【干货】液相色谱仪常见故障及维修方法

故障现象一：泵不能正常运行故障描述：开泵后，仪器报错，显示主位置错误，泵不能正常运行。故障原因及解决方法：以LC-20AT为例，泵报错HOMEPOS，代表传感器无法检测到电动机的原始位置，电动机不能运行，或是空转。原因可能是泵体缺机油，椭轮、连接轮磨损，导致电机不能带动椭轮；皮带松动，使电机不能正常传动到椭轮；位置传感器脏，不能正确感应电机初始位置。解决方法：将仪器断电，打开仪器上盖板与泵体盖板，可以看到泵体内部构造。观察泵体内部有无锈渍，用手前后转动皮带观察椭轮与连接轮之间运动是否流畅，及时清理泵体内部的锈渍及杂质，并在椭轮和连接轮上加机油,直到海绵上的机油饱和（固定螺丝的槽内也应适当加一点机油）；用手前后转动皮带感觉皮带松紧及皮带有无变形，如有问题应调整或更换皮带，使皮带与齿轮之间的摩擦力变大；检查位置传感器上是否有浮灰并及时清理。故障即可排除。故障现象二：漏液报警故障描述：打开仪器后，仪器显示漏液报警。故障原因及解决方法：首先检查仪器各连接管路是否有漏液，如有漏液可通过拧紧或更换各连接部件解决。若没有检查到有漏液现象，可通过面板VP按键进入到校正支持组CAL旧RATION,检查漏液阀值是否设置过低。LEAKTHR显示当前设置值（当实际检测值超过此值时报警），ActLv显示当前实际值（指当前在传感器周围的溶剂蒸气浓度），重新调整设置值，故障即可排除（适用于泵、检测器等带有漏液传感器的各个仪器组成单元）。故障现象三：器基线漂移故障描述：仪器运行后，检测器基线长时间漂移，不能平衡，有时候噪音很大。故障原因及解决方法：首先，检查泵压是否稳定。若泵压不稳，单向阀内可能有异物或气泡；预柱、色谱柱、手动进样器、在线过滤片或者管路堵塞。解决方法：将单向阀拆下用超声波清洗，根据样品分析时使用的不同流动相（如有机溶剂、无机溶剂、含盐溶剂）,可以判断选择清洗液。清洗完单向阀并重新装上后，为防止在单向阀内产生气泡，可以先用甲醇做流动相赶一下气泡，再根据分析时使用的不同流动相选择不同的置换液（注意:在置换甲醇时不要把气泡带入管路中）；更换色谱柱或者用阻尼管代替色谱柱，看压力有无变化，判断色谱柱是否堵塞。另外判断其他部分是否堵塞，可以通过用一段外接管路将其短路连接的方法，观察短接后泵压力的变化，判断手动进样器、预柱等是否堵塞（用缓冲盐做流动相时，因盐分会在管路中析出，在使用前和使用后都要用纯水清洗流路，绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置过夜或更长时间）。检查完成后，泵的原因即可排除。其次，检查流动相内是否有杂质。在停泵或者使用空气池（将流通池内的镜片和池垫片拆下，流通池内充满干燥的空气）时观察基线变化，若基线稳定，则说明流动相中有杂质（或者是因为笊灯能量不稳定造成的，后面会讲到）。流动相溶剂应选择HPLC的溶剂或以此为标准的溶剂，流动相使用前用0.45um滤膜过滤、脱气，清除微粒和灰尘。检查流动相和流路，排查原因后，去除流动相内的杂质。第三，检查检测器的笊灯能量是否稳定；流通池内是否有气泡；流通池镜片是否脏；仪器所在的环境是否有强的空气流；室温变化是否过大；是否使用双波长模式。解决方法：在停泵或者使用空气池的情况下观察笊灯能量是否稳定。若样品池与参比池能量不稳定，则必须更换笊灯；观察流通池内是否有气泡，可以使用异丙醇或甲醇（使用注射器注射，从流通池进口缓缓推入）清洗流通池内部，排除气泡。流通池的出口处连接的是一根0.3mmI.D.X2m的背压管（增加背压，防止气泡产生），检查背压管是否完好或者增加背压设备；拆除流通池然后清洗池透镜（流通池构造如图1所示），如果无法去除污渍，请安装新的池透镜（安装池透镜片时需注意，镜片下面一定要先放置池垫圈，否则会导致镜片被压碎）；观察室内环境是否符合液相色谱的实验室环境要求，改变仪器的位置，或防止所在环境有过多的变化；双波长模式中的噪音振幅是单波长模式中的10倍以上。