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文档简介
第十单元现代生物科技专题
第41课时基因工程的基本工具和基本操作程序高频考点突破考点一基因工程的概念理解和理论基础1.基因工程的概念理解(1)操作环境:体外——关键步骤“表达载体的构建”的环境。(2)优点①与杂交育种相比:克服远缘杂交不亲和障碍。②与诱变育种相比:定向改造生物性状。(3)操作水平:分子水平。(4)原理:基因重组。(5)本质:甲(供体提供目的基因)乙(受体表达目的基因),即基因未变、合成蛋白质未变,只是合成场所的转移。2.基因工程的基本原理和理论基础概括如下图
提醒
若题目强调“目的基因”的表达过程,则只包括“转录和翻译”两个过程,不包括目的基因的复制。对位训练1.目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定与检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是 ()①检测受体细胞中是否有目的基因②检测受体细胞中是否有致病基因③检测目的基因是否转
录出了mRNA④检测目的基因是否翻译成蛋白质A.①②③ B.②③④C.①③④ D.①②④C2.科学家通过基因工程的方法,能使大肠杆菌产生人的胰岛素。以下叙述错误的是 ()A.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒B.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达C.DNA连接酶和限制性核酸内切酶都是构建重组质粒必需的工具酶D.目的基因的检测与鉴定表达过程中没有发生碱基互补配对D考点二基因工程的操作工具1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)化学本质:蛋白质。
(3)作用(4)作用特点:特异性,即限制酶可识别特定的脱氧核苷酸序列,切割特定位点。(5)切割方式催化作用,所以可重复利用可用于DNA的切割获取目的基因和载体的切割错位切:产生两个相同的黏性末端平切:形成平末端
提醒
①切割的化学键为磷酸二酯键。②在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶,目的是产生相同的黏性末端。③将一个基因从DNA分子上切割下来,需要2个限制酶,同时产生4个黏性末端。④不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同,同一个DNA分子用不同的限制酶产生的黏性末端不相同。2.DNA连接酶——“分子缝合针”常用类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能连接黏性末端连接黏性末端或平末端结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
拓展提升
DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶DNA聚合酶作用实质都是催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键是否需模板不需要需要连接DNA链双链单链作用过程在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3′端的羟基上,形成磷酸二酯键作用结果将两个DNA片段连接成重组DNA分子合成新的DNA分子3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”(1)类型
提醒
①质粒本质是DNA,不是细胞器;②特点:小型环状。(2)功能:将目的基因导入受体细胞。(3)应具备条件①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制;②有一个至多个限制酶的切割位点,以便于与外源基因连接;
