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文档简介
自动血凝仪(automatedcoagulationanalyzer)的检测原理第三章(一)凝固法定量加取试剂、提供37±0.5℃的反应温度血浆血浆凝固(反应终止)试剂反应槽用于测定血浆凝固时间散射比浊:散射光强度透射比浊:吸光度大小1.比浊法→均增大2.电流法(钩法)连通断开连通(二)生物化学法:(过量)产色物质-底物+
酶→→产色物质(显色)水解1.酶(活化凝血因子)的检测:
用于测定凝血因子(酶原)、活化凝血因子(酶)及酶抑制物(AT、抗纤溶酶)的活性。产色物质:对硝基苯胺(PNA),游离PNA呈黄色,测定波长405nm。
2.酶原(凝血因子)的检测:3.酶抑制物的检测:
(过量)激活剂
+
酶原
↓(过量)产色物质-底物+酶→→产色物质(显色)水解
酶抑制物
+(过量、定量)酶
↓(过量)产色物质-底物+(剩余)酶→→产色物质(显色)水解(三)免疫学方法1.透射比浊法2.散射比浊法3.胶乳比浊法抗原+抗体→抗原抗体复合物浊度增加散射光、吸光度增加胶乳颗粒用于检测凝血因子、酶抑制物的含量。凝血功能检测试验的检测前质量控制:★停用有影响的药物一周以上(抗凝治疗监测者除外)★抗凝剂:109mmol/L的枸橼酸钠;抗凝比:1︰9★止血带使用时间要短,采血应顺利,无凝血、溶血★容器:真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器★标本储存:4~10℃,<2h;(常温、不超过2h)凝血功能检测试验的检测前质量控制:1948年由德国人Harter发明1980年代,开始广泛用于临床指导术中输血取得了良好效果,现已成为当今围术期监测凝血功能的最重要指标。1995-1996年,开始在心脏外科使用。目前以TEG为主要监测手段的体外循环术中凝血监测方案已经在世界上40多个国家使用。二、凝血弹性图仪的历史:2004年,抗血小板药物疗效监测的血小板图试验—PlateletMapping上市,为临床带来了快速、准确的监测血小板聚集功能的技术。三、凝血弹性图仪的原理:承载血标本的测试杯以4°45'的角度和每10秒一周的速度均速转动,一旦血栓形成,置于血标本检测杯中的金属探针受到标本形成的切应力作用,随之出现左右旋动,金属针在旋动过程中由于切割磁力线而产生电流,给电脑软件处理后,便形成TEG曲线。四、凝血弹性图(血栓弹力图):五、凝血弹性图的参数:(一)R时间1、从检测开始到第一块纤维蛋白凝块形成之间的一段潜伏期,是凝血因子依次激活的时间,反映凝血因子(Fg除外)与血小板PF3的活性。2、R时间因使用抗凝剂或凝血因子、血小板异常而延长,因血液呈高凝状态而缩短。(二)K时间(R+K正常为10~12min)1.从R时间终点至描记图幅度达20mm所需的时间;2.主要与Fg、其它凝血因子和PF3活性有关,抑制它们活性的抗凝剂能延长K。(三)α角度1.从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角,正常为50°~60°。2.α角度与K时间密切相关,影响因素相同。3.α角度不受极其低凝状态的影响,较K时间更全面(五)最大幅度MA1.正常值为50~60mm。2.MA反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度及血凝块形成的稳定性;3.主要受PLT及Fg、FⅩⅢ活性的影响,PLT的作用要比Fg大。(六)TMA时间(timetoMA)1.从凝血开始至MA值确定所需用的时间2.TMA包含血凝块的形成速率,评估形成稳定血凝块所需用的时间。LY30上=85%LY30下=15%(九)TTL1、TTL=Timetolysis溶解时间2、指从MA确定后,曲线幅宽收窄至2mm时所经过的时间参数意义R凝血反应时间K血细胞凝集块形成时间α血细胞凝集块形成速率MA最大振幅A30最大振幅后30min的振幅LY30MA后30min振幅减小百分率CL30MA后30min血凝块溶解剩余%TEG常用参数方法R(r)K(k)TMA(m)MA(ma)EMX(mε)minminminmm自然全血10~165~1035~4545~5580~130全血复钙4~82~425~3545~5580~135血浆复钙4~81~320~3050~65105~180参数写法与参考值正常TEG图高凝状态TEG纤溶亢进TEGTEG检测与常规实验室检测的区别
项目TEG常规检查操作方便性简单,易学。一个样本,同种试剂,床边可完成。操作复杂,多种样本,不同的试剂,必须在实验室进行。监测范围凝血和纤溶连续的全过程凝血或纤溶过程中的一个点或部分时程血样形式不须处理,全血、血浆、富血小板血浆等都可须处理血样,以血浆或特定血样为主结果定性伴定量的结果,电脑可自动生成多种结果。多为定量结果,仪器自动生成部分结果,结果单一。报告有初步诊断
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