高中生物专题5课题3血红蛋白的提取和分离练习新人教版选修1

【金版教学设计】2015-2016高中生物专题5课题3血红蛋白的提取和分别练习新人教版选修1一、凝胶色谱法——血红蛋白的分别方法1．看法凝胶色谱法是依照相对分子质量的大小分别蛋白质的有效方法，也称作分配色谱法。2．原理形态：渺小的多孔球体凝胶组成：大多数由多糖类化合物组成结构：内部有好多贯穿的通道分别原理：①相对分子质量较小的蛋白质：简单进入凝胶内部的通道，行程较长，搬动速度较慢，经过凝胶柱的时间较长。②相对分子质量较大的蛋白质：无法进入凝胶内部的通道，只幸亏凝胶外面搬动，行程较短，搬动速度较快，经过凝胶柱的时间较短。二、缓冲溶液1．作用在必然范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，保持pH基本不变。2．配制平时由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，调治缓冲剂的使用比率就可以制得在不同样pH范围内使用的缓冲液。三、电泳——血红蛋白的分别或判断方法1．看法带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。2．原理(1)好多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都拥有可解离的基团，在必然的pH下，这些基团会带上正电或负电。(2)在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极搬动。(3)电泳利用了待分别样品中各种分子带电性质的差别以及分子自己的大小、形状的不同，使带电分子产生不同样的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分别。四、蛋白质的提取和分别过程蛋白质的提取和分别一般分为四步：样品办理、粗分别、纯化和纯度判断。一、选择题．使用凝胶色谱法分别蛋白质实验中，相对分子质量不同样的蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为以下列图中(B)剖析：凝胶色谱法是依照相对分子质量的大小分别蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道，行程较长，搬动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质，行程较短，搬动速度较快，第一洗脱出来。2．使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同样蛋白质的电泳迁移率完满取决于(B)A．电荷的多少B．分子的大小C．肽链的多少D．分子形状的差别剖析：SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物，SDS所带的负电荷量大大高出蛋白质分子原有的电荷量，所以掩盖了不同样蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完满取决于分子的大小。3．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液办理的目的是(D)A．防范血红蛋白被氧气氧化B．血红蛋白是一种碱性物质，需磷酸中和C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D．让血红蛋白处在牢固的pH范围内，保持其结构和性质剖析：磷酸缓冲液的作用是牢固pH，从而保持血红蛋白的结构和性质。4．蛋白质的分别与纯化是蛋白质研究的重要技术。以下相关表达不正确的选项是(A)A．依照蛋白质分子不能够透过半透膜的特点，可将样品中各种不同样的蛋白质分别B．依照蛋白质所带电荷性质的差别及分子大小等，可经过电泳分别蛋白质C．依照蛋白质相对分子质量的大小，可经过凝胶色谱法分别蛋白质D．依照蛋白质的分子大小、密度不同样，可经过离心沉降法分别蛋白质5．在提取血红蛋白的样品办理阶段，冲洗红细胞十分重要，其目的是(B)A．让红细胞破裂，释放血红蛋白B．洗去血浆蛋白C．防范血液凝固D．保证红细胞的正常形态剖析：血液中含有多种蛋白质，除红细胞内的血红蛋白，血浆中还含有多种蛋白质，这些蛋白质在血红蛋白释放出后会与其混杂，需要在红细胞破裂前将其除掉。6．蛋白质提取和分别分为哪几步(C)A．样品办理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品办理、凝胶色谱操作、纯化C．样品办理、粗分别、纯化、纯度判断D．样品办理、纯化、粗分别、纯度判断剖析：蛋白质的提取和分别分为样品办理、粗分别、纯化、纯度判断四步。A中凝胶色谱操作及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。7．以下对凝胶电泳的相关认识，错误的选项是(A)A．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只取决于分子的大小B．蛋白质在SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完满取决于分子的大小C．SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳不但用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混杂组分的分别D．凝胶中加入SDS能够除掉净电荷对迁移率的影响剖析：SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质分子所带的负电荷远远高出天然蛋白质分子的负电荷，除掉了不同样蛋白质分子的电荷效应，使蛋白质分子相对迁移率的大小完满取决于相对分子质量的高低。8．在血红蛋白的提取和分别实验中，以下操作正确的选项是(A)A．分别红细胞时需去除上层透明的黄色血浆B．红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水C．分别血红蛋白溶液是低速短时间隔心D．洗脱时，待红色蛋白质下移即开始收集流出液剖析：分别红细胞时要及时除掉血浆蛋白。释放红细胞时需要加入蒸馏水和甲苯。分别血细胞时，要短时低速离心，即一般为500r/min，离心2min，否则白细胞会一同积淀，达不到分别收效。分别血红蛋白时要高速长时间隔心，以2000r/min的速度离心10min。洗脱时待红色的蛋白质凑近色谱柱底端用试管收集流出液。9．以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的选项是(D)A．冲洗血红细胞时，使用生理盐水能够防范红细胞破裂B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分别过程的监测D．