第二章-中药分析中供试品的制备00课件

第二章中药分析中供试品的制备中药分析教研室11讲授提纲第一节取样第二节样品的提取第三节样品的净化第四节样品提取液的浓缩第五节样品的衍生化第六节不同类型中药样品的预处理特点2讲授提纲第一节取样2样品预处理有效释放被测成分，并制成便于分析测定状态除杂、纯化，提高重现性和准确度富集、浓缩、衍生化，提高灵敏度和选择性使试样的形式及所溶剂符合分析测定要求3最大限度地保留被测成分，除去干扰物质，将被测定成分浓缩至高于分析方法最小检测限所需浓度样品预处理有效释放被测成分，并制成便于分析测定状态除杂、纯化第一节取样4取样鉴别含量测定检查提取纯化样品粉碎科学性、真实性、代表性均匀合理第一节取样4取样鉴别含量测定检查提取纯化样品粉碎科学一、抽样5常用术语包装件、最小包装批、抽样批抽样单元、最终样品抽样单元的确定随机抽样法：简单、分段偶遇抽样法针对性抽样抽样量一般药材和饮片：100～500g/包粉末状药材和饮片：25～50g/包贵重药材和饮片：5～10g/包抽样方法中药材和饮片的抽样中药提取物的抽样中药制剂的抽样一、抽样5常用术语包装件、最小包装批、抽样批抽样单元、最终样

6二、样品的粉碎使所取样品均匀、有代表性，提高精密度和准确度粉碎机匀浆机研钵能快而充分地提取样品中被测组分6二、样品的粉碎使所取样品均匀、有代表性，提高精密度和准确取样均匀合理气体固体，圆锥四分法半液体，硅藻土拌液体，混合均匀7三、取样保留一半数量作留样观察,时间为半年或一年取样气体固体，圆锥四分法半液体，硅藻土拌液体，混合均匀7三、浸渍法操作简单，适于热不稳定的样品费时、费溶剂、提取不充分，含测少用超声提取法简便、快速、高效，通常30min应规定提取功率和提取频率回流提取法提取效率高，时间短，但杂质较多对热不稳定或具有挥发性成分不宜使用8第二节样品提取浸渍法操作简单，适于热不稳定的样品费时、费溶剂、提取不充分，9供试品溶液的制备

取本品粉末(过二号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇10ml，超声处理(功率250W，频率50kHz)20分钟，滤过，滤渣和滤纸再加甲醇10ml，同法超声处理一次，滤过，加甲醇适量洗涤2次，合并滤液和洗液，转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。（荆芥项下胡薄荷酮含量测定）9供试品溶液的制备取本品粉末(过二号筛)约0.5g，精连续回流提取法提取效率高，所需溶剂少，提取杂质少，操作简便受热易分解的成分不宜使用水蒸气蒸馏法提取杂质少，操作简便适用于挥发性成分，可利用盐析作用消化法降低有机物干扰，分干法和湿法适用于以元素为测定对象10第二节样品提取连续回流提取法提取效率高，所需溶剂少，提取杂质少，操作简便受11供试品溶液的制备

取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml……（黄芪中黄芪甲苷）11供试品溶液的制备超临界流体萃取法（CO2）安全，价廉，易于操作，环保较适用于中低极性成分的提取加压溶剂萃取法提取率高价格昂贵微波辅助萃取法快速，省溶剂、多样品同时提取萃取溶剂选择性高，可与HPLC相连12第二节样品提取超临界流体萃取法（CO2）安全，价廉，易于操作，环保较适用于13超临界流体萃取法（CO2）设备加压溶剂萃取法设备微波辅助萃取法设备13超临界流体萃取法加压溶剂萃取法设备微波辅助萃取法设备14不同分析目的样品的提取实验目的方法要求常用方法供鉴别用针对待检成分的溶解性能选择适宜的提取溶剂，提取方法力求简便、易操作超声，加热回流提取，浸渍法供杂质检查用无机杂质检查用消化法；有机杂质的检查可按常规的鉴别或含量测定的方法提取定量杂质：定量方法定性杂质：鉴别方法供含量测定用特别强调待测成分要提取完全超声处理法、加热回流法和连续回流法14不同分析目的样品的提取实验目的方法要求常用方法供鉴别用针第三节样品的分离净化沉淀法蒸馏法液-液萃取法色谱法消化法15第三节样品的分离净化沉淀法15161、沉淀法

利用某些试剂与被测成分或杂质生成沉淀，分离沉淀或保留溶液以得到精制的方法例水苏碱+雷氏盐生物碱雷氏盐沉淀H+161、沉淀法利用某些试剂与被测成分或杂质生172、萃取法

利用被测成分与干扰成分溶解性能的不同进行分离，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法例生物碱盐氨水H2O172、萃取法利用被测成分与干扰成分溶解性能的18正丁醇

——用于皂苷类醋酸乙酯——用于黄酮类三氯甲烷——用于生物碱类乙醚、石油醚——用于挥发油（1）萃取溶剂的选择直接萃取：18正丁醇——用于皂苷类醋酸乙酯——用于黄酮类三氯甲19（2）水相pH的选择酸性成分——

