诊断实验-血细胞检查

血液学检查广州医科大学附属第三医院检验科夏勇教授临床血液学检测

血液一般检测溶血性贫血的实验室检查血细胞形态特征血型鉴定与交叉配血常见血液病的血液学特征第一节

血液一般检测1、红细胞计数、血红蛋白测定2、白细胞计数和分类3、溶血性贫血的实验室检查4、血型鉴定与交叉配血主要内容Contents2022/12/154一、红细胞检测及血红蛋白的测定

红细胞功能：呼吸载体、维持酸碱平衡临床可通过对红细胞各项参数、形态的检测对贫血和某些疾病进行诊断或鉴别诊断2022/12/1551、红细胞计数检测方法仪器法：常用，简便，快速，易于标准手工法：金标，费时费力，精密度低2022/12/1562、血红蛋白测定方法氰化高铁血红蛋白法：参考方法，剧毒十二烷基硫酸钠血红蛋白法：次选，无毒2022/12/15783、参考值红细胞血红蛋白成年男性(4.0-5.5)×1012/L120–160g/L成年女性(3.5-5.0)×1012/L110–150g/L新生儿(6.0-7.0)×1012/L170–200g/L2022/12/154、临床意义（一）红细胞及血红蛋白增多指单位容积血液中红细胞数及血红蛋白量高于参考值高限。男性：红细胞>6.0×1012/L，血红蛋白>170g/L女性：红细胞>5.5×1012/L，血红蛋白>160g/L分为相对性增多和绝对性增多2022/12/15910红细胞及血红蛋白病理性增加相对性增加由休克、腹泻、大面积烧伤、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲亢危象、糖尿病酮症酸中毒等血液浓缩所致继发性（代偿性）增高：EPO增加阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病2022/12/15真性红细胞增多症原发性增高（真性红细胞增多症）：原因不明的以红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病特点：RBC持续性增多，可高达（7~10）×1012/L，血红蛋白达180~240g/L。可转变为白血病。2022/12/151112红细胞及血红蛋白减少红细胞及血红蛋白减少是指同年龄、同性别中单位容积血液中红细胞及血红蛋白量低于参考值低限。2022/12/1513红细胞及血红蛋白生理性减少主要见于婴幼儿、15岁以前的儿童、老年、妊娠中晚期贫血：可分为轻度（正常下限~90g/L）中度（HGB<90g/L）；重度（HGB<60g/L）和极重度（HGB<30g/L）。2022/12/1514红细胞及血红蛋白病理性减少红细胞生成不足再障/缺铁性贫血/巨幼红贫血红细胞破坏过多遗传性球性红细胞增多症/溶血性贫血失血失血性贫血2022/12/1515成熟红细胞是呈双凹圆盘形、大小较一致、直径为6～9微米，平均7.5微米，厚度边缘部约为2微米，中央部为1微米，染色后四周呈浅橘色，中央呈淡染区。成熟红细胞红细胞2022/12/15红细胞计数医学决定水平>6.8×1012/L应采取相应治疗措施；<3.5×1012/L可诊断贫血；<1.5×1012/L应考虑输血。2022/12/1516红细胞形态学改变大小异常小红细胞/大红细胞/巨红细胞形态异常球形/椭圆形/口形/靶形/镰形/泪滴形/缗钱形染色反应异常低色素/高色素/嗜多色性结构的异常嗜碱性点彩/染色质小体/卡波环/有核红细胞2022/12/151718返回

