门批准；根据疾病控制工作的需要，应当向中国疾病预防控制中心运送高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，向中国疾病预防控制中心直接提出申请，由中国疾病预防控制中心审批；符合法定条件的，颁发《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书》；不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由。中国疾病预防控制中心应当将审批情况3日内报卫生部备案。路陆运输：专用汽车。不能乘坐出租车或公共汽车等交通工具。水路运输和铁路运输不行航空运输：国航、东航专人护送：不得少于2人（三）感染性物质的运输57类别特征常见组分或废物名称感染性废物携带病原微生物，具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物被病人血液、体液、排泄物污染的物品，包括：——棉球、棉签、引流棉条，纱布及其他各种敷料;——一次性使用卫生用品，一次性使用医疗用品及一从性医疗器械；——废弃的被服；——其他被病人血液、体液、排泄物污染的物品。2、医疗机构收治的隔离传染病病人或疑似传染病病人产生的生活垃圾。3、病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液。4、各种废弃的医学标本5、各种废弃的血液、血清。6、使用后的一次性使用医疗用品及一次性使用医疗器械视为感染性废物。病理性废物诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。1、手术及其他诊疗过程中产生的废弃的人体组织、器官等。2、医学实验动物的组织、尸体。3、病理切片后废弃的人体组织、病理蜡块等医疗废物分类目录医疗废物分类目录五、医疗废弃物的管理

1、医疗废物分类目录类别特征常见组分或废物名称感染性废物携带病原微生物，具有引发58损伤性废物能够刺伤或者割伤人体的废弃的义医用锐器。1、医用针头缝合针。2、各类医用锐器，包括：解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯等。3、载玻片、玻璃试管、玻璃安王瓿等。药物性废物过期、淘汰、变质或着被污染的废弃的药品。1、废弃的一般性药品，如：抗生素、非处方类药品等。废弃的细胞毒性药物和遗传毒性药物，包括：——致癌性药物，如：硫唑嘌呤、苯丁酸氮芥、环孢霉素、环磷酰胺、苯斌丙氨酸氮芥、丁斯莫斯等。——可疑致癌性药物，如：丝裂霉素、阿霉素等。——免疫抑制剂。3、废弃的疫苗、血液制品等。化学性废物具有毒性、腐蚀性、易燃性的废弃的化学物品。1、医学影像室、实验室废弃的化学试剂。2、废弃的过氧乙酸、戊二醛等化学消毒剂。3、废弃的汞血压计、汞温度计。损伤性废物能够刺伤或者割伤人体的废弃的义医用锐器。1、医用针592、实验室废弃物可以分成以下几类：可以再次使用的污染材料污染锐器污染的培养基和一次性器材3、实验室废弃物的处理可以再次使用的污染材料，经过高压灭菌后，洗刷消毒后，可再次使用。污染锐器，如一次性使用注射器，应回套针头护套，完整的置于盛放锐器的一次性容器中，高压后方可运出实验室。污染的培养基和一次性器材，包装在带有危险标志的耐高压塑料袋中，经高压灭菌后方可运出实验室。2、实验室废弃物可以分成以下几类：604、医疗废弃物存放点专门的房间，地面硬化，有围护结构和防鼠防蝇设施。必要的带盖密封存放桶和冷藏设备。明显的生物安全危险标志5、医疗废弃物的交接实验室和存放点管理人员的交接，包括：废弃物的种类，数量，高压蒸汽灭菌情况，交接日期和交接人员签字。必要时还要加注实验样品的号段。4、医疗废弃物存放点61