比其pKa低1~2个pH单位碱性成分——

比其pKa高1~2个pH单位19（2）水相pH的选择酸性成分——碱性成分——20（3）仪器和提取次数（4）乙醇提取液——先挥去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鉴别——1次含量测定——3~4次20（3）仪器和提取次数（4）乙醇提取液——先挥去乙醇（5）21离子对萃取：萃取（离子对）有机相有机酸生物碱+离子对试剂（离子对）水相

21离子对萃取：萃取（离子对）有机相有机酸生物碱+离子对22例，华山参片中生物碱含量测定取本品40片，除去糖衣，精密称定，研细，精密量取适量（约相当于12片的重量），置具塞锥形瓶内，精密加入枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）25mL，振摇5分钟，放置过夜，用干燥滤纸滤过，取续滤液，精密量取续滤液2mL，置分液漏斗中，精密加枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）10mL，再精密加入0.04%溴甲酚绿溶液2mL，摇匀，用10mL三氯甲烷振摇提取5分钟，待溶液完全分层后，分取三氯甲烷液，用三氯甲烷湿润的滤纸滤入25mL量瓶中，再用三氯甲烷提取3次，每次5mL，依次滤入量瓶中，并用三氯甲烷洗涤滤纸，滤入量瓶中，加三氯甲烷至刻度。22例，华山参片中生物碱含量测定233、色谱法（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分（2）保留杂质于柱上---简便，精制效果好，被普遍使用233、色谱法（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶24常用固定相硅胶氧化铝键合相硅胶大孔吸附树脂-皂苷类聚酰胺-黄酮类硅藻土、纤维素200-100目,1-10g机理：吸附24常用固定相硅胶键合相硅胶大孔吸附树脂-皂苷类200-1025例

烧伤灵酊中大黄素的含量测定【处方】虎杖黄柏冰片精密量取本品2mL，加硅胶（色谱用，60～160目）1g，置温水浴上蒸干，加在硅胶柱（色谱用，60～160目，2g，内径为1.7cm）上，用石油醚（60～90℃）-甲酸乙酯-甲酸（100:100:2）混合液90mL分次减压洗脱，收集洗脱液，置100mL量瓶中，并用混合溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。25例烧伤灵酊中大黄素的含量测定26例复脉定胶囊中黄芪含量测定【处方】党参黄芪远志桑椹川芎

取本品20粒的内容物，精密称定，研细，混匀，取约2g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40mL，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40mL，合并正丁醇液，用氨试剂充分洗涤2次，每次40mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，通过D101型大孔树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），用水50mL洗脱，再用40%乙醇30mL洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。26例复脉定胶囊中黄芪含量测定274、固相萃取法通过吸附剂与目标化合物之间的相互作用来保留/吸附疏水作用：C18、C8、silica离子交换作用：SAX,SCX,COOH，NH2等物理吸收：Florsil、Alumina等274、固相萃取法通过吸附剂与目标化合物之间的相互作用来保留28Sep-PakC18柱：30-60um一般操作程序：（1）柱的活化（2）上样（3）清洗（4）洗脱28Sep-PakC18柱：30-60um29例新雪颗粒中栀子的鉴别【处方】磁石石膏滑石南寒水石硝石栀子等取本品1.5g，研细，加正己烷10mL，充分振摇，放置30分钟，滤过，滤渣加甲醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5mL使溶解，离心15分钟（转速为每分钟3000转），上清液通过十八烷基硅烷键合硅胶固相萃取小柱（500mg），以水10mL洗脱，弃去洗液，再用甲醇15mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。29例新雪颗粒中栀子的鉴别305、固相微萃取法

SPME是在SPE基础上发展起来的，保留了SPE的优点，克服了SPE样品预处理技术的缺陷，即无需柱填充物和使用溶剂解吸被测组分的前处理，它能直接从样品中采集挥发和非挥发性的化合物，然后直接在GC、GC/MS、HPLC和HPCE上分析，集采样、提取、浓缩、进样于一体。优点：费用低、操作简单、省时、环保缺点：离子交换作用：SAX,SCX,

COOH，

NH2等305、固相微萃取法SPME是在SPE基础上发展起来的，保第四节样品提取液的浓缩方法适用成分适用检测备注水浴蒸发热稳定性好的成分薄层自然挥散小体积提取液或挥发性强溶剂，乙醚薄层减压蒸发对热不稳定的样品残留分析温度低、速度快气流吹蒸法少量液体，氮吹法特别适用于结构不稳定、易氧化的化学成分定量氮气流可以防止氧化冷冻干燥热不稳定的生物样品定量干燥后的物料保持原来的化学组成和物理性质；热量消耗比其他干燥方法少31第四节样品提取液的浓缩方法适用成分适用检测备注水浴蒸发热稳例当归流浸膏的鉴别取本品3mL，加1%碳酸氢钠溶液50mL，充分振荡，用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取2次，每次20mL，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。32例当归流浸膏的鉴别32第四节样品的衍生化33种类衍生化目的衍生化方法提高成分的挥发性增加成分的稳定性生成非对映异构体硅烷化酰化烷基化不对称衍生气相例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量