小量的波长更改会使流动相吸光度发生非常大的更改。吸光度变化越大，噪音也就越大。更改波长，使其每单位波长的变化对吸光度产生的变化最小。通过这三步检查，故障即可排除。故障现象四：检测器报错故障描述：检测器开机后报错，LAMPNOTLIT,ERRD2LAMP,ERRLAMPHOMEPO,NOD2LAMP,CHECKNOGOOD。故障原因及解决方法：以SPD-20A为例，检测器报错LAMPNOTLIT,ERRD2LAMP,ERRLAMPHOMEPO,NOD2LAMP，可能是笊灯故障或者电路板故障。首先，打开笊灯室的上盖板，用万用表直流挡测量连接笊灯的排线针脚。正常情况下，黄色与橘黄色针脚之间，在点灯时两针脚电压在（10.5〜10.7）V之间，点亮笊灯后电压在7V左右。橘黄色与褐色针脚之间，在点灯时两针脚电压在170V左右，点亮笊夕T后电压在70V左右。测量电压若正常，则为笊灯故障，需要更换笊灯。若电压不正常，则需要测量变压器〜电源板、电源板〜CPU板之间的电压，来判断是哪块电路板故障。电路板的损坏主要和室内的环境因素有关，比如实验室内湿度过高，灰尘过多，含有腐蚀性气体的空气，电源没有安装接地线等，这些都会影响仪器的寿命。电路板要由专业技术人员更换，在此不再赘述。其次，检测器报错CHECKNOGOOD,是指检测器的波长自检没有通过。原因可能是流通池污染；流通池没有安装到正确的位置；流动相里有杂质或者气泡，被污染。解决方法：确认流通池镜片干净，必要时清洗流通池；正确安装流通池，确定池的位置，使箭头向上。然后将池上的针孔与检测器上的定位针对准，滑入流通池；若流通池中的样品对紫外和可见光有很强的吸收，或者样品中的大气泡极大地限制通过流通池中笊灯发射谱线波长（656nm的能量），此时更换流动相为纯水，按仪器面板上的VP键进入到校正支持组CAL旧RATION，运行WAVECALIB波长校正，然后运行WAVECHECK检查波长的准确度。故障即可排除。故障现象五：脱气机报错故障描述：脱气机红灯常亮报错。故障原因：以DGU-20A3为例，脱气机报错一般是因为脱气机内的真空腔真空度下降，真空泵不能在真空腔内有效地制造负压环境。原因可能是开关机时真空系统中凝结水滴，影响抽真空效率；空气过滤器及进气金属针管堵塞；用万用表直流挡测量真空泵工作电压，若大于13V,则真空泵内有灰尘进入，导致真空泵高负荷运转；真空腔内漏液，连接管路漏气。解决方法：当仪器在打开和关闭电源来回切换时，由于绝热膨胀和压缩效应凝结水滴，附着在管路中，影响抽真空的效率。检查真空泵和真空腔内是否有水滴附着，一般在去除水滴后，仪器能恢复正常；如果过滤头有堵塞，会减少从外部进入的空气，降低真空泵转速，甚至使真空泵停止工作。根据过滤头颜色是否发黑，确定是否更换;小心清理真空泵鼓膜上的灰尘或者异物；判断漏气，可以用短接的方法，把真空泵与压力传感器直接连接，跳过真空腔和管路。若此时恢复正常，则证明管路或真空腔漏气。若没有继续报警，则判断为电路板问题，需专业技术人员更换。通过以上检查故障即可排除。最后小析姐再分享一些关于液相色谱干扰峰的知识。高效液相色谱法中的干扰峰是广大色谱工作者甚为头疼的事情，干扰峰的来源简单归纳为3类：t剂/溶剂、器材以及液相系统。一、试剂/溶剂高效液相色谱法中，常用的试剂主要是有机溶剂、各种盐类及水。有机溶剂一般多为购买的色谱级，所以出现问题的几率较小。但是分装出的有机溶剂，由于多次使用，被污染的概率较大，因此引入干扰峰的几率较高。其次是水，水中的杂质是干扰峰的主要来源之一，这是大家极易忽视的问题。采集波长较低的检测方法，建议使用高品质水，这样可以避免很多因为水质带来的问题。再次是各种盐类，这也是色谱干扰峰的主要来源之一。如图2所示，与图1相比，如图2加入磷酸二氢钾后，16.5min处出现干扰峰。