谢谢！谢谢！62实验室生物安全管理

实验室生物安全管理

63内容绪论国内实验室生物安全相关法律、法规生物安全实验室的管理和实验室安全操作技术菌（毒）种管理

医疗废弃物的管理

内容绪论64一、绪论（1）微生物实验室是开展微生物检验活动的特别场所，而且是很独特的工作环境，具有使工作其中或其附近的人们感染相关传染病的危险。1941年Meyer和Eddie发表了对美国74例受布鲁氏菌病感染的实验室工作人员的调查情况，结论是：对培养物、标本的操作及吸入含有布鲁氏杆菌的灰尘对实验室工作人员是极其危险的。多数病例是由在处理传染性材料时不小心或技术欠佳引起的。一、绪论（1）微生物实验室是开展微生物65一、绪论（2）1949年，Sulkin和Pike发表了第一篇关于实验室感染的系列调查报告，总结了222个病毒感染病例，其中21例死亡。至少三分之一的病例感染的可能与操作已感染的动物和组织有关。1951年Sulkin和Pike对5000名实验室工作人员进行了问卷调查，发表了第二篇系列调查报告，在发病的1342个病例中，只有三分之一在文章进行了分析报告。在所有报告的实验室感染中，布鲁氏杆菌病病例最多，连同结核病、兔热病、伤寒病和链球菌感染占总细菌感染病例数的72％，占总感染病例数的31％，全部病例数的平均病死率是3％。16％与已知的意外事故有关，主要是嘴吸吸管、针头和注射器的使用不当。1965年对这一调查重新做了修订，增加了641例新的或以前没有报告的病例。1976年再次修订，共搜集3921例病例。其中布鲁氏杆疾病、伤寒、兔热病、肺结核、肝炎和委内瑞拉马脑炎是最多见的病例，与已知意外事故有关的病例不到20％。那些在工作中接触病原体感染的病例中，80％以上的感染怀疑与暴露在含有传染因子的气溶胶有关。一、绪论（2）1949年，Sulkin和Pike发表了第66一、绪论（3）1967年Hanson等报告了428例明显与实验室相关的虫媒病毒感染。原因实验人员无意中受感染所致。最常见的传播途径是暴露于传染性气溶胶。1974年Skinholj发表的调查报告的结果显示，丹麦的临床化验室工作人员肝炎的感染率（2～3/1000），比正常人群高7倍。以上报告显示实验室工作人员发生相关病原体感染的危险性在增加，与正常人群相比实验室工作人员染患肺结核、痢疾和肝炎的几率较高。一、绪论（3）1967年Hanson等报告了428例明显67二、国内实验室生物安全相关法律、法规（1）人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法（2006年7月10日卫生部部务会议通过2006年8月15日卫生部令第50号发布自发布之日起施行）病原微生物实验室生物安全环境管理办法（2006年3月2日国家环保总局2006年第二次局务会议通过2006年3月8日国家环保总局第32号公布自2006年5月1日起施行）人间传染的病原微生物名录（2006年1月11日卫科教发［2006］15号）可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定（2005年11月24日卫生部部务会议通过2005年12月28日卫生部令45号发布自2006年2月1日起施行）病原微生物实验室生物安全管理条例（2004年11月5日国务院第69次常务会议通过2004年11月12日国务院令第424号公布自公布之日起施行）二、国内实验室生物安全相关法律、法规（1）人间传染的高致病性68二、国内实验室生物安全相关法律、法规（2）医疗废物管理行政处罚办法（2004年5月27日卫生部、环保总局令第21号公布自2004年6月1日起施行）卫生部、劳动和社会保障部“关于保障接触病毒或细菌科研人员医疗服务有关问题的通知”（2004年5月9日卫医发［2004］144号）医疗废物集中处置技术规范（2003年12月26日环发［2003］206号）医疗废物专用包装物、容器标准和警示标示规定（2003年11月20日环发［2003］188号）医疗卫生机构医疗废物管理办法（2003年8月14日卫生部部务会议通过2003年10月15日卫生部令地6号发布自发布之日起施行）医疗废物分类目录（2003年10月10日卫医发［2003］287号）医疗废物管理条例（2003年6月4日国务院第十次常务会议通过2003年6月16日国务院令第380号公布自公布之日起施行）二、国内实验室生物安全相关法律、法规（2）医疗废物管理行政处69三、生物安全实验室的管理和安全操作技术（1）

（一）、微生物危害程度分级1、我国规定病原微生物分类：在我国的《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《人间传染病原微生物名录》中，根据病原微生物的传染性、感染后对个体或群体的危害程度，将病原微生物分为4类：第一类：是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类：是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类：是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且有效治疗和预防措施的微生物。第四类：是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。三、生物安全实验室的管理和安全操作技术（1）（一）、微生物702、有害微生物的分类类别危害程度代表性微生物1高度危害性霍乱弧菌鼠疫耶尔森菌2中度危害性肉毒梭菌、假单胞菌、葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、李斯特菌、铜绿色假单胞菌、产气荚膜梭菌。3低度危害性黄曲霉4微度危害性无2、有害微生物的分类类别危害程度代表性微生物1高度危害性71中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别大量活菌操作样本检测非感染性材料的实验A/BUN编号粘质沙雷菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1志贺菌属第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1金黄色葡萄球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1表皮葡萄球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1念珠状链球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1肺炎链球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1化脓链球菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1链球菌属第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1猪链球菌第三类BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1奇异变形菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-13、人间传染病源微生物名录摘录表中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别72中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别大量活菌操作样本检测非感染性材料的实验A/BUN编号普通变形菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1铜绿假单胞菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1霍乱弧菌第二类AUN2814BSL-2BSL-2BSL-1甲、乙、丙型副伤寒沙门菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1伤寒沙门菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1鼠伤寒沙门菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1产气肠杆菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1致病性大肠埃希氏菌第三类BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1肺炎克雷伯菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1嗜肺军团菌第三类BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1中文名危害程度分类运输包装分类实验活动所需生物安全实验室级别734、世界卫生组织的规定