－甲酯化

校正因子测定：取油酸对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1mL含3mg的溶液。精密量取5mL，置10mL具塞试管中，用氮气吹干，加入0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液2mL，置60℃水浴中皂化25分钟，至油珠全部消失，放冷，加15%三氯化硼乙醚溶液2mL，置60℃水浴中甲酯化2分钟，第四节样品的衍生化33种类衍生化目的衍生化方法提高成分的挥34续例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量

放冷，精密加入正己烷2mL，振摇，加饱和氯化钠溶液1mL，振摇，静置，取上层溶液作为对照品溶液。精密称取苯甲酸苯酯适量，加正己烷制成每1mL含8mg的溶液，作为内标溶液。精密量取对照品溶液和内标溶液各1mL，摇匀，吸取1μL，注入气相色谱仪，测定，计算校正因子。34续例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量35种类衍生化目的反应要求提高检测的灵敏度改善色谱分离效果反应要求不苛刻，且迅速定量单一衍生化产物，副产物不干扰衍生化试剂易得、通用性好高效液相衍生化方法在线离线柱前柱后紫外衍生化荧光衍生化非对映衍生化35种类衍生化目的反应要求提高检测的灵敏度反应要求不苛刻，且36例16，HPLC法测定阿胶中氨基酸的含量对照品溶液的制备：取L-羟脯氨酸对照品、甘氨酸对照品、丙氨酸对照品、L-羟脯氨酸对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1mL分别含L-羟脯氨酸80μg、甘氨酸0.16mg、丙氨酸70μg、L-脯氨酸0.12mg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粗粉约0.25g，精密称定，置25mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液20mL，超声处理（功率500W，频率40Hz）30分钟，放冷，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀。精密量取2mL，置5mL安瓿中，加盐酸2mL，150℃水解1小时，放冷，移至蒸发皿中，用水10mL分次洗涤，洗液并入蒸发皿中，蒸干，残渣加0.1mol/L盐酸溶液溶解，转移至25mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，即得。36例16，HPLC法测定阿胶中氨基酸的含量37精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各5mL，分别置25mL量瓶中，各加0.1mol/L异硫氰酸苯酯（PITC）的乙腈溶液2.5mL，1mol/L三乙胺的乙腈溶液2.5mL，摇匀，室温放置1小时后，加50%乙腈至刻度，摇匀。取10mL，加正己烷10mL，振摇，放置10分钟，取下层溶液，过滤，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取衍生化后的对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。37精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各5mL，分别置25m38第六节不同类型中药样品的预处理特点固体中药样品的预处理特点半流体中药样品的预处理特点液体中药样品的预处理特点38第六节不同类型中药样品的固体中药样品的预处理特点396.1固体中药样品的预处理特点样品中药材/饮片丸剂特点待检成分存在于细胞中，细胞壁坚硬，成分不易溶出蜜丸中有蜂蜜干扰方法粉碎(2-4#筛)超声处理或加热回流加定量硅藻土1:0.5～2（g/g）稀盐酸浸泡除铁离子396.1固体中药样品的预处理特点样品中药材/饮片丸剂特点40例天王补心丸中五味子的含量测定【处方】丹参当归石菖蒲党参茯苓五味子等取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取适量，精密称定，精密加入两倍量的硅藻土，研匀，取约4.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，密塞，称定重量，超声处理（功率180W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。40例天王补心丸中五味子的含量测定416.1固体中药样品的预处理特点样品片剂颗粒剂特点赋形剂（水溶性），饮片细粉多数经提取、纯化，但有糖/糊精等辅料干扰方法粉碎过筛(去糖衣)选择适宜的溶剂注意提取溶剂的渗透性提取液杂质多时需精制416.1固体中药样品的预处理特点样品片剂颗粒剂特点赋形剂42例复方丹参片中丹参、冰片的鉴别【处方】丹参三七冰片取本品5片，糖衣片除去糖衣，研碎，加乙醚10mL，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2mL使溶解，作为供试品溶液。

例双黄连颗粒中金银花、黄芩的鉴别【处方】金银花黄芩连翘取本品1g，加75%乙醇溶液10mL，摇匀，置水浴中加热振摇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。42例复方丹参片中丹参、冰片的鉴别例双黄连颗粒中金银花、436.1固体中药样品的预处理特点样品散剂栓剂特点剧毒成分和贵重药味成分成分在饮片组织中，分布不均匀注意取样代表性基质干扰的去除方法可用显微鉴别冷浸/热回流/连续回流/超声必要时需精制高低温度法硅藻土拌样提取法酸碱性变化法436.1固体中药样品的预处理特点样品散剂栓剂特点剧毒成分44例

双黄连栓中金银花、黄芩的鉴别【处方】金银花黄芩连翘取本品1粒，加水20mL，置温水浴中，用10%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0～7.5，使熔化，置冷处使基质凝固，滤过，取滤液10mL，加无水乙醇4mL，至水浴中振摇数分钟，放置，取上清液作为供试品溶液。例

