新生儿遗传性耳聋基因筛查项目

新生儿遗传性耳聋基因

筛查项目博奥生物集团有限公司生物芯片北京国家工程研究中心北京博奥晶典生物技术有限公司Contents目录项目背景及意义实验流程及质控血片采集、递送与保存耳聋遗传咨询临床案例目录项目背景及意义part1Contents我国残疾人群：8502万听力残疾人群：2054万数据来自：《关于使用2010年末全国残疾人总数及各类、不同残疾等级人数的通知》，42010年末各类残疾人比例听力残疾比例高1.中国出生缺陷防治报告（2012）2.中国听力论坛（2013）

80%的聋儿出生在听力正常的家庭5每年新增3.5万先天性聋儿【1】每年新增3-4万迟发性聋儿【2】我国耳聋出生缺陷现状6耳聋非综合征型（70%）遗传因素（约60%）常染色体隐性（80%）环境因素（约20%）综合征型（30%）Alport综合征Pendred综合征Waardenburg综合征BOR综合征Usher综合征……等细菌感染病毒感染耳毒性药物外伤磕碰声损伤……常染色体显性（15%-20%）性连锁（<1%）线粒体（<1%）不明原因（约20%）很可能是遗传因素JournalofAudiologyandSpeechPathology.2011,19(1):73-77遗传是耳聋最大病因7流调单位：301医院聋病分子诊断中心