世界卫生组织规定的评价标准和等级划分与我国的规定基本一致，但危害程度由1级至4级递减，即1级危害度最低，4级危害度最高。4、世界卫生组织的规定

世界卫生组织规定的评价标准和等级划分74（二）、生物安全实验室分类、分级和技术指标

1、生物安全实验室的分类生物安全实验室可分为一般生物安全防护实验室和试验脊椎动物生物安全防护实验室两类。2、生物安全实验室的分级每类生物安全防护实验室根据实验室操作技术、安全设备和实验设施组合的不同而分为四级生物安全水平。即BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4。BSL-1和BSL-2实验室称为基础实验室，BSL-3称为生物安全防护实验室，BSL-4称为高度生物安全实验室。（二）、生物安全实验室分类、分级和技术指标1、生物安全实75生物安全实验室的适用微生物范围：

1、一级生物安全防护实验室（BSL-1）：结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。2、二级生物安全防护实验室（BSL-2）：适用于对人和环境具有中等潜在危险的微生物3、三级身亡安全防护实验室（BSL-3）：适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。艾滋病病毒的研究（血清学试验除外）应在三级生物安全防护实验室中进行。4、四级生物安全防护实验室（BSL-4）：适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。不明微生物，也必须在四级生物安全防护实验室中进行。生物安全实验室的适用微生物范围：1、一级生物安全防护实验763、生物安全实验室的技术指标名称洁净度级别最小换气次数与又室内向室外方向上相邻相同房间的最小负压差(Pa)温度℃相对湿度%噪声.

dB(A)最低照度Ix一级二级三级四级——7或87或8可开窗可开窗15或1215或12——-10-1018～2818～2718～2518～24≤7030～7030～6030～60≤60≤60≤60≤603003005005003、生物安全实验室的技术指标名称洁净度级别最小换气次数与又室77三）生物安全柜的选择和使用

生物安全柜的种类Ⅰ级生物安全柜Ⅱ级A型生物安全柜Ⅱ级B型生物安全柜Ⅲ级生物安全柜生物安全柜的摆放远离实验室门口，空调出风口，减少外部其他气流的干扰；三）生物安全柜的选择和使用生物安全柜的种类78生物安全柜操作的注意事项可产生气溶胶的设备（例如混匀器、离心机等）应靠近安全柜的后部放置；有生物危害性的废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品，应该放在安全柜内的某一侧；将工作区域内的污染物质与洁净物质分开放置，在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行；耐高压灭菌的生物危害性废弃物袋以及吸管盛放盘不应放在安全柜的外面，否则在使用这些物品时双臂就必须频繁进出安全柜，这样会干扰安全柜空气屏障的完整性，从而影响对人员和物品的防护；不要过载；在操作过程中，如果有物质溢出或液体溅出，在将物品移出安全柜前，一定要对其表面进行消毒，实验结束对安全柜内表面全部消毒；生物安全柜操作的注意事项可产生气溶胶的设备（例如混匀器、离心79（四）、实验室感染80%是不明原因的感染。20%感染的原因是明确的。80%是由工作人员操作失误引起的；20%是由设备故障引起的。导致感染最多的4种实验室事故溢出和泼洒针头和注射器锐器、碎玻璃动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤（四）、实验室感染80%是不明原因的感染。801、感染因子的种类：1含有感染因子气溶胶吸入2锐器针头和注射器、锐器、碎玻璃等刺伤3接触溢出和泼洒的感染因子4染菌动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤1、感染因子的种类：1含有感染因子气溶胶吸入812、感染途径：呼吸道、消化道、血液和皮肤接触等2、感染途径：呼吸道、消化道、血液和皮肤接触等823、实验室感染的原因除与实验室建筑、设置、制度、人员素质、清洁、消毒等有关外，检验标本含有大量的、种类繁多的隐匿病原体。检验操作时形成气溶胶检验器材、仪器和环境等被污染一些偶然事故也会造成实验室人员感染工作人员易感性免疫力低下微生物大量侵入3、实验室感染的原因除与实验室建筑、设置、制度、人员素质、清834、实验室感染的预防一般防护禁止非工作人员进入实验室实验操作必须穿工作服，手有伤口时戴手套试验区域内禁止饮食、吸烟、化妆、储存食物等制定实验室生物安全程序移液禁止口吸实验室经常保持清洁严格锐器管理，防止利器损伤所以培养物、废弃物在运出实验室之前必须高压灭菌有效的防鼠防虫措施必要的预防接种特殊防护不同微生物在相应实验室的生物安全设备中操作4、实验室感染的预防一般防护84（五）、实验室生物安全管理

