生化实验试卷

诚信考试沉着应考杜绝违纪浙江大学2008–2009学年夏学期《医学生物化学实验》课程期末考试试卷开课学院：医学院，考试形式：闭卷，允许带___________入场考试时间：2009年6月27日,所需时间：60分钟*理论考试占总成绩60％，平时实验成绩占总成绩40％。多项选择题（每个2分，共20分）1.下列方法中哪一种不能将谷氨酸和赖氨酸分开?A．电泳B．阴离子交换层析C．阳离子交换层析D．凝胶过滤2.在什么情况下，一种蛋白质在电泳时既不向正级移动，也不向负极移动，而停留在原点？A．发生蛋白质变性B．电极缓冲液的pH正好与该蛋白质的pI相同C．电极缓冲液的pH大于该蛋白质的pID．电极缓冲液的pH小于该蛋白质的pI3.可用于蛋白质分子量测定的方法包括A:SDS－PAGEB:亲和色谱C:排阻色谱D:透析4.分离纯化中可用于物质浓缩的方法包括A.沉淀；B.吸附C.超滤D透析.5.用于分离纯化时其方法的原理与被分离物质的分子量有关的是A.SDSB.离子交换色谱C.超滤D抽提6.影响电泳的外界因素有：A.电泳介质的pH值B.电场强度C.缓冲溶液的离子强度D.电渗作用7.聚丙烯酰胺凝胶电泳具有下列哪些效应：A.浓缩效应B电荷效应C分子筛效应D扩散作用8.提取核酸的方法有：A苯酚法B氯仿-异戊醇法CSDS法D核酸酶法9.血清醋酸纤薄膜电泳结果的条带包括下列哪些蛋白：A白蛋白Bα2-球蛋白Cγ-球蛋白Dβ-球蛋白10.测定核酸含量的方法有：A定磷法B定糖法C紫外分光光度法D定碳法单选题（每个1分，共20分）紫外法定量检测核酸选用的波长是A.260nmB.280nmC.254nmD.230nm下列不是用于蛋白质定量测定的方法是A.福林－酚法B.考马斯亮蓝法C.定磷法D.双缩脲法下列方法与免疫学原理没有关系的是.A.蛋白印迹技术B.ELISAC.亲和色谱D超滤考马斯亮兰能与蛋白质的哪个区域相结合？A疏水区B亲水区C肽键D羧基末端在DNA提取过程中，沉淀DNA用A无水乙醇B乙醚C氯仿D戊醇6．SDS时其迁移速率主要取决于蛋白质的A带电性B相对分子量C分子形状D生物活性7．聚丙烯酰胺凝胶制备过程中使用的催化剂是ATEMEDBSDSC过硫酸铵DTris-HCl8．脂类薄层层析中使用的显色剂是A茚三酮B考马斯亮兰C磷钨酸D磷钼酸9．离子交换层析分离混合氨基酸时，洗脱天冬氨酸用ApH5.0,0.1M柠檬酸缓冲液B0.1MNaOH溶液C2MHCl溶液DpH2.2,0.1M柠檬酸缓冲液10．凝集素的制备过程中，洗脱凝集素用A.NaCl溶液B.葡萄糖溶液C.蒸馏水D.磷酸缓冲液11.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是A．马肝过氧化氢酶（分子量247,500）B．肌红蛋白（分子量16,900）C．血清清蛋白（分子量68,500）D．牛-乳球蛋白（分子量35,000）12.有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3，电泳时欲使其中四种泳向正极，缓冲液的pH应是多少A．4.0B．5.0C．6.0D．713.从组织提取液沉淀活性蛋白而又不使之变性的方法是加入A．硫酸铵B．三氯醋酸C．氯化汞D．1mol/LHCL14.一酶促反应，1/V对1/[S]作图得一直线，在某一抑制剂存在时，得到第二条直线，它在1/[S]轴上与第一条直线相交。这说明：A．该抑制是不可逆抑制B．该抑制属非竞争性抑制C．S和I（抑制剂）对酶分子的同一部分都有亲和力D．如增加[S]，该抑制作用可被解除判断题（每个1分，共20分）在进行大分子分离纯化时，杂质是含量最高的那些组分，所以要去除。吸附色谱是分离生物大分子常用到的色谱方法。抽提液中加入蔗糖、甘油、巯基乙醇等物质是为了改变溶液的极性。核酸抽提中加入SDS、TritonX-100、Tween40有利于使膜蛋白和脂肪溶解。沉淀法是将所需要的成分沉淀下来从而使其与杂质分离。应用密度梯度离心技术可以将粗面内质网和滑面内质网彼此分离。超速离心是指离心力达到100,000g的离心。冷冻及抽真空装置是每台离心机必须具备的。电泳法测定蛋白质分子量是一种最准确的方法。亲和色谱法是一种分离效果最好的极为理想的色谱方法。用透析袋进行脱盐处理比用凝胶过滤法快而且样品损失少。盐析法最常用的盐是硫酸铵。双向凝胶电泳方法是进行蛋白质组学研究的最理想的技术。蛋白质分离纯化中最简便而且专一的检测方法是测定UV280。同时采用用SDS和凝胶过滤方法进行蛋白质分子量测定可以得到可靠结果。DNP和RNP都能溶于1-2M的NaCl溶液中。用260nm进行紫外分光光度测定，可以测出DNA的含量和纯度。在纸层析过程中，谷氨酸的迁移速率比丙氨酸快。从酶反应的进程曲线上，可以求出酶反应初速率的时间范围。一填空题（每格3分，共60分）1、实验中常用的浓缩方法有：、、等方法2、核酸的含量可用和法来测定。蛋白质提取纯化中防止变性的基本防范措施是__________________及__________________。3、脂薄层层析中通常用作为支持剂，用_______________作显色剂4、凝胶层析法基本原理是，纸层析法一般以为固定相，以为流动相5、亲和层析是的一种层析术。固定相由和共价结合构亲和层析洗脱方法分和两种方法。6、电泳是指