从5-HT信号通路探讨翘芍方治疗早泄的机制

中国中医科学院西苑医院男科

从5-HT信号通路探讨翘芍方

治疗早泄的机制国家自然基金，项目编号：81273930材料造模方法行为观察干预结果目录1.材料雄性Wistar大鼠72只，12周龄，体重200～250g；雌性Wistar大鼠45只，10周龄，体重150～180g。由中国中医科学院西苑医院实验动物中心提供，均为清洁级，采用架式笼养,恒温(22±1)°C,湿度50%～60%,光照黑暗各12h交替,自由饮水和摄食。2.药品8-OH-DPAT(100mg,Sigma-Aldrich)苯甲酸雌二醇注射液(2ml:4mg，杭州动物药品厂)注射用青霉素钾(160万单位）水合氯醛(国药集团化学试剂有限公司)翘芍颗粒（8g/袋，西苑医院颗粒药房提供）达泊西汀（30mg/片，美纳里尼(中国)投资有限公司）3.仪器设备高清红外夜视数码录像系统(小蚁1080P智能摄像机2)，大鼠性行为观察箱，-80℃冷冻箱(SANYO,Japan)，电子分析天平(sartorius,Germany)，大鼠固定器(中国江苏)，动物体重称(中国上海）。材料造模方法行为观察干预结果1.分组及造模随机分为6组,每组12只，用5%苦味酸溶液染色法标记大鼠编号分组处理方法

A组:空白对照组大鼠不做任何处理

B组:模型对照组8-OH-DPAT+生理盐水C组：翘芍方低剂量组8-OH-DPAT+翘芍方（1）D组：翘芍方中剂量组8-OH-DPAT+翘芍方（2）E组：翘芍方高剂量组8-OH-DPAT+翘芍方（4）F组：盐酸达泊西汀组8-OH-DPAT+达泊西汀（按需）2.雌鼠去势手术目的：避免雌鼠受孕，提前摘除大鼠卵巢。方法：大鼠术前禁食12h，4%水合氯醛1mL/100g腹腔麻醉后，俯卧位固定，剪去术区的鼠毛备皮，碘酊消毒，75%乙醇脱碘2次铺上手术孔巾，在背部肋弓下行1cm左右，脊柱侧面1cm处切口，逐层切开，暴露腹腔。分离性腺周围的脂肪组织，找到卵巢，结扎卵巢周围血管，切除卵巢，然后逐层缝合，同法摘除另一侧卵巢。局部碘酊消毒，肌注青霉素。观察：监测大鼠死亡情况及术后1周的体重变化。结果：去势后雌鼠死亡2只，其余均成功。3.雌性大鼠发情的诱导在交配实验前36h皮下注射苯甲酸雌二醇50μg来诱导发情。材料造模方法行为观察实验室结果1.性行为学观察指标在0周、4周，将2只雌雄大鼠放在行为观察箱，每次30min，观察指标主要包括：骑跨潜伏期(mountlatency，ML)、插入潜伏期(intromissionlatency，IL)、射精潜伏期(ejaculationlatency，EL)射精次数(ejaculationfrequency，EF)骑跨次数(mountfrequency，MF)、插入次数(intromissionfrequency，IF)。2.性行为学观察嗅舔性行为学观察插入骑跨大鼠性行为学特征ML:骑跨潜伏期(mountlatency)MF:骑跨次数(mountfrequency)EL：射精潜伏期(ejaculationlatency)IL：插入潜伏期(intromissionlatency)EF：射精次数(ejaculationfrequency)IF：插入次数(intromissionfrequency)性行为总结8-OH-DPAT可使雄鼠骑跨潜伏期、插入潜伏期、射精潜伏期显著缩短，。材料造模方法行为观察指标检测标本的收集：下丘脑标本保存三、讨论翘芍颗粒组成及方解；翘芍颗粒的现代药理研究；8-OH-DPAT造模的经验。翘芍方主要成分:贯叶连翘、柴胡、白芍、石菖蒲、巴戟天等主要功效:补肾疏肝、养心固精方解：贯叶连翘、柴胡、白芍以柔肝行气；淫羊藿、刺五加补益肾气；合欢皮、煅牡蛎、莲子心以安神固精。君药：贯叶连翘贯叶连翘的有效成分是贯叶金丝桃素，能抑制5-HT的摄取,是5-HT神经递质的非竞争性重吸收抑制剂，对5-HT激动剂所诱发的大鼠过快射精有延迟作用。8-