1、成立生物安全委员会生物安全委员会主任由单位法人担任生物安全委员会的主要职责保证生物安全制度管理制度监督有关法规和操作规程的执行决定进入生物安全实验室的工作人员（五）、实验室生物安全管理1、成立生物安全委员会852、生物安全实验室的管理（1）生物安全实验室入口处必须张贴生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、实验室负责人和相关负责人姓名和电话。生物危险标志的颜色应为黑色，背景为黄色。（2）生物安全实验室的准人制度外来进修、学习和参观人员必须学习实验室的一切规章制度和有关操作规程，并经实验室之人批准，（3）实验室主任为该实验室的第一生物安全责任人，有权决定参加实验的人员数量和开展实验的种类。（4）每次进入实验室必须填写工作日志，并严格遵守实验室的一切操作规程。（5）加班工作必须事先征得实验室主任同意并通知安全员尽量避免单独工作，以减少偶然事件发生的危险性。2、生物安全实验室的管理86

3、实验室人员管理（1）实验室负责人的职责组织实验室的各项工作，保证实验室运行的安全和实验室工作质量的准确可靠组织对新工作人员的培训，对培训的结果进行考核，包括实验室安全知识和实验室操作技术考核，以决定工作人员进入实验室控制区域工作的资格。定期检查实验室的各项技术参数，组织对实验室装备的常规保养在实验室内发生事故或紧急情况时，决定并采取紧急处置措施，并报告上级。实验室负责人由高级职称的人员承担，必须具有如下资质：具有强毒微生物实际工作经验对所操作的病因微生物有全面、完整的了解具有组织实验室工作的能力对工作有高度责任心3、实验室人员管理87（2）实验室工作人员的一般行为规范生物安全实验室为专用实验室，只允许进行实验目的的规定操作，与此无关的活动一律不得进行。必须按规定着装，方可进入实验室控制区实验室内禁止吸烟、饮食、访客和喧哗保持实验室环境的整洁，每项工作完成之后，必须清洁台面，恢复实验室的待运转状态。注意个人的健康状况，出现身体不适情况，应及时向负责人报告（2）实验室工作人员的一般行为规范88（3）实验室工作人员的技术要求必须了解实验室的安全原理，熟悉安全手册的各项规定，收集紧急情况下的正确应对措施。必须熟悉微生物学技术和感染性病原菌的知识，正确、安全地使用菌毒株，避免污染，已获得准确可靠的实验结果。必须熟悉所研究疾病的国家标准，能够完成标准所规定的任务。（3）实验室工作人员的技术要求89（4）实验室工作人员的培训新工作人员必须经过培训，方可取得进入实验室控制区域工作的资格。培训由实验室组织进行，由负责人指定熟悉实验室工作的人员担任辅导。培训内容包括：阅读并理解微生物操作规程以及安全手册 实验室各种设备的使用方法着装方法微生物学基本技术及无菌操作方法实验室清洁及消毒方法（4）实验室工作人员的培训90（5）实验室工作人员的资格考试新工作人员经过培训后，由实验室负责人组织考试。包括口试、笔试与实际操作考核。通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作三个月，才能获得进行强毒微生物操作的正式资格。（5）实验室工作人员的资格考试91（6）实验室工作人员的适合工作状态实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室的控制区域工作。出现下列情况不应进入上述区域：身体出现开放性损伤患发热性疾病、感冒、上呼吸道感染、或其他导致抵抗力下降的情况妊娠六个月以上已经在控制区域连续工作4个小时以上，或其他原因造成的疲劳状态（6）实验室工作人员的适合工作状态924、实验室仪器设备管理仪器设备作业指导书仪器设备维护保养仪器设备使用记录包括仪器使用前后状况、使用时间、使用人、使用日期等仪器设备的维修送修前的消毒仪器设备的鉴定专业机构4、实验室仪器设备管理93（六）样本的采集运输和接收1、标本采集人员的防护（1）所有采集标本的操作要戴手套，穿工作外套、口罩、甚至护目镜。（2）所有标本容器必须防漏，运送也应装入密封防漏的塑料袋中，袋上附有一表格用于填写日期、时间、姓名之用。（3）决不能将针头暴露的注射器送到实验室。应将注射器中的标本注入无菌试管中。或采用防护手段取掉针头，再盖上注射器并放入密封防漏的塑料袋中送检。（4）不得将装有标本的破损容器送往实验室，也不能对其进一步处理。应该及时向医生通报容器渗漏，解释如果留用标本，会带来的潜在危害性并要求重新送检。如果新标本送来，则将泄漏的标本高温高压处理后再废弃掉。（5）采集标本污染器材的处理对所有采集标本的污染器材均应按照《实验室废物处理制度》进行处理。