对于无机盐引入的干扰峰，在方法开发初期一般就会给眼关注，寻找解决方案。方法确定后，盐的品种及级别也同时确定，因此盐对方法的影响基本可控。水和无机盐引起的干扰峰，比较快捷的解决方案是安装鬼峰补集柱，这样可以有效的避免此类干扰。如果使用离子对试剂，则需选择不影响离子对试剂的鬼峰补集柱。图1;无干扰峰图谱图、璘酸二氢钾引入干扰峰图谱图3:乙睛过滤引入干扰峰图谱上药事纵校F、器材一扰峰来源的第二个方面是流动相配制及样品前处理过程中接触的各种器材。首先是流动相配制过程中接触的器材，包括烧杯、玻璃棒、pH计、滤杯、滤膜、流动相瓶等。烧杯、玻璃棒是M制流动相首先接触的器材，因此建议配制流动相的烧杯、玻璃棒专用。滤杯实验人员只要清洗干净一般不会带X污染。需要注意的是，如果过滤含有离子对的流动相，建议增加清洗次数，避免清洗不干净污染后续流动相。因此，对滤杯的清洗应该建立基本的洗涤规程，保证实验人员对使用的器材清洗到位。滤膜也是干扰峰引入源头2,o如图3所示，乙晴经过有机系滤膜过滤后，在梯度洗脱中会引入较大干扰峰。鉴于色谱级试剂厂家已经过膜，且“数仪器都有脱气机，所以笔者建议无需再对甲醇、乙晴等纯有机相过滤。流动相瓶引入干扰峰的现象主要出现在夏季，这是由于夏季温度高，纯水相容易滋生细菌。后续的流动相瓶使用人员清洗不到位，所以导致引入干扰峰。因此流动相瓶的清洗要建立严格的洗涤规程。"次样品前处理过程中接触的器材。前处理过程中接触的器材主要包括容量瓶、滤头、注射器及进样瓶。容量瓶的清洗同流动相瓶、过滤装置一样，要建立良好的清洗规程。移液器材以及滤头、注射器，多为塑料制品，其化学惰性较玻璃制品差，因此容易引入干扰峰。如下图4、图5、图6所示案例，此方法检测波长为210纳米，溶剂为正己烷-异丙醇（90:10）,溶剂分别接触移液枪枪头、一次性吸管、一次性注射器后，均引入不同的干扰峰。

洗干净程度进行确认。三、液相系统与前两类干扰峰相比，液相系统干扰峰的解决更加困难。液相系统是一个动态过程，所以此类问题解决过程耗费时间长，而且要求实验人员有很高的色谱素养。对此类问题来源主要归结为三类：强保留物质、离子对污染和管路滋生细菌。进样小瓶若为一次性使用，一般不会引入干扰峰。如果进样瓶反复清洗，多次使用，则应建立清洗规程并对其清图4：移液枪枪头干扰峰洗干净程度进行确认。三、液相系统与前两类干扰峰相比，液相系统干扰峰的解决更加困难。液相系统是一个动态过程，所以此类问题解决过程耗费时间长，而且要求实验人员有很高的色谱素养。对此类问题来源主要归结为三类：强保留物质、离子对污染和管路滋生细菌。进样小瓶若为一次性使用，一般不会引入干扰峰。如果进样瓶反复清洗，多次使用，则应建立清洗规程并对其清图4：移液枪枪头干扰峰国&一次性注射器干扰峰图憎>而出.・砧1◎力fij"ifl'''Sfi''1A'""Kfl''tfl-'Tfi''"fcfl''''iAA'-'i图科歆性吸管干扰峰图谱首先是强保留物质的干扰，其主要特征是宽峰。此类问题多数发生在等度洗脱中，梯度洗脱主要出现在高比例有机相处。这是由于强保留物质在当次进样中未洗脱出，在后续进样洗脱出来所致。如图7中9分钟处的色谱峰。25崔2M-150-机相处。这是由于强保留物质在当次进样中未洗脱出，在后续进样洗脱出来所致。如图7中9分钟处的色谱峰。25崔2M-150-1W-西配-SD¥0*09010000109J>04b哭,药事纵横哭,药事纵横图％强保留物质干扰峰色谱图图8士延长采集时间后的色谱图对于此类干扰峰，可通过延长采集时间或增加洗脱强度来消除对后续样品的干扰。系统干扰峰第二个方面是离子对、螯合剂这种难以洗脱的试剂对液相系统的污染。此类污染物多半是由于使用完毕含有离子对、螯合剂之类的流动相后，对系统的冲洗不彻底所致。此类污染物主要对一些采集波长较低的方法产生干扰，普遍表现是基线噪音大或者干扰峰，但随着方法的运行会逐渐趋于正常。系统干扰峰第三个方面是系统滋生