(完整版)基因工程综合练习题

试卷第试卷第页，总5页目的基因(抗枯萎病的基因)已表达不一定【解析】试题分析：图中A是目的基因，运载体是质粒，其本质是双链环状 DNA分子，运载体上的标记基因用于鉴别和筛选重组质粒。在基因工程中，需用限制酶切割含有目的基因的外源 DNA分子和运载体，之后需用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组 DN酚子。基因工程的操作过程中，基因表达载体的构建和目的基因的扩增和筛选步骤需遵循碱基互补配对原则。通过基因工程技术使玉米获得了与番茄相似的抗虫性状， 这属于基因重组。植株具备了抗病性，这说明目的基因(抗枯萎病的基因)已表达。如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中不一定含有抗病基因， 若将该基因导入雌性植株的叶绿体 DNA中，产生的配子中含有抗病基因，若将该基因导入雄性植株的叶绿体 DNA中，产生的配子中不含有抗病基因。考点：本题考查基因工程的相关知识。点评：本题意在考查考生的识记能力、识图能力和理解能力，属于容易题。.(每空1分，共12分)(1)限制性核酸内切酶；标记基因； RNA聚合酶。(2)显微注射技术；受精卵；胚胎移植；乳腺蛋白基因的启动子；乳腺(或乳房)生物反应器。(3)农杆菌转化法；植物组织培养；分子杂交技术；放射性同位素标记的含有目的基因的DNA片段。【解析】PCR技术的原理是DNA的复制，目的基因的检测和鉴定有 DNA分子杂交法、DNARNA杂交法、抗原一抗体杂交法以及个体水平上的方法等。基因工程中利用限制酶和DNA连接酶，基因表达载体的构建由启动子、终止子、目的基因和标记基因组成，将目的基因导入动物细胞的方法是利用显微注射技术， 导入到受精卵中，导入植物细胞的方法是农杆菌转化法利用，将植物进行组织培养。在含有目的基因的 DNA片段上用放射性同位素标记，以此作为探针，与基因组 DNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。过程二：采用DNA分子杂交技术，从转基因生物提取的mRNA用放射性同位素标记，与mRNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因转录出了 mRNA。过程三：从转基因生物中提取出蛋白质， 用相应的抗体进行抗原一抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。.(1)(同一种)限制性核酸内切酶(限制酶) 磷酸二酯键 碱基互补原则DNA连接酶(2)重组载体(重组质粒)干扰素基因的DNA与细菌质粒DNA(3)启动子 RNA目的基因(4)引物 DNA聚合酶(Taq酶)(5) —G'GATCC- -G GATCC-一CCTAGG- —CCTAG G一【解析】(1)切割目的基因和质粒需用同一种限制性核酸内切酶。 限制酶破坏脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键，目的基因与质粒的黏性末端之间通过碱基互补配对连接起来，通过 DNA连接酶构建重组质粒。(2)由于干扰素基因的DNA与细菌质粒DNA结构组成相同，所以可构建重组质粒。(3)驱动基因转录的结构是启动子。检测目的基因是否转录，可从细胞中提取 RNA与用放射性同位素标记的目的基因作探针进行分子杂交。(4)PCR的条件需有引物和耐高温的 DNA聚合酶，即Taq酶。(5)黏性末端是两条链。(1)化学合成(人工合成)从生物细胞分离(从染色体DNA分离/酶切获取/鸟枪法)(2)限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶质粒 小型环状(双链环状、环状)低筛选(5)氨基酸(6)繁殖快、为单细胞生物、遗传物质相对较少【解析】获取目的基因的方法是从基因文库中提取， 采用PCR技术扩增，人工合成目的基因；基因工程中的工具酶是限制酶和 DNA连接酶，运载体通常用动植物病毒和质粒， 质粒通常为小型环状的DNA分子。重组DNA分子受体细胞的机率比较小，对是否导入和表达还需要进行检测。受体细胞的通常是繁殖快，易培养，遗传物质相对较少。(1)磷酸二酯键 黏性末端平末端(2)、T4连接酶、黏性末端、黏性末端、平末端【解析】限制酶切目的基因和运载体末端有两种形式：一是平末端，一是粘性末端，分子缝合针是DNA!接酶连接是磷酸二酯键， DNA!接酶常见有各种类型为： E•coliDNA连接酶和T4连接酶，E-coliDNA连接酶连接的是粘性末端， T4连接酶连接粘性末端和平末端。主要是平末端。(1)限制酶和DNA1接酶(1分，答案不全不给分)；乙肝表面抗原蛋白基因、启动子、终止子、标记基因(写全2分，不全面1分，顺序随意)(2)山羊的受精卵细胞；显微注射法；离苣的体细胞或受精卵细胞(答案不全不给分)；农杆菌转化法；(3)乳汁；尿液；(4)C;(5)Taq酶(热稳定DNA聚合酶)；耐高温；引物和四种游离的脱氧核甘酸(原料) (答案不全不给分)；(6)25%【解析】(1)构建基因表达载体所需的酶有限制酶和 DNA连接酶。基因表达载体包括乙肝表面抗原蛋白基因(目的基因)、启动子、终止子、标记基因。(2)将目的基因导入动物细胞，选择的受体细胞是受精卵细胞，方法是显微注射法；将目的基因导入植物细胞，选择的受体细胞是体细胞或受精卵细胞， 选择的方法是农杆菌转化法。(3)乳腺生物反应器，是从动物的乳汁中获取蛛丝蛋白；膀胱生物反应器，是从动物的尿液中获取蛛丝蛋白。(4)高温使DNA变性解旋，不需要解旋酶。(5)PCR技术中催化DNAM制的酶是Taq酶，耐高温，DNAM制的条件有引物、