紫外可见分光计课件

紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见吸收光谱朗伯-比耳定律紫外-可见分光光度计分析条件的选择测定方法在医学检验中的应用紫外分光光度计的使用原理和方法1紫外-可见分光光度法ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用,对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外可见分光光度法紫外-可见分光光度法ultraviolet-visible2紫外-可见分光光度法的特点1与其它光谱分析方法相比,其仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快2灵敏度高;3选择性好;4精密度和准确度较高5用途广泛。紫外-可见分光光度法的特点3§1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的,利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性,这就是光谱法的基础§1.紫外-可见吸收光谱4通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。如图3-1;在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长λma进行物质含量的测定。通过测定被测物质对不同波长的光的吸52有机化合物的紫外-可见吸收光谱1有机化合物的电子跃迁与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种,即形成单键的σ电子、形成双键的丌电子以及未参与成键的n电子跃迁类型有:σσ、nG、TTn-*四种。2有机化合物的紫外-可见吸收光谱6饱合有机化合物的电子跃迁类型为a→*,n→σ*跃迁,吸收峰一般出现在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大不饱合机化合物的电子跃迁类型为π→π*跃迁,吸收峰一般大于200nm饱合有机化合物的电子跃迁类型为a→*,7生色团:是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外可见光的原子团或结构系统定义为生色团见表3-1和3-2。助色团:是指带有非键电子对的基团,如OH、OR、NHR、SH、Cl、-Br、-I等,它们本身不能吸收大于200nm的光,但是当它们与生色团相连时,会使生色团的吸收峰向长波方向移动,并且增加其吸收强度。见表3-4。生色团:是指分子中可以吸收光子而产生电8红移和紫移在有机化合物中,常常因取代基的变更或溶剂的改变,使其吸收带的最大吸收波长入m发生移动。向长波方向移动称为红移(表33),向短波方向移动称为紫移。红移和紫移922有机化合物的吸收带吸收带absorptionband在紫外光谱中,吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类,可将吸收带分为四种类型R吸收带(2)K吸收带(3)B吸收带(4)E吸收带22有机化合物的吸收带10紫外可见分光计课件11紫外可见分光计课件12紫外可见分光计课件13紫外可见分光计课件14紫外可见分光计课件15紫外可见分光计课件16紫外可见分光计课件17紫外可见分光计课件18紫外可见分光计课件19紫外可见分光计课件20紫外可见分光计课件21紫外可见分光计课件22紫外可见分光计课件23紫外可见分光计课件24紫外可见分光计课件25紫外可见分光计课件26紫外可见分光计课件27紫外可见分光计课件28紫外可见分光计课件29紫外可见分光计课件30紫外可见分光计课件31紫外可见分光计课件32紫外可见分光计课件33紫外可见分光计课件34紫外可见分光计课件35紫外可见分光计课件36紫外可见分光计课件37紫外可见分光计课件38紫外可见分光计课件39紫外可见分光计课件40紫外可见分光计课件41紫外可见分光计课件42紫外可见分光计课件43紫外可见分光计课件44紫外可见分光计课件45紫外可见分光计课件46紫外可见分光计课件47紫外可见分光计课件48紫外可见分光计课件49紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见吸收光谱朗伯-比耳定律紫外-可见分光光度计分析条件的选择测定方法在医学检验中的应用紫外分光光度计的使用原理和方法50紫外-可见分光光度法ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用,对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外可见分光光度法紫外-可见分光光度法ultraviolet-visible51紫外-可见分光光度法的特点1与其它光谱分析方法相比,其仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快2灵敏度高;3选择性好;4精密度和准确度较高5用途广泛。紫外-可见分光光度法的特点52§1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的,利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性,这就是光谱法的基础§1.紫外-可见吸收光谱53通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。如图3-1;在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长λma进行物质含量的测定。通过测定被测物质对不同波长的光的吸542有机化合物的紫外-可见吸收光谱1有机化合物的电子跃迁与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种,即形成单键的σ电子、形成双键的丌电子以及未参与成键的n电子跃迁类型有:σσ、nG、TTn-*四种。2有机化合物的紫外-可见吸收光谱55饱合有机化合物的电子跃迁类型为a→*,n→σ*跃迁,吸收峰一般出现在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大不饱合机化合物的电子跃迁类型为π→π*跃迁,吸收峰一般大于200nm饱合有机化合物的电子跃迁类型为a→*,56生色团:是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外可见光的原子团或结构系统定义为生色团见表3-1和3-2。助色团:是指带有非键电子对的基团,如OH、OR、NHR、SH、Cl、-Br、-I等,它们本身不能吸收大于200nm的光,但是当它们与生色团相连时,会使生色团的吸收峰向长波方向移动,并且增加其吸收强度。见表3-4。生色团:是指分子中可以吸收光子而产生电57红移和紫移在有机化合物中,常常因取代基的变更或溶剂的改变,使其吸收带的最大吸收波长入m发生移动。向长波方向移动称为红移(表33),向短波方向移动称为紫移。红移和紫移5822有机化合物的吸收带吸收带absorptionband在紫外光谱中,吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类,可将吸收带分为四种类型R吸收带(2)K吸收带(3)B吸收带(4)E吸收带22有机化合物的吸收带59紫外可见分光计课件60紫外可见分光计课件61紫外可见分光计课件62紫外可见分光计课件63紫外可见分光计课件64紫外可见分光计课件65紫外可见分光计课件66紫外可见分光计课件67紫外可见分光计课件68紫外可见分光计课件69紫外可见分光计课件70紫外可见分光计课件71紫外可见分光计课件72紫外可见分光计课件73紫外可见分光计课件74紫外可见分光计课件75紫外可见分光计课件76紫外可见分光计课件77紫外可见分光计课件78紫外可见分光计课件79紫外可见分光计课件80紫外可见分光计课件81紫外可见分光计课件82紫外可见分光计课件83紫外可见分光计课件84紫外可