（六）样本的采集运输和接收1、标本采集人员的防护942、生物标本运送、接收安全要求生物危险材料不仅包括来自病菌人的各种标本，而且包括来自生物医学实验室的各种材料，这些来自人体的标本和来自实验室的材料都可能含有传染性病原体或其毒素，为保障对环境、对人体的安全，保障原体不向外扩散，做到安全运输和安全接受标本和材料，在整个实施过程中必须遵守如下操作规则。2、生物标本运送、接收安全要求953、生物危险材料的运输（1）运输器材：运输生物危险材料必须使用专业专用的器材，以防止造成传染性物质和有毒有害物质扩散。经常使用的工具有计划免疫专用冷藏包、冷藏箱和大小不等的冰瓶（广口保温瓶）。无论是冷藏包还是冷藏箱，在使用时一般都必须带冰排，而冰瓶在使用时常常放入冰块或碎冰。由于冷藏包和冷藏箱是通过箱壁的泡沫保温，所以运输过程中不怕磕碰；而对于冰瓶来说，由于它是通过双层玻璃抽真空保温，玻璃易碎，所以运输过程中需轻拿轻放。3、生物危险材料的运输（1）运输器材：运输生物危险材料必96（2）包装传染性物品的方法：在运输生物危险材料之前必须进行适当的检查和准备工作。首先要认真检查所运输的材料是否已经装好，如检查瓶口、试管口、离心管口的旋盖或盖子是否施紧或盖紧，容器是否完好，是否存在不易查出的破损等等，然后再进行包装。目的是减少被运输物与运输工具之间的震荡和摩擦，减少被运输物破损的机会，保证对人员和环境的安全。（2）包装传染性物品的方法：在运输生物危险材料之前必须进行97第一层包装：将病原样品装入事先检查好的容器中，如带旋盖的试管、离心管或培养瓶中，然后拧紧旋盖并使用封口膜封好。不要使用胶带，因为胶带遇液体后会张开；每一个容器应分别密封包装。一个包装中样品不能超过50ml或50毫克。第二层包装：使用足够的吸水性材料（如卫生纸或棉花）包装容器，目的是，如果容器破碎，能够保证所有渗漏的样品被吸收。一般最好是一个容器—包装。如果是小型容器，还可以把它们最后再汇集到一起，相互之间使用缓冲减压材料隔开，最后再在外面包上缓冲材料并套上至少两层塑料带。放入冷藏箱、冷藏包或冰瓶后，用缓冲材料填充，防止撞击破碎。在包装过程中一定要带两层乳胶手套，当套上第一层塑料带时，就可以脱掉外层手套，套第二层塑料带。使用消毒液擦试运输器材的外表面，作好消毒工作。以上包装只适合于专人专车的运输。当需要借助于公共设施进行运输时，还必须把上面提到的运输器材再放入木质箱子中，并填充大量缓冲保温材料，箱外贴上生物危险标志。第一层包装：将病原样品装入事先检查好的容器中，如带旋盖的试管98A类感染性物质的包装A类感染性物质的包装99B类感染性物质的包装B类感染性物质的包装100（3）运输条件：一般情况下运输生物危险材料都需要在低温条件下。需要冷冻（-20以下）的样本应放入干冰，冷藏（4℃）的样品放入冰排、或冰袋，以确保样本的质量。（3）运输条件：一般情况下运输生物危险材料都需要在低温条件下101（4）样品登记和清单：被运输的生物危险材料一定要做好登记工作，详细登记被运输样品名称、病原名、危险级别、数量、联系电话、联系人等详细信息，把该清单放在箱子里面和外面各一份，同时备好一份以备查验。（4）样品登记和清单：被运输的生物危险材料一定要做好登记工作102（5）生物危险材料的接受查验：拿出放在运输箱外面的运输清单，根据运输清单上标明的运输样本的性质、病原体种类和危险级别，决定把该运输设备放在几级实验室或是否需要放在生物安全柜内。由于液体运输物会因运输途中震荡而产生气溶胶，故应把该运输箱放置在合适位置静止至少1小时，再打开。开箱：打开运输箱时应空好隔离衣裳和防护用品。在开箱前先预备好盛包装材料的塑料袋，准备好消毒液。开箱后先检查盛样品的容器是否有破损，如容器有破损首先应使用含消毒液的湿纱布覆盖，过一段时间后再擦拭消毒处理；如果无破损可直接擦拭容器外壁，近需要的温度条件保存样品。检查样品是否与清单所列样品一致。最后，注意将废弃的包装材料高压灭菌，并对运输设备进行消毒。（5）生物危险材料的接受1034、实验室标本的安全操作移液管、移液、接种针等辅助器材的使用离心管的选择离心速度、搅拌、样品稀释吸吹力度适中。血清凝集防止外溅污染环境尽量使用一次性器，4、实验室标本的安全操作104（七）高压蒸汽灭菌器的使用1、高压蒸汽灭菌的原理就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌。高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。（七）高压蒸汽灭菌器的使用1、高压蒸汽灭菌的原理1052、高压蒸气灭菌器的种类下排气上排气预真空3、高压灭菌器的基本操作4、不同样品的灭菌要求注意：密封的废物袋中的温度有可能比灭菌舱温度低最高达10℃2、高压蒸气灭菌器的种类106冷空气排除量对温度（℃）的影响

