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材料与方法

2.1测验材料

2.1.1供试虫源

种蚜、种蜂在云南省红河州弥勒县新哨三角地烟蚜茧蜂繁育基地在温室内饲养。

2.1.2试剂

（1）脂肪测定所用试剂。胆固醇、磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）、磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O）、三氯甲烷、甲醇、浓硫酸、香兰素。

（2）总蛋白测定所用试剂。考马斯亮蛋白测定蓝试剂盒（100T，南京建成生物工程研究所），现配现用，氯化钠、蒸馏水。

（3）糖类测定所用试剂。浓硫酸、葡萄糖、蒽酮、三氯乙酸、氢氧化钾、无水乙醇、蒸馏水等。以上所用化学试剂均为国产分析纯。

2.1.3仪器

制冰机、冷藏柜、恒温水浴锅、多功能台式高速冷冻离心机、T6新世纪紫外可见分光光度计、酶联免疫检测仪、移液枪、5mL具塞玻璃管、容量瓶、烧杯、玻璃棒、研磨棒。

2.2试验方法

将种蚜接种到5叶1心烟苗上，任其繁殖2d后去除母蚜。待烟蚜发育至2～3龄举行接蜂，当寄生蚜大量形成时，将寄生蚜叶片采摘置于8℃±0.5℃恒温箱中，冷藏5d后除掉未形成僵蚜的烟蚜和寄生蚜，将僵蚜叶转移至3℃（吴兴富＼[5＼]等研究察觉烟蚜茧蜂蛹期的最正确冷藏温度为3～5℃）冷藏箱中，每隔10d、20d、30d、40d取出，测定不同冷藏期烟蚜茧蜂（蛹）养分物质的变化及其羽化率。以未冷藏烟蚜茧蜂（蛹）为对照，每处理3个重复。

2.2.1脂肪的测定

参照Handel＼[16＼]和Pennington＼[17＼]的方法，做了片面修改。

（1）标准曲线的制作。取7支具塞玻璃管编号1～7，分别参与2.5mg/mL胆固醇标准溶液0、5、10、20、40、60和100μL，每支玻璃管加100μL氯仿甲醇溶液100μL抽提5min。加500μL浓硫酸，沸水浴10min流水冷却后加香兰素试剂1000μL，充分混匀，黑暗显色30min后酶标仪490nm波长下测定吸光值，以胆固醇含量为横坐标，吸光值为纵坐标做标准曲线如图1。

图1烟蚜茧蜂脂肪含量测定标准曲线

（2）脂肪的提取。取烟蚜茧蜂（蛹）20头于0.5mLEP管中称重（蛹重），按重量体积比1∶9参与PBS缓冲液充分研磨后于4℃下1000r/min离心10min。取中间澄清液，再以4℃、1000r/min离心10min，取上清液20μL。

取上清液5μL于另一只1.5mLEP管中，参与氯仿甲醇溶液1000μL抽提5min后加濃硫酸500μL，沸水浴加热10min，流水冷却至室温。加香兰素试剂1

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