③有特殊的遗传标记基因,供重组DNA的检测和鉴定。最常用载体:质粒其他载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等提醒①一般来说说,天然载载体往往不不能满足人人类的所有要求,因此人们们根据不同同的目的和和需要,对对某些天然的载载体进行人人工改造。。②常见的标标记基因有有抗生素基基因、产生生特定颜色色的表达产物物基因、发发光基因等等。③作为载体体必须具有有多个限制制酶切点,而且每种种酶的切点最好好只有一个个。因为某某种限制酶酶只能识别别单一切点,若载体上上有一个以以上的酶切切点,则切切割重组后可能能丢失某些些片段,若若丢失的片片段含复制制起点区,则进进入受体细细胞后便不不能自主复复制。一个个载体若只有某某种限制酶酶的一个切切点,则酶酶切后既能能把环打开接纳纳外源DNA片段,又不会丢丢失自己的的片段。④注意与细细胞膜上载载体的区别别,两者的的化学本质质和作用都不相相同。⑤质粒能自自我复制,既可在自自身细胞、、受体细胞胞也可在体外复复制。对位训练3.下列关关于DNA连接酶作用用的叙述,,正确的是是())A.将单个个核苷酸加加到某DNA片段末端,,形成磷酸酸二酯键B.将断开开的两个DNA片段的骨架架连接起来来,重新形成磷酸二二酯键C.连接两两条DNA链上碱基之之间的氢键键D.只能将将双链DNA片段互补的的黏性末端端之间连接接起来,而不不能将双链链DNA片段平末端端之间进行行连接B考点三基基因工程程的基本操操作程序1.基因工工程图解:抗虫棉的的培育过程程2.基本操操作程序(1)目的的基因的获获取①从基因文文库(基因因组文库或或cDNA文库)中中获取文库类型cDNA文库基因组文库文库大小小大基因中启动子无有基因中内含子无有基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种之间的基因交流可以部分基因可以说明基因文库的组建过程就包含基因工程的基本操作步骤。从基因文库中获取目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性②人工合成成目的基因因:常用的的方法有化化学合成法法和反转录法。。化学合成法法:蛋白质质氨氨基基酸序列RNA碱基序列DNA碱基序列列用用4种脱氧核核苷酸酸人人工工合合成成目目的的基基因因反转转录录法法:分分离离出出供供体体细细胞胞mRNA单单链链DNA合成成目目的的基基因因分析推测推测逆转录酶DNA聚合酶③PCR扩扩增增技技术术与与DNA复复制制的的比比较较PCR技术DNA复制相同点原理DNA复制(碱基互补配对)原料四种游离的脱氧核苷酸条件模板、ATP、酶、原料、引物不同点解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化场所体外复制(PCR扩增仪)主要在细胞核内酶热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有的DNA聚合酶结果在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子(2)基基因因表表达达载载体体的的构构建建————最最核核心心步步骤骤①基基因因表表达达载载体体的的组组成成:启启动动子子、、目目的的基基因因、、终终止止子以以及及标标记记基基因因等等。。提醒醒①与与载载体体相相比比较较,增增加加启启动动子子、、目目的的基基因因和和终止止子子三三个个基基因因片片段段,其其功功能能各各不不相相同同。。②启启动动子子(DNA片片段段)≠≠起起始始密密码码子子(RNA);终终止止子子(DNA片片段段)≠≠终终止止密密码码子子(RNA)。。②基基因因表表达达载载体体的的构构建建方方法法提醒醒该过过程程把把三三种种工工具具(只只有有两两种种工工具具酶酶)全全用用上了,是是最核心心、最关关键的一一步,在在体外进进行。(3)将将目的基基因导入入受体细细胞细胞类型常用方法受体细胞转化过程植物细胞农杆菌转化法体细胞将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上动物细胞显微注射技术受精卵将含有目的基因的表达载体提纯→取卵→获得受精卵→显微注射→早期胚胎培养→胚胎移植→发育成为具有新性状的动物微生物细胞Ca2+处理增大细胞壁通透性原核细胞或酵母菌用Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收提醒①唯一不不涉及到到碱基互互补配对的操操作步骤。