流调范围：全国28个省市

样品规模：10880例正常人群中携带耳聋基因突变比例约为5%基因病征正常人携带比例聋人中携带比例GJB2先天聋3%21%SLC26A4迟发聋2%14.5%12SrRNA药物聋0.3%4.4%GJB3高频聋我国本土上克隆的第一个遗传疾病基因四大致聋基因8GJB2基因：——先天性重度以上感音神经性耳聋；当GJB2基因发生纯合突变时，患者出生即表现出耳聋症状；进行人工耳蜗移植效果良好SLC26A4基因（PDS基因）：——大前庭水管综合征（EVAS），当患者患感冒、头部受打击时，听力急剧下降；避免颅压增大，使用改善微循环药物和神经营养药治疗线粒体基因突变：——氨基糖甙类药物敏感性耳聋；患者使用氨基糖甙类药物会导致重度耳聋的发生；母系家族成员应杜绝使用氨基糖甙类抗生素药物GJB3基因：——后天高频感音神经性耳聋；表现为后天突发性耳聋；进行人工耳蜗移植效果良好基因型与致病关系新生儿筛查耳聋基因意义及早确诊先天性耳聋，避免由聋致哑及早发现迟发性耳聋，通过生活指导，避免或延缓耳聋发生及早发现药物性耳聋，终身禁用耳毒性药物，并预防家族成员发生药物性耳聋遗传咨询9先天性聋儿及早安装助听器或人工耳蜗植入避免孩子由聋致哑迟发性聋儿通过生活指导避免或延缓耳聋发生终身禁用耳毒性药物并预防家族成员发生药物性耳聋药物性聋儿10高危新生儿的干预措施目前，新新筛项目目已经在在北京、、成都、、长治、、南通、、固始、、郑州等等地方开开展开展地区区112014.1南通新筛项目培训2014.8河南固始新筛项目培训2013.6长治新筛项目2012.4北京新筛项目2012.10成都新筛项目2014.10郑州新筛项目全国新筛筛项目开开展情况况12全国受益益新生儿儿达到100万例！全国新筛筛项目开开展情况况目录录实验流程及质控part2Contents晶芯®九项遗传传性耳聋聋基因检检测试剂剂盒四个基因的的9个突变位位点：GJB235delG、176del16、235delC和299delAT；SLC26A4IVS7-2A>G、2168A>G；线粒体12srRNA1555A>G、1494C>T，GJB3538C>T针对中国国人设计计，指标标覆盖了了国人中中98%GJB2,50%PDS,90%药物性耳耳聋患者者。快速速：8小时灵敏敏：2-20ng/μL高通量：：同时检检9个位点准确确：与与测序验验证相符符率100%芯片杂交仪芯片洗干仪芯片扫描仪14检测流程程15血片接收收及血斑斑提取2.5h核酸扩增增3.5h芯片杂交交及清洗洗2h芯片扫描描及结果果判读5min16芯片及质控IVS7-2MIVS7-2MIVS7-2M4321QC：表面化化学质控控探针BC：空白对对照探针针PC：杂交阳阳性对照照探针MC：磁珠质质控探针针IC：基因扩扩增内对对照探针针NC：阴性对对照探针针野生型探探针突变型探探针质量控制制17室内质控质控品为血片，全程质控每批次样本均含一套质控品质控品包含所有位点室间质评质控中心监督控制所有9个位点每年一次通过芯片片内质控控与室内内、室间间质量控控制，完完全能够够满足临临床对准准确性、、一致性性的需求求！检测结果果展示18先天性聋聋235纯合1555均质299杂合携带者药物聋敏敏感2168/IVS7-2复合杂合先天性聋聋结果发放放19结果上传短信发送上网查结果医院就诊报告打印医院就诊电话回访北京郑州目录录血片采集、递送与保存Part3Contents采血所需需物品21物品准备采血针滤纸片知情同意书血片架打印纸自封袋同代谢病病筛查采采集血片片要求！！采血流程程22分娩机构构信息登记记采血晾干标本本血片递送送市妇幼保保健院签署知情情同意书书采血实施施23（一）签签署知情情同意书书采血前将将本次筛筛查的项项目、条条件、方方式、费费用等情情况如实实告知新新生儿的的监护人人、遵循循知情选选择的原原则。采血实施施24（二）信信息登记记同代谢性性疾病筛筛查：认真填写写采血卡卡片，做做到字迹迹清楚、、登记完完整。并并注意在在填写过过程中不不要污染染滤纸片片。卡片内容容包括：：公/自费、采采血单位位、母亲亲姓名、、住院号号、新生生儿性别别、出生生日期、、采血日日期、居居住地址址、联系系电话和和采血人人等信息息。采血实施施25（三）规规范采血血采血时间间：与代代谢性疾疾病同时时采血方式式：同代代谢性疾疾病合格要求求：不少少于2个血斑直径大于于8mm血斑自然然渗透，，滤纸正反反面血斑斑一致血斑无污污染不合格血血片展示示26酒精污染染的血斑斑，出现现渗血环环组织液污污染样本过少少，渗透透不良样本过多多采血实施施27（四）血血片递送送与保存存1、采血单单位采血完成成后制成成干血片片，完成成初级质质控，集集中放入入自封袋袋，封好好封口，，以防霉霉变，放放入专用用运输包包，与代代谢性疾疾病筛查查血片同同时送区区县妇幼幼，并做做好交接接登记。。2、市妇幼幼保健院院完成血片片二级质质控后，，干燥密密封保存存，放入入专用运运输包，，递送到到筛查单单位，并并做好交交接登记记。3、筛查单单位完成交接接，对血血片进行行三级质质控后，，进行检检测并长长期保存存血片（（2-8℃）。因特殊情情况未按按期采血血或不合合格标本本退回需需要重新新采血者者，应当当及时预预约或追追踪采集集血片。。目录录耳聋遗传咨询part4Contents耳聋遗传传咨询意意义29减轻患者身体体和精神神上的痛苦；减轻患者及其其亲属的心理压力；帮助他们们正确对待待遗传性性耳聋、、了解发发病概率；采取正确的预预防、治治疗措施施，从而而最终降降低人群群遗传性耳聋的发病率；；意义：耳聋遗传传咨询对对象301.已生育聋聋儿的正正常夫妇妇询问再再发风险险者；2.有耳聋家族族史的正正常夫妇妇，担心心后代会会遗传此此病者；；3.未婚或已婚的的男女双双方均为为聋哑人人或其中中一人为为聋哑人，需要给予婚前前婚配指指导或婚婚后生育育指导者；4.新生儿耳聋患者者，指导导用药及及生活指导；此外，由于耳耳聋基因因在正常人群群中也有一一定的携携带率，因此有婚配或或生育要要求但无无耳聋家家族遗传传史的正正常人也在耳聋遗传传咨询服服务对象象范围内内。遗传咨询询工作流流程31第一步：：样本芯片片检测结结果报告告发送邮寄或者者短信发发送第二步：：整理需要要电话追追访的名名单新生儿耳耳聋基因因实验室室检测及及报告发发送完成成后，整整理并打打印GJB2、SLC26A4、12SrRNA、GJB3基因突变变携带者者列表清清单第三步：：电话追访访并记录录追访结结果确认新生生儿家长长收到报报告并告告知查看看筛查结结果对于需要要和希望望进行门门诊复诊诊的新生生儿及家家长，追追访中告告知其来来诊的预预约方式式及就诊诊时间、、流程等等初次追访访失败的的，记录录追访时时间及失失败原因因，需进进行随后后的第二二次电话话追访，，若第三三次追访访失败，，送约定定部门遗传咨询询工作流流程32第四步：：电话遗传传咨询工工作身份确认认：筛查查编号、、母亲姓姓名、出出生医院院听力检测测是否通通过？是是否有耳耳聋家族族史？听力未通通过者来来门诊复复诊听力通过过者定期期（每3月-半年）测测查听力力至3岁或到门门诊进行行听力复复诊和遗遗传咨询询绘制药物物相关耳耳聋基因因携带者者母系家家族谱，，记录家家族中已已有听障障者的发发病年龄龄、原因因、听力力状况，，并通知知其领取取致聋药药物卡片片等遗传咨询询工作流流程33第五步：：门诊复诊诊新生儿儿遗传咨咨询工作作登记复诊诊新生儿儿耳聋基基因筛查查结果、、编号、、听力筛筛查是否否通过，，询问有有无听力力障碍家家族史有家族史史者绘制制家系图图；绘制制药物相相关耳聋聋基因携携带者母母系家系系图，记记录家族族中已有有听障者者的发病病年龄、、原因、、听力状状况，并并通知其其领取致致聋药物物卡片等等OAE听力测试试听力检测测结果及及基因筛筛查结果果联合分分析定期复查查听力、、诊断性性听力学学检查或或分子诊诊断分子诊断断程序：：GJB2、SLC26A4全基因测测序检测测遗传咨询询工作流流程—小结34门诊复诊诊新生儿儿遗传咨咨询工作作结合听筛结果提供听力及遗传综合资讯听筛通过听筛未通过基筛通过基筛未通过基筛通过基筛未通过随诊程序分子诊断程序听力/分子诊断程序听力/分子诊断程序提供听力及遗传服务及康复指导，并长期随访观察目录录临床案例part5Contents耳聋检测测应用案案例136野生型（正常）235delC纯合（耳聋）235delC纯合（耳聋）235delC杂合（正常）235delC杂合（耳聋）爷爷奶奶母亲父亲姑姑未知（过世）在郑州大大学第三三附属医医院听力力筛查