大红细胞红细胞大小不等小红细胞巨红细胞d<6μm，中央淡染区扩大，见于低色素性贫血d>15μm，常见于叶酸或维生素B12缺乏所致巨幼红细胞贫血d>10μm，常见于溶血性贫血，急性失血性贫血红细胞大小悬殊，可相差1倍以上，常见于病理造血。2022/12/15球形红细胞：d<6μm,厚度增加>2.9μm,圆形，着色深，中央淡染区深。主要见于遗传性球形红细胞增多症，也可见于自身免疫性疾病。图片中此种细胞>20%以上方有诊断价值。2022/12/15192022/12/1520椭圆形红细胞：红细胞的横径/长径<0.78，呈椭圆形，或两端钝圆的长柱状。可见于遗传性椭圆形细胞增多症，巨幼红细胞贫血。2022/12/1521口形红细胞：细胞中央淡染区呈扁平裂缝状，如微张口的嘴形或鱼口状。常见于遗传性口形红细胞增多症，少量可见于DIC及酒精中毒时。2022/12/1522靶形红细胞：中央淡染区扩大，中心部位深染，状似射击靶标。可见于珠蛋白生成障碍性贫血、异常血红蛋白病。镰形红细胞红细胞缗钱状泪滴形红细胞裂红细胞返回2022/12/152324正常色素性红细胞正常红细胞在瑞氏染色的血涂片中呈淡桔红色圆盘状，中央有生理性淡染区，具有此类特征的红细胞被称之为正常色素性红细胞。2022/12/15低色素性：红细胞染色过浅，中央淡染区扩大，可见于缺铁性贫血，珠蛋白生成障碍性贫血、铁粒幼细胞性贫血。高色素性：红细胞深染，中央淡染区消失，MCH增高，可见于巨幼红细胞贫血，球形红细胞。嗜多色性：红细胞呈淡灰蓝色或紫灰色，为刚脱核红细胞，体积较正常红细胞大。见于增生性贫血、尤以溶血性贫血多见。返回2022/12/1525嗜碱性点彩红细胞：红细胞内含嗜碱性物质，为核糖体凝集而成。多见于铅中毒。染色质小体：圆形紫红色小体，直径约0.5~1μm，1至数个，为核残留物质，多见于溶血性贫血、巨幼红细胞贫血、红白血病等。卡-波环：环状或者“8”字形，提示严重贫血、溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、铅中毒等。有核红细胞：正常人中存在，增多时多见于各种溶血性贫血，白血病等亦可见。2022/12/1526棘形红细胞与锯齿红细胞棘形红细胞增多症：罕见的遗传性β脂蛋白合成障碍性疾病，患儿生长发育障碍。严重的肝细胞疾病，贫血、黄疸、消化道出血、肝性脑病等。推片时人为造成久置标本几种疾病过程和毒素可改变红细胞膜而产生锯齿状红细胞，速尿、胃肠道疾病、淋巴瘤化疗后棘形红细胞锯齿状红细胞2022/12/15273、网织红细胞

（Reticulocyte,Ret)计数网织红细胞：是介于晚幼红细胞与成熟红细胞之间的尚未完全成熟的红细胞，胞浆中含有多少不等的嗜碱性物质（RNA），经煌焦油蓝等活体染色后，胞浆中含有多少不等的蓝色点网状结构，故称网织红细胞（教材260页）。282022/12/1529方法：自动分析仪器检测煌焦油蓝或新亚甲蓝染色（手工法）参考值：0.5-1.5%（成人）

2.0-6.0%（新生儿）网织红细胞Ret(新亚甲蓝染色)2022/12/1530临床意义：

※反映骨髓造血功能

※贫血治疗疗效判断和观察指标

※贫血病情观察指标网织红细胞2022/12/154、红细胞沉降率（ESR)测定概念：红细胞在一定条件下沉降的速率。受多种因素影响：血浆中各种蛋白的比例改

变，红细胞数量和形状改变。参考值：0-15mm/h（男）

0-20mm/h（女）31血沉2022/12/1532临床意义：※生理性增快：12岁以下的儿童、60岁以上的高龄者、妇女月经期、妊娠3个月以上※病理性增快：1.各种炎症性疾病:急性细菌性炎症时,炎症发生后2~3天即可血沉增快。风湿热、结核病时，因纤维蛋白原及免疫球蛋白增加，血沉明显增快。2.组织损伤及坏死:急性心肌梗死时血沉增快,而心绞痛时则无改变。血沉2022/12/1533临床意义：3.恶性肿瘤:增长迅速的恶性肿瘤血沉增快,可能与肿瘤细胞分泌糖蛋白(属球蛋白)、肿瘤组织坏死、继发感染或贫血等因素有关。4.各种原因导致血浆球蛋白相对或绝对增多时,血沉均可增快,如慢性肾炎、肝硬化、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、淋巴瘤、系统性红斑狼疮、亚急性感染性心内膜炎、黑热病等。5其他：部分贫血患者，血沉可轻度增快。动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合征、粘液性水肿等患者，血肿胆固醇高，血沉赤可增快。※血沉减慢：一般临床意义较小血沉2022/12/15345、血细胞比积和有关参数的应用一、血细胞比积测定（HematocritHCT)原理：血液有形成分（血细胞）在血液中所占体积的比值方法：温氏法微量法（血细胞分析仪电阻抗法）男女微量法0.467±0.039%0.421±0.054%温氏法40～50%（平均0.45L/L）37～48%（平均0.40L/L）HCT参考值2022/12/15临床意义※