九分散中士的宁的含量测定【处方】马钱子粉麻黄乳香（制）没药（制）

取本品约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加三氯甲烷20mL与浓氨试液1mL，轻轻摇匀，称重，于室温放置24小时，再称重，补足三氯甲烷减失的重量，充分振摇，滤过。精密量取续滤液10mL，用硫酸溶液（3→100）分次提取至生物碱提尽，合并硫酸液，加浓氨试液使呈碱性，用三氯甲烷分次提取，合并三氯甲烷液，蒸干，精密加三氯甲烷5mL使残渣溶解，作为供试品溶液。44例双黄连栓中金银花、黄芩的鉴别例九分散中士的456.1固体中药样品的预处理特点样品胶囊剂滴丸特点硬胶囊剂应倾出全部内容物软胶囊剂应用提取溶剂洗涤囊壳基质干扰的去除方法可用显微鉴别冷浸/热回流/连续回流/超声必要时需精制高低温度法硅藻土拌样提取法酸碱性变化法456.1固体中药样品的预处理特点样品胶囊剂滴丸特点硬胶囊46例复方丹参滴丸中丹参的鉴别【处方】丹参三七冰片取本品15丸，置离心管中，加水1mL和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3mL，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液。例藿香正气软胶囊中苍术的鉴别【处方】苍术陈皮厚朴白芷茯苓大腹皮生半夏甘草浸膏等取本品4粒的内容物，加硅藻土1g，研匀，加环己烷20mL，超声处理15分钟，过滤，滤液低温蒸干，残渣加正己烷2mL使溶解，作为供试品溶液。46例复方丹参滴丸中丹参的鉴别例藿香正气软胶囊中苍术的鉴476.2半流体中药样品的预处理特点样品煎膏剂浸膏剂特点炼蜜或糖干扰的去除杂质相对较少方法加适量惰性材料，低温烘干后，按固体样品处理稀释后，按液体样品处理法个别可稀释后直接测定稀释后提取法、回流提取法及柱色谱分离法476.2半流体中药样品的预处理特点样品煎膏剂浸膏剂特点炼48例阿胶三宝膏中黄芪的含量测定【处方】阿胶大枣黄芪取本品10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入等量的硅藻土，拌匀，在60℃烘干（适时搅拌），放冷，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50mL，蒸干，残渣加水25mL使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次25mL，合并正丁醇液，正丁醇液用氨试液洗涤2次，每次25mL，合并氨试液，氨试液再用水饱和的正丁醇25mL提取，合并正丁醇提取液，回收正丁醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。48例阿胶三宝膏中黄芪的含量测定49例刺五加水浸膏浸出物测定【处方】刺五加取本品2.5g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，精密加水25mL使溶散（必要时以玻璃棒搅拌使溶散），再精密加水25mL冲洗瓶壁及玻璃棒，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，置己干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。49例刺五加水浸膏浸出物测定506.2半流体中药样品的预处理特点样品凝胶剂特点基质干扰的去除方法根据水溶性/油溶性基质性质差异，参照栓剂预处理方法506.2半流体中药样品的预处理特点样品凝胶剂特点基质干扰516.3液体中药样品的预处理特点样品合剂/口服液酒剂/酊剂/流浸膏剂特点粘度大，需净化杂质相对较少方法液-液萃取法/柱色谱法调酸碱性后再萃取个别可直接测或加热蒸去乙醇，然后再用适当的有机溶剂抽提/柱层析516.3液体中药样品的预处理特点样品合剂/口服液酒剂/酊52例藿香正气水中甘草的鉴别【处方】苍术陈皮厚朴（姜制）白芷茯苓甘草浸膏等取本品30mL，蒸至无醇味，用乙醚振摇提取2次，每次10mL，弃去乙醚液，用正丁醇振摇提取3次，每次10mL，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次10mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶液2mL使溶解，作为供试品溶液。52例藿香正气水中甘草的鉴别536.3液体中药样品的预处理特点样品注射剂糖浆剂特点杂质相对较少糖干扰的去除方法HPLC可直接测TLC需液-液萃取法/柱色谱法净化液-液萃取（调pH值）蒸馏柱层析536.3液体中药样品的预处理特点样品注射剂糖浆剂特点杂质54例