②微生物物做受体体细胞主主要是个个体微小小,代谢谢旺盛,繁殖速度度快,获获得目的的基因产产物多。。③植物细细胞还可可用基因因枪法和和花粉管管通道法法。(4)目目的基因因的检测测和表达达对位训练练4.下列有有关基因工工程技术的的叙述,正正确的是(())A.重组DNA技术所用的的工具酶是是限制酶、、连接酶和载体B.所有的的限制酶都都只能识别别同一种特特定的核苷苷酸序列C.选用细细菌作为重重组质粒的的受体细胞胞是因为细细菌繁殖快D.只要目目的基因进进入受体细细胞就能实实现表达C5.利用外外源基因在在受体细胞胞中表达,,可生产人人类所需要的产品品。下列选选项中能说说明目的基基因完成了了在受体细胞胞中表达的的是(())A.棉花二二倍体细胞胞中检测到到细菌的抗抗虫基因B.大肠杆杆菌中检测测到人胰岛岛素基因及及其mRNAC.山羊乳乳腺细胞中中检测到人人生长激素素DNA序序列D.酵母菌菌细胞中提提取到人干干扰素蛋白白D解题思路探探究思维误区警警示易错分析基因工程中中易错点辨辨析不清(1)基因因工程中有有3种工具具,但工具具酶只有2种。(2)工具具酶本质为为蛋白质,载体本质质为小型DNA分子子,但不一一定是环状状。(3)标记记基因的作作用——筛筛选、检测测目的基因因是否导入入受体细胞胞,常见的的有抗生素素抗性基因因、发光基基因,表达产产物为带颜颜色物质等等。(4)受体体细胞中常常用植物受受精卵或体体细胞(经经组织培养养)、动物物受精卵(一般不用用体细胞)、微生物物——大肠肠杆菌、酵酵母菌等,但要合成成糖蛋白、、有生物活活性的胰岛岛素则必需需用真核生生物酵母菌菌——需内内质网、高高尔基体的的加工、分分泌。一般般不用支原原体,原因因是它营寄寄生生活;一定不能能用哺乳动动物成熟红红细胞,原原因是它无无细胞核,不能合成成蛋白质。。纠正训练1.(2009··浙江卷,3)下列关于于基因工程程的叙述,错误的是()A.目的基基因和受体体细胞均可可来自动、、植物或微生物B.限制性核核酸内切酶和和DNA连接接酶是两类常常用的工具酶C.人胰岛素素原基因在大大肠杆菌中表表达的胰岛素素原无生物活性D.载体上的的抗性基因有有利于筛选含含重组DNA的细胞和促进目的基基因的表达解析基因工程中目目的基因和受受体细胞均可可来自动、植物或微微生物;常用用的工具酶是是限制性核酸酸内切酶和DNA连接酶;人人胰岛素原基基因在大肠杆杆菌中表达的胰岛素素原无生物活活性,只有经经过一定的物物质激活以后,才才有生物活性性。载体上的的抗性基因主主要是有利于筛选选含重组DNA的细胞,不能促进目目的基因的表达。所所以D错误。。答案D2.(2009·重重庆卷,2)下表有关基基因表达的选选项中,不可能的是()基因表达的的细胞表达产物A细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶C动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素D兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔血红蛋白解析细菌抗虫蛋白白基因可通过过转基因技术术转入棉花体内,在在棉花的叶肉肉细胞中表达达产生细菌抗抗虫蛋白,使棉花花具有抗虫能能力;人酪氨氨酸酶基因可可在正常人的皮肤肤细胞中表达达产生酪氨酸酸酶,酪氨酸酸酶催化酪氨酸转转化为黑色素素;动物胰岛岛素基因可通通过转基因技术转转移到大肠杆杆菌体内,在在大肠杆菌工工程菌细胞中合成成动物胰岛素素;兔属于哺哺乳动物,其其成熟的红细胞中中没有细胞核核,所以不可可能表达出血血红蛋白。答案D3.(2009·安安徽卷,4)2008年年诺贝尔化学学奖授予了“发现和发展展了水母绿色色荧光蛋白””的三位科学学家。如果将绿绿色荧光蛋白白基因的片段段与目的基因因连接起来组成成一个融合基基因,再将该该融合基因转转入真核生物细胞胞内,表达出出的蛋白质就就会带有绿色色荧光。绿色荧光光蛋白在该研研究中的主要要作用是()A.追踪目的的基因在细胞胞内的复制过过程B.追踪目的的基因插入到到染色体上的的位置C.追踪目的的基因编码的的蛋白质在细细胞内的分布布D.追踪目的的基因编码的的蛋白质的空空间结构解析将绿色荧光蛋蛋白基因的片片段与目的基基因连接起来组成一一个融合基因因,将该融合合基因转入真真核生物细胞内,表达出的蛋蛋白质带有绿绿色荧光,从从而可以追踪目的的基因编码的的蛋白质在细细胞内的分布。