红细胞数量和大小

※

血浆容量

※

贫血辅助诊断与贫血程度判断

※

红细胞各项平均值计算，辅助贫血分类1.增高：各种原因所致血液浓缩，＞50%2.降低：见于各种贫血352022/12/15

6、红细胞平均值的计算方法：手工法血细胞分析仪法1、平均RBC容积（MCV）每个RBC的平均体积（每升血液中血细胞比容/每升血液中红细胞数目）362022/12/1537平均RBC血红蛋白量（MCH）每个RBC所含Hb的平均量（每升血液中血红蛋白量/每升血液中红细胞数目）平均RBC血红蛋白浓度（MCHC）每升血液中平均所含Hb的浓度（每升血液中血红蛋白量/红细胞比容）2022/12/1538血细胞分析仪法计算方法MCV80-100flHCT×1015/RBC×1012MCH27–34pgHb×1012/RBC×1012MCHC320–360g/lHb/HCT红细胞平均值参考范围2022/12/1539临床意义：贫血的形态学分类贫血类型MCVMCHMCHC常见疾病正常细胞性NNN急性失血、溶血、再障、白血病大细胞性↑↑N叶酸、VitB12缺乏单纯小细胞性↓↓N慢性炎症、尿毒症小细胞低色素性↓↓↓铁、VitB12缺乏、珠蛋白肽链合成障碍2022/12/157、红细胞体积分布宽度原理：反映RBC体积异质性方法：分析仪器自动完成检测，以RDW-CV或RDW-SD表示参考值：11.5-14.5%（RDW-CV）402022/12/15正常红细胞直方图100200flRBC%正常红细胞直方图近似正太分布的单峰曲线，常位于36~360fl范围，横坐标表示红细胞体积，纵坐标表示不同体积红细胞出现频率，正常红细胞主要分布于50~200fl范围内。出现异常直方图时常伴曲线峰的增高降低、左移右移、单峰双峰、曲线宽窄、起始高低、尾部抬高延伸等变化。100200flRBC%小细胞且大小不均直方图正常巨幼细胞性贫血治疗有效巨红细胞且大小不等不同类型红细胞直方图43二、白细胞计数和白细胞分类计数2022/12/1544白细胞计数 仪器法，手工法白细胞分类计数 瑞氏染色电阻抗法激光法白细胞成年男性(4.0-10)×109/L新生儿(15-20)×109/L6月–2岁(11-12)×109/LN50-75%E0.5-5%B0-1%L20-40%M3-8%

1、白细胞计数2022/12/15

1、白细胞计数病理性变化：增高（＞10×109/L）降低（＜4.0×109/L）452022/12/152.1中性粒细胞（neutrophil,N）生理性变化年龄、日间变化、运动、疼痛、情绪影响、妊娠与分娩46病理性增多急性细菌性感染、化脓性感染：最多见严重的组织损伤及大量血细胞破坏急性出血急性中毒白血病、骨髓增殖性疾病、恶性肿瘤2022/12/152.1中性粒细胞（neutrophil,N）病理性减少感染性疾病：病毒感染、严重细菌感染：革兰氏阴性杆菌感染血液病：再障、粒细胞减少症化学药品与放射损伤脾亢及自身免疫性病472022/12/1548核象变化粒细胞核象：指粒细胞的分叶情况反映粒细胞成熟度核象变化：反映某些疾病的病情和预后2.1中性粒细胞（neutrophil,N）2022/12/1549核左移：外周血出现不分叶核粒细胞，中性粒杆状核增高，甚至出现晚幼粒，中幼粒，早幼粒，原粒等幼稚细胞的百分比超过5%，称核左移。常伴有细胞大小不一、中毒颗粒、空泡变性、核变性。常见于急性化脓性感染，白血病等。2.1中性粒细胞（neutrophil,N）早中晚杆234左正常右极左2022/12/15核右移：正常中性粒以三叶核为主，若五叶核以上超过3%，称核右移，为造血功能衰竭或造血物质缺乏所致巨幼贫、恶性贫，用抗代谢药物后2.1中性粒细胞（neutrophil,N）2022/12/155051形态异常中毒颗粒