注射用双黄连（冻干）中金银花的含量测定【处方】连翘金银花黄芩取本品60mg，精密称定，置50mL棕色量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。例小儿止咳糖浆中氯化铵的含量测定【处方】甘草流浸膏桔梗流浸膏氯化铵橙皮酊用内容量移液管精密量取本品10mL，置凯氏烧瓶中，用水冲洗移液管内壁，洗液并入烧瓶中，加水250mL，摇匀，加玻璃珠数粒，再加20%氢氧化钠溶液10mL，立即用氮气球将烧瓶与冷凝管连接，冷凝管的尖端浸入4%硼酸溶液50mL的液面下，加热蒸馏，至2/3的溶液馏出时，将冷凝管提出接近液面，让蒸汽冲洗1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏，馏出液加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定。54例注射用双黄连（冻干）中金银花的含量测定例小儿止556.4外用膏剂的预处理特点样品软膏剂膏药特点基质干扰的去除易溶于三氯甲烷基质干扰的去除方法滤除基质法提取分离法灼烧法离心法三氯甲烷去基质溶剂提取法556.4外用膏剂的预处理特点样品软膏剂膏药特点基质干扰的56例马应龙八宝眼膏中冰片的鉴别【处方】煅炉甘石琥珀人工麝香人工牛黄珍珠冰片等取本品2g，加乙醇5mL，置水浴上加热使其融化后取出，搅拌5分钟，在冰浴中冷却，滤过，滤液作为供试品溶液。例拔毒膏中樟脑的鉴别【处方】金银花连翘大黄桔梗地黄樟脑等取本品2.5g，剪碎，加乙醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。56例马应龙八宝眼膏中冰片的鉴别例拔毒膏中樟脑的鉴别576.4外用膏剂的预处理特点样品贴膏剂特点基质干扰的去除方法溶剂提取576.4外用膏剂的预处理特点样品贴膏剂特点基质干扰的去除58例舒康贴膏的鉴别【处方】山楂核精剪取本品7cm×20cm，除去盖衬，平展贴于医用纱布上，剪切成小片，置具塞锥形瓶中，加入5%氢氧化钠溶液40mL，超声处理30分钟，放冷，倾出液体，边振摇边滴加盐酸，调节pH值至5～6，转移置500mL圆底烧瓶中，连接挥发油测定器，自测定器上端加水充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，再加乙酸乙酯1mL，微沸回流30分钟，放冷，分取乙酸乙酯层，作为供试品溶液。58例舒康贴膏的鉴别59样品气雾剂/喷雾剂特点溶液型样品较纯净混悬型样品，取样前应振摇以保证取样的均匀性方法超声法等6.5气雾剂和喷雾剂的预处理特点59样品气雾剂/喷雾剂特点溶液型样品较纯净方法超声法等6.560例

麝香祛痛气雾剂中樟脑、薄荷脑、冰片的含量测定

【处方】人工麝香红花樟脑独活冰片龙血竭薄荷脑地黄等取本品，除去盖帽，冷却至5℃，在铝盖上钻一小孔，插入连有干燥橡皮管的注射针头（勿与药液面接触），橡皮管另一端放入水中，待抛射剂缓缓排除后，除去铝盖，精密量取药液1mL，置50mL量瓶中，精密加入内标溶液5mL，加无水乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。60例麝香祛痛气雾剂中樟脑、薄荷脑、冰片的含量测定第二章-中药分析中供试品的制备00课件

第二章中药分析中供试品的制备中药分析教研室621讲授提纲第一节取样第二节样品的提取第三节样品的净化第四节样品提取液的浓缩第五节样品的衍生化第六节不同类型中药样品的预处理特点63讲授提纲第一节取样2样品预处理有效释放被测成分，并制成便于分析测定状态除杂、纯化，提高重现性和准确度富集、浓缩、衍生化，提高灵敏度和选择性使试样的形式及所溶剂符合分析测定要求64最大限度地保留被测成分，除去干扰物质，将被测定成分浓缩至高于分析方法最小检测限所需浓度样品预处理有效释放被测成分，并制成便于分析测定状态除杂、纯化第一节取样65取样鉴别含量测定检查提取纯化样品粉碎科学性、真实性、代表性均匀合理第一节取样4取样鉴别含量测定检查提取纯化样品粉碎科学一、抽样66常用术语包装件、最小包装批、抽样批抽样单元、最终样品抽样单元的确定随机抽样法：简单、分段偶遇抽样法针对性抽样抽样量一般药材和饮片：100～500g/包粉末状药材和饮片：25～50g/包贵重药材和饮片：5～10g/包抽样方法中药材和饮片的抽样中药提取物的抽样中药制剂的抽样一、抽样5常用术语包装件、最小包装批、抽样批抽样单元、最终样

67二、样品的粉碎使所取样品均匀、有代表性，提高精密度和准确度粉碎机匀浆机研钵能快而充分地提取样品中被测组分6二、样品的粉碎使所取样品均匀、有代表性，提高精密度和准确取样均匀合理气体固体，圆锥四分法半液体，硅藻土拌液体，混合均匀68三、取样保留一半数量作留样观察,时间为半年或一年取样气体固体，圆锥四分法半液体，硅藻土拌液体，混合均匀7三、浸渍法操作简单，适于热不稳定的样品费时、费溶剂、提取不充分，含测少用超声提取法简便、快速、高效，通常30min应规定提取功率和提取频率回流提取法提取效率高，时间短，但杂质较多对热不稳定或具有挥发性成分不宜使用69第二节样品提取浸渍法操作简单，适于热不稳定的样品费时、费溶剂、提取不充分，70供试品溶液的制备

取本品粉末(过二号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇10ml，超声处理(功率250W，频率50kHz)20分钟，滤过，滤渣和滤纸再加甲醇10ml，同法超声处理一次，滤过，加甲醇适量洗涤2次，合并滤液和洗液，转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。（荆芥项下胡薄荷酮含量测定）9供试品溶液的制备取本品粉末(过二号筛)约0.5g，精连续回流提取法提取效率高，所需溶剂少，提取杂质少，操作简便受热易分解的成分不宜使用水蒸气蒸馏法提取杂质少，操作简便适用于挥发性成分，可利用盐析作用消化法降低有机物干扰，分干法和湿法适用于以元素为测定对象71第二节样品提取连续回流提取法提取效率高，所需溶剂少，提取杂质少，操作简便受72供试品溶液的制备