故C正确确。答案C知识综合应用重点提示通过“抗虫作作物培育过程程的有关基因因工程知识””的考查,提提升“综合运运用所学知识识解决自然界界和社会生活活中有关生物物学问题”的的能力。典例分析(2009·江江苏卷,34)苏云金杆菌菌(Bt)能能产生具有杀杀虫能力的毒素素蛋白。下图图是转Bt毒毒素蛋白基因因植物的培育过程程示意图(ampr为抗氨苄青霉霉素基因),据图回答下列列问题。(1)将图中中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切切后,反应管中有种DNA片段段。(2)图中②②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶酶连接的过程,此过程可获获得种重组质粒;如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切,目目的基因与质质粒连接后可获得种重组质粒。。(3)目的基基因插入质粒粒后,不能影影响质粒的。(4)图中③③的Ti质粒粒调控合成的的vir蛋白白,可以协助助带有目的基因因的T-DNA导入植物物细胞,并防防止植物细胞中对T-DNA的降解。(5)已知转转基因植物中中毒素蛋白只只结合某些昆昆虫肠上皮细胞表面面的特异受体体,使细胞膜膜穿孔,肠细细胞裂解,昆虫死死亡。而该毒毒素蛋白对人人类的风险相相对较小,原因是是人类肠上皮皮细胞。(6)生产上上常将上述转转基因作物与与非转基因作作物混合播种,其目目的是降低害害虫种群中的的基因频率的增长长速率。解析本题重点考查查转基因技术术的相关知识识,需特别注意基因工工程的步骤、、DNA的复复制、基因工工程的操作工具等知知识。本题需需特别注意图图示过程,从从中获取有效信息息,然后结合合课本知识即即可正确解答答。答案(1)4(2)21(3)复制(4)DNA水解酶(5)表面无相应应的特异性受受体(6)抗性定时检测组题说明特别推荐综合应用题———1、3;;知识拓展提提升题——2、6、8。考点题号基因工程的工具1~8基因工程的步骤1.(2009·福福建理综,32)转基因抗病病香蕉的培育育过程如图所示。质质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶酶切割位点。。请回答:(1)构建含含抗病基因的的表达载体A时,应选用用限制酶,对进行切割。(2)培养基基中的卡那霉霉素会抑制香香蕉愈伤组织织细胞的生长,欲利利用该培养基基筛选已导入入抗病基因的的香蕉细胞,应使使基因表达载载体A中含有有,作为标记基因因。(3)香蕉组组织细胞具有有,因此,可以利用组织织培养技术将将导入抗病基基因的香蕉组组织细胞培育成成植株。图中中①、②依次次表示组织培培养过程中香蕉蕉组织细胞的的。解析本题考查基因因工程的有关关知识。(1)从图可看出,只有PstⅠ、EcoRⅠ两种酶能能保持抗病基基因结构的完整性,所以构建含含抗病基因的的表达载体A时,应选用限制酶酶PstⅠ、EcoRⅠ两种酶,对抗病基因因的DNA和质粒粒进行切割。。(2)卡那霉霉素能抑制香香蕉愈伤组织织细胞的生长长,欲利用该培养基基筛选已导入入抗病基因的的香蕉细胞,应使基因表达载载体A中含有有抗卡那霉素素基因,以此此作为标记基因。。(3)香蕉组组织细胞具有有全能性,因因此,可以利利用组织培养技术将导导入抗病基因因的香蕉组织织细胞培育成成植株。图中①①、②依次表表示组织培养养过程中香蕉蕉组织细胞的脱脱分化和再分分化。答案(1)PstⅠ、EcoRⅠ含含抗病基因因的DNA、、质粒(2)抗卡那霉霉素基因(3)全能性脱分化、再分分化2.(2008·江江苏卷,32)将动物致病病菌的抗原基基因导入马铃薯制成植植物疫苗,饲饲喂转基因马马铃薯可使动动物获得免疫力。。以下是与植植物疫苗制备备过程相关的的图和表。表1引物物对序列表引物对AP1AACTGAAATGTAGCTATCP2TTAAGTCCATTACTCTAG引物对BS1GTCCGACTAGTGGCTGTGS2AGCTGGCGTTTAGCCTCG请根据以上图图表回答下列列问题:(1)在采用用常规PCR方法扩增目目的基因的过过程中,使用的DNA聚聚合酶不同于于一般生物体体内的DNA聚合酶,其最主要的特特点是。(2)PCR过程中退火火(复性)温温度必须根据据引物的碱基数量和种类类来设定。