空泡粒细胞2022/12/15522.2嗜酸性粒细胞（eosinophil,E）过敏性疾病：哮喘、药物过敏、荨麻疹寄生虫病：血吸虫、丝虫，常多达10％以上皮肤病：湿疹、天疱疮、剥脱性皮炎血液病：慢粒、恶性淋巴瘤某些肿瘤：转移瘤某些传染病：猩红热其他：风湿病、肾上腺皮质功能降低2022/12/15532.3嗜碱性粒细胞（Basophil,B）参与超敏反应慢性粒细胞白血病慢性溶血骨髓纤维化症脾切2022/12/15542.4淋巴细胞（lymphocyte,L）生理性增多婴儿出生4-6天，淋巴细胞达50%，4-6岁时比例下降，逐渐达到成人正常水平2022/12/152.4淋巴细胞（lymphocyte,L）病理性增多病毒性感染：麻疹、风疹、腮腺炎、巨细胞病毒肿瘤疾病：急性、慢性淋巴白血病、淋巴瘤急性传染性恢复期移植排斥反应病理性减少肾上腺皮质激素、烷化剂、ALG的治疗2022/12/155556异形淋巴细胞根据细胞形态学特点分为三型：Ⅰ型（泡沫型）：胞体较淋巴细胞稍大,呈圆形或椭圆形,部分为不规则形,核偏位,呈圆形、肾形或不规则形，核染质呈粗网状或小块状、无核仁。胞质丰富，呈深蓝色，含有大小不等的空泡，使胞质呈泡沫状，无颗粒或有少数颗粒。最多见。2022/12/15异形淋巴细胞Ⅱ型（不规则型）：胞体较Ⅰ型大，细胞外形常不规则，似单核细胞，故也称为单核细胞型。胞质丰富，呈淡蓝色或淡蓝色，可有少量嗜天青颗粒，一般无空泡。2022/12/1557异形淋巴细胞Ⅲ型（幼稚型）：胞体大，直经15-18微米，呈圆形或椭圆形，核染质呈纤细网状，可见1-2个核仁。2022/12/155859异形淋巴细胞在正常人外周血中偶可见到，但不超过2％增多可见于：感染性疾病，如传染性单核细胞增多症、流行性出血热等，可高达10％以上。药物过敏。输血、血液透析或体外循环术后。其他疾病如免疫性疾病、粒细胞缺乏、放射治疗等。2022/12/15602.5单核细胞（monocyte,M）增多某些感染疾病：疟疾、结核病、黑热病血液病：单核细胞白血病、淋巴瘤急性传染病或急性感染性减少无临床意义2022/12/15白细胞形态学改变大小异常白细胞大小不等核异常巨杆状核粒细胞/多分叶核粒细胞/双核粒细胞/环形核粒细胞/Pelger-Huet畸形/卫星核淋巴细胞胞浆异常空泡形成/中毒颗粒/杜勒小体/棒状小体/Chediak-Higashi畸形/Alder-Reilly畸形/May-Hegglin畸形2022/12/1561白细胞大小不等2022/12/1562中性粒细胞体积大小相差悬殊，常见于病程较长的化脓性感染。返回巨杆状核粒细胞2022/12/1563胞体可大至30μl，呈肥大杆状或特长带状，常见于巨幼细胞性贫血和恶性贫血，也可见于骨髓增生异常综合征和白细胞。多分叶核中性粒细胞2022/12/1564胞体增大，核分叶5~9叶，甚至10叶以上，各叶大小差异较大，常见于巨幼细胞性贫血、抗代谢物治疗后及恶性血液病等。双核粒细胞2022/12/1565粒细胞内出现2个细胞核，常见于MDS、粒细胞白血病。环形杆状核粒细胞2022/12/1566中性粒细胞核呈环状，常见于MDS、粒细胞白血病、巨幼细胞性贫血。