取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml……（黄芪中黄芪甲苷）11供试品溶液的制备超临界流体萃取法（CO2）安全，价廉，易于操作，环保较适用于中低极性成分的提取加压溶剂萃取法提取率高价格昂贵微波辅助萃取法快速，省溶剂、多样品同时提取萃取溶剂选择性高，可与HPLC相连73第二节样品提取超临界流体萃取法（CO2）安全，价廉，易于操作，环保较适用于74超临界流体萃取法（CO2）设备加压溶剂萃取法设备微波辅助萃取法设备13超临界流体萃取法加压溶剂萃取法设备微波辅助萃取法设备75不同分析目的样品的提取实验目的方法要求常用方法供鉴别用针对待检成分的溶解性能选择适宜的提取溶剂，提取方法力求简便、易操作超声，加热回流提取，浸渍法供杂质检查用无机杂质检查用消化法；有机杂质的检查可按常规的鉴别或含量测定的方法提取定量杂质：定量方法定性杂质：鉴别方法供含量测定用特别强调待测成分要提取完全超声处理法、加热回流法和连续回流法14不同分析目的样品的提取实验目的方法要求常用方法供鉴别用针第三节样品的分离净化沉淀法蒸馏法液-液萃取法色谱法消化法76第三节样品的分离净化沉淀法15771、沉淀法

利用某些试剂与被测成分或杂质生成沉淀，分离沉淀或保留溶液以得到精制的方法例水苏碱+雷氏盐生物碱雷氏盐沉淀H+161、沉淀法利用某些试剂与被测成分或杂质生782、萃取法

利用被测成分与干扰成分溶解性能的不同进行分离，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法例生物碱盐氨水H2O172、萃取法利用被测成分与干扰成分溶解性能的79正丁醇

——用于皂苷类醋酸乙酯——用于黄酮类三氯甲烷——用于生物碱类乙醚、石油醚——用于挥发油（1）萃取溶剂的选择直接萃取：18正丁醇——用于皂苷类醋酸乙酯——用于黄酮类三氯甲80（2）水相pH的选择酸性成分——

比其pKa低1~2个pH单位碱性成分——

比其pKa高1~2个pH单位19（2）水相pH的选择酸性成分——碱性成分——81（3）仪器和提取次数（4）乙醇提取液——先挥去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鉴别——1次含量测定——3~4次20（3）仪器和提取次数（4）乙醇提取液——先挥去乙醇（5）82离子对萃取：萃取（离子对）有机相有机酸生物碱+离子对试剂（离子对）水相

21离子对萃取：萃取（离子对）有机相有机酸生物碱+离子对83例，华山参片中生物碱含量测定取本品40片，除去糖衣，精密称定，研细，精密量取适量（约相当于12片的重量），置具塞锥形瓶内，精密加入枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）25mL，振摇5分钟，放置过夜，用干燥滤纸滤过，取续滤液，精密量取续滤液2mL，置分液漏斗中，精密加枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）10mL，再精密加入0.04%溴甲酚绿溶液2mL，摇匀，用10mL三氯甲烷振摇提取5分钟，待溶液完全分层后，分取三氯甲烷液，用三氯甲烷湿润的滤纸滤入25mL量瓶中，再用三氯甲烷提取3次，每次5mL，依次滤入量瓶中，并用三氯甲烷洗涤滤纸，滤入量瓶中，加三氯甲烷至刻度。22例，华山参片中生物碱含量测定843、色谱法（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分（2）保留杂质于柱上---简便，精制效果好，被普遍使用233、色谱法（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶85常用固定相硅胶氧化铝键合相硅胶大孔吸附树脂-皂苷类聚酰胺-黄酮类硅藻土、纤维素200-100目,1-10g机理：吸附24常用固定相硅胶键合相硅胶大孔吸附树脂-皂苷类200-1086例

烧伤灵酊中大黄素的含量测定【处方】虎杖黄柏冰片精密量取本品2mL，加硅胶（色谱用，60～160目）1g，置温水浴上蒸干，加在硅胶柱（色谱用，60～160目，2g，内径为1.7cm）上，用石油醚（60～90℃）-甲酸乙酯-甲酸（100:100:2）混合液90mL分次减压洗脱，收集洗脱液，置100mL量瓶中，并用混合溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。25例烧伤灵酊中大黄素的含量测定87例复脉定胶囊中黄芪含量测定【处方】党参黄芪远志桑椹川芎

