化妆品微生物指标检验

化妆品微生物检验化妆品因含有水分，油脂，蛋白质，多元醇等，为微生物的生长创造了良好的条件，造成产品变质。为了抑制微生物的繁殖和消费者使用过程中的产品污染，往往在化妆品中加入防腐剂，但不能过量。因此，化妆品一方面为微生物的生长繁殖提供了良好的环境；另一方面由于防腐剂的应用又可抑制微生物的生长。化妆品卫生标准微生物检验方法GB/T7918.1-1987化妆品微生物标准检验方法总则菌落总数（化妆品卫生规范-2007年）

GB/T7918.2-1987化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定

粪大肠菌群：GB/T7918.3-1987化妆品微生物标准检验方法粪大肠菌群铜绿假单胞菌（化妆品卫生规范-2007年）

GB/T7918.4-1987化妆品微生物标准检验方法绿脓杆菌金黄色葡萄球菌GB/T7918.5-1987化妆品微生物标准检验方法金黄色葡萄球菌霉菌和酵母菌：（化妆品卫生规范-2007年）总则微生物检验的基本要求微生物检验样品的采集、保存及制备适用范围总则1、具有代表性

随机抽取相应数量的包装单位。应从批的整体中各部位抽取，如从四角+中间；分上、中、下层；或上、中上、中、中下、下层；梅花点式等。所有接触样品的工具、容器都必须保持清洁。

样品的采集2、抽/采样数量按照抽样批及抽样方案JJF1070－2005定量包装商品净含量计量检验规则3、检验量

检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量可适当增加样品包装数量。

样品的制备液体样品膏、霜、乳剂半固体状样品固体样品样品的制备注意事项无菌容器、材料及操作样品的均一性样品的检验及保管

及时检验样品应放在室温阴凉干燥处样品先进行微生物检验，再做其他指标须防止微生物的再污染和扩散如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发出之日起该菌种及被检样品应保存一个月菌落总数检验验菌落总数（Aerobicbacterialcount）是指化妆品品检样经过处处理，在一定定条件下培养养后（如培养养基成分、培培养温度、培培养时间、pH值、需氧性质质等），1g（1mL）检样中所含含菌落的总数数。所得结果只包包括一群本方方法规定的条条件下生长的的嗜中温的需需氧性菌落总总数。测定菌落总数数便于判明样样品被细菌污污染的程度，，是对样品进进行卫生学总总评价的综合合依据。数据处理混合平板的制备细菌的培养检查结果、观察与计数供试液的制备书写检验记录单化妆品中防腐腐剂抑制细菌菌的生长.含卵磷脂、吐吐温80营养琼脂培养养基进行中和和。对尼泊金类、苯苯甲酸类、六六氯酚类等有效，但对卡松类的防腐剂的中中和效果有限限。卡松的中和剂剂半胱氨酸,可较好的中和和卡松的抑菌菌效果。因此此,检测时不同的的防腐剂加入入不同的中和和剂为便于区别化化妆品中的颗颗粒与菌落，，可在每100mL卵卵磷脂吐温温80营营养琼脂中加加入1mL0.5％％的TTC溶液，如如有细菌存在在，培养后菌菌落呈红色，，而化妆品的的颗粒颜色无无变化。在膏霜类类化妆妆品中,微生物物都是是吸附附或附附着于于颗粒粒状的的原料料中,检测时时不易易洗脱脱下来,因此,需要验验证检检测方方法的的有效效性。。粪大肠肠菌群群粪大肠肠菌群群（Fecalcoliforms）系一一群需需氧及及兼性性厌氧氧革兰兰氏阴阴性无无芽胞胞杆菌菌，在在44.5℃℃±0.5℃培培养24h～～48h能能发发酵乳乳糖产产酸并并产气气。该菌直直接来来自粪粪便，，是重重要的的卫生生指示示菌。。产酸：黄色产气：气泡产酸产气书写检验记录单不产酸不产气增菌培养供试液的制备配培养基和稀释液检查结果判断44±0.5℃24~28h分离培养蛋白胨水培养最终结果判断44±0.5℃24±2h靛基质特征菌落36±1℃18~24h双倍胆盐乳糖MEMB琼脂液面玫瑰红色紫黑色★粪大大肠菌菌群检检查流流程图图铜绿假假单胞胞菌铜绿假假单胞胞菌（（Pseudomonasaeruginosa））属于于假单单胞菌菌属，，为革革兰氏氏阴性性杆菌菌，氧氧化酶酶阳性性，能能产生生绿脓脓菌素素。此此外还还能液液化明明胶，，还原原硝酸酸盐为为亚硝硝酸盐盐，在在42℃℃±1℃条条件下下能生生长。。该菌对对人有有致病病力，，可使使伤处处化脓脓，引引起败败血症症等。。最终结结果判判断增菌培培养供试液液的制制备书写检检验记录单单分离纯纯化无菌落落或无无特征征菌落落配培养养基和和稀释释液革兰染色、镜检→氧化酶试验绿脓菌素试验生化试验硝酸盐还原试验

42℃生长试验明胶液化试验★铜绿绿假单单胞菌菌检查查流程程图SCDLP培养基十六烷三甲基溴化铵琼脂36±±1℃℃18~24h36±±1℃℃18~24h特征菌落灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素十六烷烷三甲甲基溴溴化铵铵平板板SCDLP培养基基黄绿色色菌膜膜灰白色色湿润润氧化酶酶试验验粉红/紫红色色绿脓菌素试试验盐酸层呈粉粉紫色氯仿仿层呈蓝绿绿色硝酸盐还原原产气试验验N2明胶液化试试验明胶培养基基（高层））明胶液化金黄色葡萄萄球菌金黄色葡萄萄球菌（Staphylococcusaureus）为革兰兰氏阳性球球菌，呈葡葡萄状排列列，无芽胞胞，无荚膜膜，能分解解甘露醇，，血浆凝固固酶阳性。。该菌是葡萄萄球菌中对对人类致病病力最强的的一种，能能引起人体体局部化脓脓性病灶，，严重时可可导致败血血症。革兰染色、、镜检→生化试验:血浆凝固酶酶试验甘露醇发酵酵试验最终结果判判断增菌培养供试品的处处理书写检验记录单分离纯化无菌落或无无特征菌落落配培养基和和稀释液36±1℃℃36±1℃℃SCDLP培养基或7.5%NaCl肉汤24±2hBairdParker’s或血琼脂24~48h特征菌落★金黄色葡葡萄球菌检检查流程图图BairdParker’’s平板灰/黑色甘露醇发酵酵试验血浆凝固酶酶试验血浆凝块液态血浆霉菌和酵母母菌霉菌和酵母母菌数测定定（Determinationofmoldsandyeastcount）是指化妆妆品检样在在一定条件件下培养后后，1g或1mL化妆品中所所污染的活活的霉菌和和酵母菌数数量，藉以以判明化妆品被霉霉菌和酵母母菌污染程程度及其一一般卫生状状况。检验结果正正确的保证证设备方面：：恒温培养设设备高压灭菌器器超净工作台台均质器天平显微镜材料要求：：无菌容器及及溶液；材料充足；；培养基的制制备与质量量控制；人员操作方方面：无菌操作，，避免污染染；一定专业技技术日常维护：设备的计量量与保证；；超净台及时时清洁与杀杀菌；检验后材