Pelger-Huet畸形2022/12/1567成熟中性粒细胞核分叶能力减退，核常呈杆状、肾形、眼镜形、哑铃形或少分叶（两大叶），染色质致密、深染，聚集成小块或条索状。为染色体显性遗传病，又称家族性粒细胞异常。获得性常见于MDS、急性白血病等。卫星核淋巴细胞2022/12/1568淋巴细胞主核旁有1个游离的卫星小核，因染色体损伤，丧失着丝点的染色单体或其片段在有丝分裂期未进入子代细胞遗传物质体系内而形成，常见于大剂量电离辐射、核辐射后。常作为致畸、致突变的客观指标之一。空泡形成2022/12/1569中性粒细胞胞浆或核出现1个或数个空泡，为脂肪变性或颗粒缺失的结果，常见于严重感染、败血症等。EDTA抗凝血也可出现。中毒颗粒2022/12/1570中性粒细胞胞浆中出现的比正常中性颗粒粗大、大小不等、分布不均的紫黑色或深紫褐色颗粒，常见于严重感染及大面积烧伤。含中毒颗粒的细胞在中性粒细胞中所占比值成为中毒指数，指数越大，感染中毒情况愈严重。杜勒小体（Dohlebody）2022/12/1571中性粒细胞因毒性变化而在胞浆中保留的局部嗜碱性区域，呈圆形、梨形或云雾状，天蓝色或灰蓝色，直径0.1~2μm，单个或多个，为核质发育不平衡表现，常见于严重感染如肺炎、麻疹、败血症等。棒状小体（Auerbody）2022/12/1572为白细胞胞浆中出现的红色细杆状物质，1个或数个，长约1~6μm，为初级嗜天青颗粒结晶出现数个呈束状排列的成为faggot细胞。主要见于M3型白细胞。

Chediak-Higashi畸形2022/12/1573为白细胞胞浆中出现的直径2~5μm的紫蓝色或淡灰色包涵体，常见于Chediak-Higashi综合征（常染色体隐性遗传），可影响粒细胞功能，易于出现严重感染。

Alder-Reilly畸形2022/12/1574为白细胞胞浆中出现的巨大深染嗜天青颗粒，呈深红色或紫色包涵体，为常染色体隐性遗传，患者常伴有骨或软骨畸形疾病。

May-Hegglin畸形2022/12/1575为白细胞胞浆中出现的无定形的淡蓝色包涵体，与Dohle小体相同，但大而圆，为细胞器破坏产物。为常染色体隐性遗传，属于良性畸形。白细胞直方图解析WBC（%）（fl）100200300400正常白细胞直方图左侧高陡，为小细胞群峰，在35~95fl，主要为淋巴细胞，最右侧峰低宽，在160~450fl，为大细胞群峰，主要为中性粒细胞，中间为中间细胞群，主要以单个核细胞为主淋巴细胞峰区域异常：血小板聚集、巨大血小板、有核红细胞、白细胞碎片等淋巴细胞峰与单个核细胞峰间异常：异淋、浆细胞、原始细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞增多单个核细胞区与中性粒细胞峰之间区域异常：未成熟粒细胞、异常细胞亚群、核左移、嗜酸或嗜碱性粒细胞中性粒细胞峰区域异常：中性粒细胞绝对值增多多部位报警：同时存在2种或2种以上的异常WBC（%）（fl）100200300400正常白细胞原始、幼稚白细胞增多淋巴细胞减少和中性粒细胞增多淋巴细胞增多和中性粒细胞减少异常白细胞直方图100200300400WBC（%）（fl）中间细胞群增多巨大血小板增多干扰单个核细胞绝对值增多正常白细胞异常白细胞直方图79三、血小板检测1.血小板计数（plateletcount,PLT）原理：单位容积外周血中血小板数量方法：自动化血细胞分析仪，手工法参考值：（100-300）×109/L2022/12/1580

3.1临床意义生理变化新生儿PLT较少，3个月后达到成人水平晨间变化：早晨较低，进食或运动后升高妇女经期或妊娠期PLT升高午后较高，冬季高于夏季动脉＞静脉＞外周血2022/12/1581病理变化PLT增多：＞400×109/L，见于慢粒、溶血性贫血、脾切除、急性化脓性感染、急性出血、PLT增多症PLT减少：＜100×109/L，见于造血功能障碍（急性白血病、再障、药物损害）、破坏过多（药物中毒、ITP、TTP）、细菌或病毒感染（败血症、伤寒、麻疹）2022/12/15

3.2血小板平均容积参考值：MPV7~11fl，PDW15%~17%MPV增多：血小板破坏增加而骨髓代偿功能正常者；骨髓造血功能抑制解除后造血功能恢复的首要表现。MPV减低：骨髓造血功能不良；白血病；骨髓造血功能衰竭2022/12/1582

3.3血小板平均分布宽度反映血小板容积大小的离散程度。增高见于急性髓性白血病；巨幼细胞性贫血；慢性粒细胞性白血病；脾切除；巨大血小板综合征等。2022/12/1583血小板异常2022/12/1584血小板大小不等大血小板异形血小板血小板卫星现象血小板聚集血小板直方图（fl）10203040PLT(%)正常血小板直方图大血小板增多直方图正常：偏态分布的单个峰的光滑曲线，在2~30fl内，主要集中在2~15fl异常：可见于大血小板、小红细胞、血小板聚集、红细胞残骸不同类型血小板直方图第二节