取本品20粒的内容物，精密称定，研细，混匀，取约2g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40mL，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40mL，合并正丁醇液，用氨试剂充分洗涤2次，每次40mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，通过D101型大孔树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），用水50mL洗脱，再用40%乙醇30mL洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。26例复脉定胶囊中黄芪含量测定884、固相萃取法通过吸附剂与目标化合物之间的相互作用来保留/吸附疏水作用：C18、C8、silica离子交换作用：SAX,SCX,COOH，NH2等物理吸收：Florsil、Alumina等274、固相萃取法通过吸附剂与目标化合物之间的相互作用来保留89Sep-PakC18柱：30-60um一般操作程序：（1）柱的活化（2）上样（3）清洗（4）洗脱28Sep-PakC18柱：30-60um90例新雪颗粒中栀子的鉴别【处方】磁石石膏滑石南寒水石硝石栀子等取本品1.5g，研细，加正己烷10mL，充分振摇，放置30分钟，滤过，滤渣加甲醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水5mL使溶解，离心15分钟（转速为每分钟3000转），上清液通过十八烷基硅烷键合硅胶固相萃取小柱（500mg），以水10mL洗脱，弃去洗液，再用甲醇15mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。29例新雪颗粒中栀子的鉴别915、固相微萃取法

SPME是在SPE基础上发展起来的，保留了SPE的优点，克服了SPE样品预处理技术的缺陷，即无需柱填充物和使用溶剂解吸被测组分的前处理，它能直接从样品中采集挥发和非挥发性的化合物，然后直接在GC、GC/MS、HPLC和HPCE上分析，集采样、提取、浓缩、进样于一体。优点：费用低、操作简单、省时、环保缺点：离子交换作用：SAX,SCX,

COOH，

NH2等305、固相微萃取法SPME是在SPE基础上发展起来的，保第四节样品提取液的浓缩方法适用成分适用检测备注水浴蒸发热稳定性好的成分薄层自然挥散小体积提取液或挥发性强溶剂，乙醚薄层减压蒸发对热不稳定的样品残留分析温度低、速度快气流吹蒸法少量液体，氮吹法特别适用于结构不稳定、易氧化的化学成分定量氮气流可以防止氧化冷冻干燥热不稳定的生物样品定量干燥后的物料保持原来的化学组成和物理性质；热量消耗比其他干燥方法少92第四节样品提取液的浓缩方法适用成分适用检测备注水浴蒸发热稳例当归流浸膏的鉴别取本品3mL，加1%碳酸氢钠溶液50mL，充分振荡，用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙醚振摇提取2次，每次20mL，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。93例当归流浸膏的鉴别32第四节样品的衍生化94种类衍生化目的衍生化方法提高成分的挥发性增加成分的稳定性生成非对映异构体硅烷化酰化烷基化不对称衍生气相例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量

－甲酯化

校正因子测定：取油酸对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1mL含3mg的溶液。精密量取5mL，置10mL具塞试管中，用氮气吹干，加入0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液2mL，置60℃水浴中皂化25分钟，至油珠全部消失，放冷，加15%三氯化硼乙醚溶液2mL，置60℃水浴中甲酯化2分钟，第四节样品的衍生化33种类衍生化目的衍生化方法提高成分的挥95续例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量

放冷，精密加入正己烷2mL，振摇，加饱和氯化钠溶液1mL，振摇，静置，取上层溶液作为对照品溶液。精密称取苯甲酸苯酯适量，加正己烷制成每1mL含8mg的溶液，作为内标溶液。精密量取对照品溶液和内标溶液各1mL，摇匀，吸取1μL，注入气相色谱仪，测定，计算校正因子。34续例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量96种类衍生化目的反应要求提高检测的灵敏度改善色谱分离效果反应要求不苛刻，且迅速定量单一衍生化产物，副产物不干扰衍生化试剂易得、通用性好高效液相衍生化方法在线离线柱前柱后紫外衍生化荧光衍生化非对映衍生化35种类衍生化目的反应要求提高检测的灵敏度反应要求不苛刻，且97例16，HPLC法测定阿胶中氨基酸的含量对照品溶液的制备：取L-羟脯氨酸对照品、甘氨酸对照品、丙氨酸对照品、L-羟脯氨酸对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1mL分别含L-羟脯氨酸80μg、甘氨酸0.16mg、丙氨酸70μg、L-脯氨酸0.12mg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粗粉约0.25g，精密称定，置25mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液20mL，超声处理（功率500W，频率40Hz）30分钟，放冷，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀。精密量取2mL，置5mL安瓿中，加盐酸2mL，150℃水解1小时，放冷，移至蒸发皿中，用水10mL分次洗涤，洗液并入蒸发皿中，蒸干，残渣加0.1mol/L盐酸溶液溶解，转移至25mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，即得。36例16，HPLC法测定阿胶中氨基酸的含量98精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各5mL，分别置25mL量瓶中，各加0.1mol/L异硫氰酸苯酯（PITC）的乙腈溶液2.5mL，1mol/L三乙胺的乙腈溶液2.5mL，摇匀，室温放置1小时后，加50%乙腈至刻度，摇匀。取10mL，加正己烷10mL，振摇，放置10分钟，取下层溶液，过滤，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取衍生化后的对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。37精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各5mL，分别置25m99第六节不同类型中药样品的预处理特点固体中药样品的预处理特点半流体中药样品的预处理特点液体中药样品的预处理特点38第六节不同类型中药样品的固体中药样品的预处理特点1006.1固体中药样品的预处理特点样品中药材/饮片丸剂特点待检成分存在于细胞中，细胞壁坚硬，成分不易溶出蜜丸中有蜂蜜干扰方法粉碎(2-4#筛)超声处理或加热回流加定量硅藻土1:0.5～2（g/g）稀盐酸浸泡除铁离子396.1固体中药样品的预处理特点样品中药材/饮片丸剂特点101例天王补心丸中五味子的含量测定【处方】丹参当归石菖蒲党参茯苓五味子等取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取适量，精密称定，精密加入两倍量的硅藻土，研匀，取约4.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，密塞，称定重量，超声处理（功率180W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。40例天王补心丸中五味子的含量测定1026.1固体中药样品的预处理特点样品片剂颗粒剂特点赋形剂（水溶性），饮片细粉多数经提取、纯化，但有糖/糊精等辅料干扰方法粉碎过筛(去糖衣)选择适宜的溶剂注意提取溶剂的渗透性提取液杂质多时需精制416.1固体中药样品的预处理特点样品片剂颗粒剂特点赋形剂103例复方丹参片中丹参、冰片的鉴别【处方】丹参三七冰片取本品5片，糖衣片除去糖衣，研碎，加乙醚10mL，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2mL使溶解，作为供试品溶液。