表表1为根据模模板设计的两两对引物序列,图图2为引物对对与模板结合合示意图。请请判断哪一对引物物可采用较高高的退火温度度?。限制酶AluIEcoRIPstISmaI切割位点AG↓CTTC↑GAG↓AATTCCTTAA↑GCTGCA↓GG↑ACGTCCCC↓GGGGGG↑CCC(3)图1步步骤③所用的的DNA连接接酶对所连接接的DNA两两端的碱基序列列是否有专一一性要求?。(4)为将外外源基因转入入马铃薯,图图1步骤⑥转转基因所用的细菌B通常为。(5)对符合合设计要求的的重组质粒T进行酶切。。假设所用的酶均可可将识别位点点完全切开,,请根据图1中标示的酶切位位点和表2所所列的识别序序列,对以下下酶切结果作出判判断。①①采用EcoRI和PstI酶切,得到到种DNA片断断。②采用EcoRI和SmaI酶切,得到到种DNA片断断。解析(1)PCR技术中需通通过高温使DNA解旋,故所用DNA聚合合酶的耐热性性必须要好。。(2)退火火温度与时间,取决于于引物的长度度、碱基组成成及其浓度,还有靶基因序列列的长度。含含有(G+C)多的引物物,可采用相对较高的的退火温度。。(3)DNA聚合酶与与限制酶不同,从将DNA由5’端点开始复制制到3’端的酶,不具具有特异性。(4)农杆菌菌的细胞中有有一段T-DNA,农杆杆菌通过侵染植植物伤口进入入细胞后,可可将T-DNA插入到植物基因中中,因此,农农杆菌是一种种天然的植物物遗传转化体系,常用作植物物转基因工程程中的载体。。(5)对于重重组质粒,EcoRI能切开M和X连接处处,PstI能在M和N之间间专一切点处处切开,将DNA分为两两个片段;EcoRI仍能切开开M处,SmaI则不能识别别N和Y重新新结合形成的连接点点,只能得到到1个DNA片段。答案(1)耐高温温(2)引物对对B(3)否(4)农杆菌菌(5)①2②②13.基因工程程中,需使用用的限制酶切切割目的基因因和质粒,便于重组和筛筛选。已知限限制酶Ⅰ的识识别序列和切切点是—G↓GATCC——,限制酶ⅡⅡ的识别序列列和切点是—↓GATC—。。(1)根据已已知条件和图图回答:①上述质粒用用限制酶切割,目的基基因用限制酶切割。②将切下的目目的基因片段段插入质粒的的切口处,还还要加入适量的。③请指出质粒粒上至少要有有一个标记基基因的理由::。(2)不同生生物的基因可可以拼接的结结构基础是。(3)大肠杆杆菌是首先成成功表达外源源基因的宿主主菌,但不能表达结结构复杂的蛋蛋白质,哺乳乳类细胞、昆昆虫细胞表达系统统虽然能表达达结构复杂的的哺乳类细胞胞蛋白,但操作作复杂,表达达水平低,不不易推广使用用。基因工程中常选选用酵母菌作作为受体细胞胞,请从细胞胞结构等方面分析析用酵母菌作作受体细胞能能克服上述不不足的理由:。答案(1)①ⅠⅡⅡ②DNA连接酶酶③检测测重组质粒(或目的基基因)是否导导入受体细胞胞(2)DNA结结构基本相同(其其他合理答案案均可)(3)①单单细胞真核生物,含有加加工、修饰蛋蛋白质的内质质网和高尔基基体;②繁殖速度快,能很快得得到大量的目目的基因;③③培养成本低;④容容易培养4.在培育转转基因植物的的研究中,卡卡那霉素抗性性基因(kanr)常作为标记记基因,只有有含卡那霉素素抗性基因的细胞才能在在卡那霉素培培养基上生长长。下图为获获得抗虫棉的技技术流程。请据图回答::(1)A过程程需要的酶有有。(2)B过程程及其结果体体现了质粒作作为载体必须须具备的两个条件是是。(3)C过程程的培养基除除含有必要营营养物质、琼琼脂和激素外,还必必须加入。(4)如果利利用DNA分分子杂交原理理对再生植株株进行检测,D过程应应该用作为探针。(5)科学家家发现转基因因植株的卡那那霉素抗性基基因的传递符合孟德德尔遗传规律律。①将转基因植植株与杂交,其后代中抗卡卡那霉素型与与卡那霉素敏敏感型的数量量比为1∶1。。②若该转基因因植株自交,则其后代中中抗卡那霉素素型与卡那霉素敏敏感型的数量量比为。③若将该转基基因植株的花花药在卡那霉霉素培养基上上作离体培养,则获得的再再生植株群体体中抗卡那霉霉素型植株占%。解析重组质粒的获获得需要限制制酶和DNA连接酶;作为载体必须须具备以下几几个条件:一一是能够在宿宿主细胞中复制制并稳定保存存;二是具有有多个限制酶酶切点,以便与外外源基因连接接;三是具有有某些标记基基因,便于进行筛选选等。B过程程体现出了其其中的一、三三两条。