压力（磅）

冷空气排除量全排除2/31/21/3全未排5109.100949072101151091051009015121115.511210910020126121.5118115109冷空气排除量对温度（℃）的影响

压力（磅）冷空气排除量全1075、压力蒸汽灭菌效果的监测化学指示剂：利用其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。指示卡或指示胶带的颜色或性状均变至规定的条件，可认为该灭菌过程已完成。只能指示灭菌温度，指示物品是否经过灭菌处理，不能表明灭菌物品是否达到灭菌要求。生物指示剂：是最关键的灭菌测试。化学指示剂≠生物指示剂的监测嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或SSIK31)，监测建议：化学指示剂要求每锅进行；生物监测每月进行一次；5、压力蒸汽灭菌效果的监测1086、压力蒸汽灭菌失败的原因冷空气排除不彻底，在同一温度下进行灭菌，热空气比蒸汽所需时间延长3-10倍；灭菌时间不够；包装形式、摆放位置及装载量不正确。包装材料应用带气孔的器具，允许物品包内部的空气排出和蒸汽的透入；装载量小于80%；灭菌物品不能贴靠门和四壁；6、压力蒸汽灭菌失败的原因109（八）消毒剂的合理使用1、消毒剂的合理使用高效消毒剂：过氧乙酸、甲醛、戊二醛、二氧化氯、含氯消毒剂中效消毒剂：碘类、醇类、酚类低效消毒剂：苯扎溴胺、醋酸氯己腚等双胍类2、微生物对消毒剂的抗性（由低到高依次为）：细菌繁殖体、亲脂病毒、真菌、亲水病毒、细菌芽孢、朊蛋白3、实验室消毒常用的消毒剂（八）消毒剂的合理使用1、消毒剂的合理使用1104、实验室消毒常用的消毒方法皮肤表面及手的消毒：碘类、醇类、双胍类、季胺盐类物体表面的消毒：含氯消毒剂金属器材的消毒：戊二醛玻璃器皿的消毒：过氧乙酸、含氯消毒剂4、实验室消毒常用的消毒方法111（九）实验室污染性材料和废弃物处理

1、定义医疗废物是指医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。（九）实验室污染性材料和废弃物处理

1、定义1122、处理方法

包装物和容器污染性材料专用包装袋或容器（防渗漏），应当有明显的警示标识说明。消毒灭菌处理对盛放感染性废弃物进行高压灭菌处理，包装袋口不要扎得过紧。对经高压灭菌处理后重复使用的感染性材