例双黄连颗粒中金银花、黄芩的鉴别【处方】金银花黄芩连翘取本品1g，加75%乙醇溶液10mL，摇匀，置水浴中加热振摇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。42例复方丹参片中丹参、冰片的鉴别例双黄连颗粒中金银花、1046.1固体中药样品的预处理特点样品散剂栓剂特点剧毒成分和贵重药味成分成分在饮片组织中，分布不均匀注意取样代表性基质干扰的去除方法可用显微鉴别冷浸/热回流/连续回流/超声必要时需精制高低温度法硅藻土拌样提取法酸碱性变化法436.1固体中药样品的预处理特点样品散剂栓剂特点剧毒成分105例

双黄连栓中金银花、黄芩的鉴别【处方】金银花黄芩连翘取本品1粒，加水20mL，置温水浴中，用10%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0～7.5，使熔化，置冷处使基质凝固，滤过，取滤液10mL，加无水乙醇4mL，至水浴中振摇数分钟，放置，取上清液作为供试品溶液。例

九分散中士的宁的含量测定【处方】马钱子粉麻黄乳香（制）没药（制）

取本品约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加三氯甲烷20mL与浓氨试液1mL，轻轻摇匀，称重，于室温放置24小时，再称重，补足三氯甲烷减失的重量，充分振摇，滤过。精密量取续滤液10mL，用硫酸溶液（3→100）分次提取至生物碱提尽，合并硫酸液，加浓氨试液使呈碱性，用三氯甲烷分次提取，合并三氯甲烷液，蒸干，精密加三氯甲烷5mL使残渣溶解，作为供试品溶液。44例双黄连栓中金银花、黄芩的鉴别例九分散中士的1066.1固体中药样品的预处理特点样品胶囊剂滴丸特点硬胶囊剂应倾出全部内容物软胶囊剂应用提取溶剂洗涤囊壳基质干扰的去除方法可用显微鉴别冷浸/热回流/连续回流/超声必要时需精制高低温度法硅藻土拌样提取法酸碱性变化法456.1固体中药样品的预处理特点样品胶囊剂滴丸特点硬胶囊107例复方丹参滴丸中丹参的鉴别【处方】丹参三七冰片取本品15丸，置离心管中，加水1mL和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3mL，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液。例藿香正气软胶囊中苍术的鉴别【处方】苍术陈皮厚朴白芷茯苓大腹皮生半夏甘草浸膏等取本品4粒的内容物，加硅藻土1g，研匀，加环己烷20mL，超声处理15分钟，过滤，滤液低温蒸干，残渣加正己烷2mL使溶解，作为供试品溶液。46例复方丹参滴丸中丹参的鉴别例藿香正气软胶囊中苍术的鉴1086.2半流体中药样品的预处理特点样品煎膏剂浸膏剂特点炼蜜或糖干扰的去除杂质相对较少方法加适量惰性材料，低温烘干后，按固体样品处理稀释后，按液体样品处理法个别可稀释后直接测定稀释后提取法、回流提取法及柱色谱分离法476.2半流体中药样品的预处理特点样品煎膏剂浸膏剂特点炼109例阿胶三宝膏中黄芪的含量测定【处方】阿胶大枣黄芪取本品10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入等量的硅藻土，拌匀，在60℃烘干（适时搅拌），放冷，精密加入甲醇100mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50mL，蒸干，残渣加水25mL使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次25mL，合并正丁醇液，正丁醇液用氨试液洗涤2次，每次25mL，合并氨试液，氨试液再用水饱和的正丁醇25mL提取，合并正丁醇提取液，回收正丁醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。48例阿胶三宝膏中黄芪的含量测定110例刺五加水浸膏浸出物测定【处方】刺五加取本品2.5g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，精密加水25mL使溶散（必要时以玻璃棒搅拌