转基因植植株与非转基基因植株杂交交后,后代表表现型比例为1∶∶1,说明转转基因植株为为杂合子,该该杂交过程相当于测测交;如果自自交,则后代代比例应为3∶1;卡那霉素对花花粉进行了选选择,保留下下了抗卡那霉霉素的植株。答案(1)限制酶酶和DNA连连接酶(2)具有标标记基因;能在宿主细胞胞中复制并稳稳定保存(3)卡那那霉素(4)放射性性同位素(或或荧光分子)标记的抗虫虫基因(5)①非转转基因植株②②3∶1③1005.如图为利利用生物技术术获得生物新新品种的过程程,据图回答:(1)在基因因工程中,A→B为技术,利用的原理是,其中①为过程。(2)加热热至94℃的的目的是使DNA中的键断裂裂,这这一一过过程程在在细细胞胞内内是是通通过过的作用用来来完完成成的的。。(3)当当温温度度降降低低时时,引引物物与与模模板板末末端端结结合合,在在DNA聚聚合酶酶的的作作用用下下,引引物物沿沿模模板板链链延延伸伸,最最终终合合成成两两条条DNA分分子子,此此过过程程中中的的原原料料是是,遵循循的的原原则则是是。(4)目目的的基基因因导导入入绵绵羊羊受受体体细细胞胞常常用用技术术。。(5)B→→D为为抗抗虫虫棉棉的的培培育育过过程程,其其中中④④过过程程常常用用的的方法法是是,要确确定定目目的的基基因因(抗抗虫虫基基因因)导导入入受受体体细细胞胞后后是是否否能稳稳定定遗遗传传并并表表达达,需需进进行行检检测测和和鉴鉴定定工工作作,请请写写出在在个个体体生生物物学学水水平平上上的的鉴鉴定定过过程程::。解析析(1)A→→B为为体体外外DNA复复制制即即PCR技技术术,与与体体内内DNA复复制制原原理理相相同同,解解旋旋方方式式不不同同,PCR技技术术是是用用高高温变变性性使使其其解解旋旋。。(2)94℃℃时时DNA双双链链解解旋旋,破破坏坏的的是是两两条条链链之之间间的的氢氢键,而而在在细细胞胞内内DNA复复制解解旋旋时时解解旋旋酶酶起相相同同作作用用。。(3)PCR技技术术与与DNA复复制制过过程程原原理理是是相相同同的的,即即碱碱基基互补补配配对对,原原料料均均为为4种种脱脱氧氧核核苷苷酸酸。。(4)转基基因动物培培育中目的的基因的导导入常用显显微注射技术。(5)将目的的基因导入入植物细胞胞常用的方方法为农杆杆菌转化法,其其优点是能能将外源基基因导入到到受体细胞胞的染色体DNA分子上上;在个体体水平上鉴鉴定,即通通过生物体所体现的的性状来判判断,抗虫虫棉应具有有的性状为为害虫吞食后使使其死亡。。答案(1)PCRDNA复制制DNA解解旋(2)氢解解旋酶酶(3)4种种脱氧氧核苷苷酸碱碱基互互补配配对原原则(4)显微微注射射(5)农杆杆菌转转化法法让让害害虫吞吞食转转基因因棉花花的叶叶子,观察害害虫的的存活活情况况,以以确定定性状状6.下下图a表示示基因因工程程中经经常选选用的的载体体———pBR322质粒,Ampr表示氨氨苄青青霉素素抗性性基因因,Tetr表示四四环素抗性性基因因。目目的基基因如如果插插入某某抗性性基因因中,将使该基基因失失活,而不不再具具有相相应的的抗性性。为为了检检查载体是是否导导入原原本没没有Ampr和Tetr的大肠肠杆菌菌,将将大肠杆杆菌培培养在在含氨氨苄青青霉素素的培培养基基上。。得到到如图b的结结果(黑点点表示示菌落落)。。再次次灭菌菌的绒绒布按按到图b的培培养基基上,使绒绒布面面沾上上菌落落,然然后将将绒布布平移按按到含含四环环素的的培养养基上上培养养,得得到如如图c的结果(空圈圈表示示与b对照照无菌菌落的的位置置)。。据此此分析析并回答答:(1)pBR322质粒粒的基基本组组成单单位是是。该基因因工程程中,质粒粒上的的Ampr、Tetr称为基因。。(2)与图图c空空圈相相对应应的图图b中中的菌菌落表表现型型是,由此说明明目的基因因插入了中。(3)质粒粒作为基因因表达载体体除了具有有Ampr或Tetr及目的基因外外,还必须须具有。(4)若用用pBR322质粒粒作为载体体,通过基基因工程生生产的食品,存存在着食品品安全性问问题,试说说明理由。。。解析质粒是独立立于细菌拟拟核DNA之外,一一种裸露的、结构简简单并能自自我复制的的双链环状状DNA分分子,其基本组成成单位是4种脱氧核核苷酸。在在基因工程程中,质粒上特殊殊的遗传
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