溶血性贫血的检验2022/12/1586

1、基本概念溶血性贫血：指各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速，而骨髓造血功能不能相应代偿而发生的一类贫血。病因：1、红细胞内在缺陷导致2、红细胞外因素导致2022/12/1587882、溶血性贫血的分类按导致溶血的因素分：RBC内在缺陷所致的溶贫（1）

RBC膜缺陷：PNH（2）

HB结构异常：地中海贫血（3）RBC内酶缺陷：G-6PD缺陷症RBC外来因素所致的溶贫AIHA、药物、化学因素、感染因素2022/12/1589按溶血发生的位置分：血管内溶血：RBC在循环血液中直接破坏如PNH血管外溶血：RBC在脾脏破坏如球形RBC增多症、脾亢原位溶血：幼RBC在骨髓中溶血如AL、巨幼贫2、溶血性贫血的分类2022/12/153、溶血性贫血的筛查检测3.1、血浆游离血红蛋白检测参考值：<50mg/L(1~5mg/dl)临床意义：血管内溶血时升高；血管外溶血时正常；自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血轻度增高。2022/12/1590参考值0.7~1.5g/L（1~5mg/dl）临床意义

各种溶血均减低，血管内溶血减低最显著；肝脏疾病、传单、先天性无结合珠蛋白血症可减低或消失；感染、创伤、恶性肿瘤等可增高。

3.2、血清结合珠蛋白测定2022/12/1591924、红细胞膜缺陷的检验红细胞渗透脆性试验酸溶血试验(Ham)蔗糖水试验2022/12/15934.1、

红细胞渗透脆性试验原理测定红细胞对不同浓度低渗氯化钠溶血的抵抗能力方法

将病人红细胞一次加入按比例配置的不同浓度的氯化钠溶液中观察溶血情况。2022/12/1594

参考值开始溶血：0.42%~0.46%（4.2~4.6g/L）

完全溶血：0.28%~0.34%（2.8~3.4g/L）临床意义

（1）脆性增高遗传性球形红细胞增多症

（2）脆性减低小细胞低色素性贫血：地中海贫血、缺铁性贫血2022/12/1595原理细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6PD）(丙酮酸激酶)导致葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。方法在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物，看溶血能否纠正。4.2、自身溶血试验及纠正试验2022/12/1596参考值正常人轻微溶血，溶血度<3.5%；加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，溶血度<1%。临床意义G-6PD缺乏症患者溶血增加，加葡萄糖、ATP溶血部分纠正，丙酮酸激酶缺乏症者加葡萄糖不能纠正，加入ATP能纠正。2022/12/1597

5、酸溶血试验(Ham)

原理

红细胞与弱酸血清（pH6.6~6.8）37℃

孵育1小时观察红细胞溶解情况

临床意义正常人阴性，阵发性睡眠性血红

蛋白尿患者（PNH）阳性2022/12/15986、高铁血红蛋白还原试验

G-6PD缺乏症筛选试验参考值高铁血红蛋白还原率>75%；高铁血红蛋白0.3~1.3g/L临床意义减低：蚕豆病、伯氨喹型药物所致溶血

2022/12/152022/12/1599NADP++H+NADPHHbFe3+HbFe2+实验中先加入亚硝酸钠使HbFe2+氧化为HbFe3+，然后加入美兰作为递氢体，检测吸光度值计算还原率。高铁血红蛋白为暗红色，在630nm~650nm处吸光度最强。美蓝白美蓝MetHb还原酶磷酸戊糖途径G6PD2022/12/1510020mg葡萄糖离心4℃过夜1ml血液亚硝酸钠、美蓝各0.05ml颠倒混匀15次，37℃温育3h磷酸盐缓冲液10ml，2min比色,计算还原率磷酸盐缓冲液10ml，2min操作过程图解余下血液红：浆=1：10.1ml亚硝酸钠-葡萄糖溶液，5min0.1ml1017.1血红蛋白电泳检测原理根据不同的血红蛋白电荷、等电点均不同，在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH大于Hb的等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极。参考值HbA＞95%、HbF＜2%、HbA2为1.0%～3.1%。

7、珠蛋白合成异常的试验2022/12/15102临床意义HbA2增高是诊断β-轻型地中海贫血重要依据HbA2减低见于缺铁性贫血及铁粒幼细胞贫血

2022/12/15103

原理直