在凝胶色谱法分别过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白搬动慢剖析：在凝胶色谱法分别蛋白质的过程中，相对分子质量较小的蛋白质简单进入凝胶内部的通道，行程较长，搬动速度较慢；而相对分子质量较大的分子无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外面搬动，行程较短，搬动速度较快。所以血红蛋白分子比相对分子质量较小的杂分子搬动速度要快。10．以下相关提取和分别血红蛋白的表达，错误的选项是(B)A．样品的办理就是经过一系列操作收集到血红蛋白溶液B．经过透析能够去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取C．可经过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除掉，即样品的纯化D．可经过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳判断血红蛋白的纯度剖析：粗分别即透析，其目的是除掉样品中相对分子质量较小的杂质，B错误。二、非选择题11．此刻人类已跨入了蛋白质时代，对蛋白质的研究和应用，第一需要获得高纯度的蛋白质。请回答以下问题。(1)蛋白质的提取和分别一般分为四步：__________、__________、__________和纯度鉴定。若是要从红细胞中分别出血红蛋白，实验前取新鲜血液要在采血容器中起初加入柠檬酸钠，这样做的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)血红蛋白的提取又能够细分为：红细胞的冲洗、____________________、分别血红蛋白溶液和__________。其中分别血红蛋白溶液时需要用到__________(仪器)分别出基层红色透明液体。装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能够有气泡存在，一旦发现有气泡必定重新装。这是因为________________________________________________________________________。(5)欲研究色谱柱的高度可否影响蛋白质分其他因素，应把______________________作为自变量，把________________________________________________________________________作为没关变量，把____________________________________作为因变量。答案：(1)样品办理粗分别纯化防范血液凝固血红蛋白的释放透析分液漏斗气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分别收效(5)色谱柱的高度变化缓冲液的用量和pH、样品的用量、温度等因素大小不同样的蛋白质分子的间距12．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主若是由血红蛋白完成的。我们能够采纳猪、牛、羊等动物的血液进行实验，来提取和分别血红蛋白，请回答以下相关问题：实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中起初加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。①其中加入柠檬酸钠的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②此过程即是样品办理，它应包括红细胞冲洗、________________、分别血红蛋白溶液。③冲洗红细胞的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分别。①透析的目的是________________________________________________________________________。②透析的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)尔后经过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。其中经过凝胶色谱法将样品纯化的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。剖析：(1)柠檬酸钠是一种抗凝剂，加入柠檬酸钠能够防范血液凝固；样品办理包括红细胞的冲洗、血红蛋白的释放、分别血红蛋白溶液；冲洗红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分别纯化。(2)透析袋一般是用硝酸纤维素制成的，透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，透析能够去除样品中分子量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液。(3)凝胶色谱法是依照相对分子质量的大小分别蛋白质的方法，所以，经过用凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质。答案：(1)①防范血液凝固②血红蛋白的释放③去除杂蛋白①去除相对分子质量较小的杂质②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内经过凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质13．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。请依照血红蛋白的提取和分别流程图回答以下问题。将实验流程补充完满。(2)凝胶色谱法的基根源理是依照________________________分别蛋白质。冲洗红细胞的目的是去除________，冲洗干净的标志是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。分别血红蛋白时，由上到下第________层是血红蛋白水溶液。(5)下面是凝胶色谱法分别血红蛋白时样品的加入表示图，正确的加样次序是________。若是红色区带________________，说明色谱柱制作成功。剖析：(1)样品办理包括：红细胞的冲洗、血红蛋白的释放、分别血红蛋白溶液。凝胶色谱操作包括：凝胶色谱柱的制作、凝胶色谱柱的装填、样品的加入和洗脱。

(2)凝胶色谱法的基本原理是依照相对分子质量的大小分别蛋白质。

(3)冲洗红细胞的目的是去除杂蛋白，冲洗干净的标志