仪器分析技术复习课件

仪器分析技术复习课实验一：高锰酸钾的含量测定测定方法：紫外可见分光光度法

-----适用于测定不饱和的有机物及某些无机物定量方法：标准曲线法

---------标准曲线定义（与吸收曲线有何不同），标准曲线法的应用，标准曲线的计算方法。定量的依据：朗伯比尔定律--------定律的描述，数学表达式。原理部分如何知道这一紫色溶液为高锰酸钾溶液？定性方法：对比法定性依据：吸收光谱特征数据处理用EXCEL作图得到回归方程，进一步计算求得样品的浓度。例：由标准溶液的浓度(c,单位为mg/ml)与吸光度（A）可求得回归方程：A=130.4c+0.23。已知样品溶液的吸光度平均值为0.580，则该样品溶液的浓度为多少？实验二：维生素B12注射液鉴别与含量测定测定方法：紫外可见分光光度法定量方法：吸光系数法（吸光系数法的计算方法）。标示量的百分含量是何意义？定量的依据：朗伯比尔定律原理部分实验部分精密吸取一定量的维生素B12注射液，按照标示含量，用蒸馏水准确稀释n倍，使稀释后试样溶液的质量浓度为25μg/mL。将试样溶液和空白溶液分别盛于1cm石英吸收池中，在（361±2）nm和（550±2）nm处分别测定其吸光度A样。求出361与550nm处吸光度的比值，并与《药典》规定数值比较。以361nm左右的最佳波长为测定波长，测定供试溶液的吸光度值。定性的方法？空白溶液是什么？如何选择测定波长？3.比色皿和光源的选择？数据处理实验三：金属离子柱色谱和混合染料的薄层色谱色谱机理：均为吸附色谱机理吸附剂----硅胶、氧化铝黏合剂----锻石膏、羧甲基纤维素纳原理部分极性大的组分，分配系数（或容量因子）越____，保留时间越____，比移值越______。组分固定，减小展开剂的极性，比移值将变_____。实验结果处理比移值：计算方法最佳范围0.3～0.5，可用范围0.2～0.8，相邻两组分比移值应相差0.05以上。定性方法：对比比移值例：分离罗丹明B与二甲基黄的混合溶液：点样线距溶剂前沿10cm,点样线距罗丹明B斑点中心4.0cm,点样线距二甲基黄斑点中心6.0cm。根据以上数据可求得二甲基黄的比移值为___，罗丹明B的比移值为_______。这两个物质中，极性更大的是_____。按色谱分离机理分类，该色谱属于___________。实验四、五：甘草流浸膏（啤酒）中乙醇含量的测定测定方法：气相色谱法

在药学上主要的应用1.用于原料药和薄膜衣片中残留溶剂和挥发性杂质的检查2.用于制剂中乙醇含量的测定3.用于有一定挥发性的原料药及其制剂的含量测定原理部分定量方法：内标法特点定量结果与进样量无关，只要被测组分及内标物出峰，且分离度合乎要求，就可定量，与其它组分是否出峰无关，故适合于杂质及微量组分的定量。对内标物的要求A．内标物应是样品中不存在的组分B．加入内标物的量应与被测组分的量相近C．内标物的保留时间应与待测组分相近,但彼此能完全分离(R≥1.5)D．内标物必须是纯度合乎要求的纯物质E．内标物应能完全溶解于样品中且不得与待测组分发生化学反应。定性方法：对照品对照法

----依据保留值（保留时间）进行定性实验部分溶液的配制（1）对照溶液配制：准确吸取无水乙醇2.5ml及丁醇（内标物）2.5ml，置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。（2）供试溶液配制：准确吸取丁醇2.5ml置50ml容量瓶中，加啤酒稀释至刻度，摇匀。色谱条件：色谱柱：毛细管柱30m×0.53mm;柱温：90℃；检测器：FID;检测器温度：200℃；气化室温度：180℃;N2（载气）+H2+空气；进样量：0.5μl;气相色谱仪的基本操作步骤如何？（1）通风，检漏，开载气，开主机电源，开电脑。（2）设置检测器、进样器和色谱柱的温度，待三个部分的温度已达稳定，开空气与氢气并调节流量，点火。(3)打开电脑在线软件系统，设定各项测量参数及数据文件保存位置。点击“开始”按钮后，将被测试样注射入气化室，注射完毕，立即按仪器主机上的START按钮开始分析。利用电脑离线软件进行数据的分析，打印报告。(4)实验结束，先关闭氢气，待火焰自动熄灭之后关闭空气。将柱温适当升高运行半小时之后，将温度设置为室温。待气化室、柱温、检测器温度均降至室温之后，最后关载气。测定方法：高效液相色谱法

应用应用于可制成样品，对挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物的分析尤为有利。原理部分实验六、七：氯霉素眼药水的含量测定（HPLC)定量方法：标准曲线法实验部分供试品溶液的配制准确吸取氯霉素滴眼液（8ml:20mg)1.0ml置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。以0.22μm有机相滤膜过滤，续滤液超声10min后备用。流动相的配制

按甲醇：水=80：20的比例配制流动相300ml，以0.45μm有机相滤膜过滤，续滤液超声30min后备用。

色谱条件：

色谱柱：填料：HypersilODS，5μm尺寸：4.6mm×250mm。检测器：UVD；检测波长：248nm流动相：甲醇：水=80：20流速1ml/min进样量：20μl;高效液相色谱仪的基本操作步骤（1）制备样品与制备流动相，样品与流动相皆经微孔滤膜过滤，超声脱气后使用。（2）把滤器浸入流动相中，启动泵。排除贮液瓶至高压泵间管路中的气泡。将流速调节至分析用流速，用流动相对色谱柱进行平衡。（3）开启检测器、计算机及色谱数据工作站。开启在线分析软件，对各项测量参数进行设定。进行检测器的回零操作，进行斜率测试，符合要求后进样。同步采集色谱数据，手动或自动保存色谱数据。分析完毕利用离线软件对测定结果进行处理。（4）关闭检测器和计算机电源。清洗泵头和进样器，冲洗柱子30～60min，关闭泵电源。关于系统适用性实验色谱柱的理论塔板数：按各品种项下的要求分离度：待测组分与相邻共存物之间的分离度应大于1.5重复性：应用外标法定量时，对照品溶液连续进样5次，相对标准偏差应不大于2.0%。内标法定量时，配制3种不同浓度的溶液，分别进样至少2次，计算平均校正因子，其相对标准偏差大于2.0%拖尾因子：除另有规定外，峰高法定量时T应在0.95～1.05之间。峰面积法测定时，若拖尾严重，将影响峰面积的准确定量，必要时，应在各品种项下对拖尾因子作出规定。实验八：肌苷注射液的含量测定测定方法：高效液相色谱法定量方法：外标法原理部分实验部分供试品溶液的配制准确吸取肌苷注射液（2ml:100mg)1.0ml置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。取从中再吸取1.0ml置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。以0.22μm水相滤膜过滤，续滤液超声10min后备用。流动相的配制

按甲醇：水=10：90的比例配制流动相300ml，以0.45μm