非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖课件

肝纤维化的诊断肝纤维化的诊断1肝纤维化的危害肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化的中间环节。多种慢性肝病共同的病理学基础是肝纤维化，其发生机制是机体对炎症的修复反应，如同疤痕形成于创伤一样。慢性肝病患者若不经过及时的诊断、合理的治疗，病情反复发作，其中10%~15%的人5~10年后发展成为肝硬化。如果能阻滞或逆转肝纤维化进展，将会提高患者的生存质量，在很大程度上改善肝病的预后。肝纤维化的危害肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化的中间环节。多2肝纤维化发生的机制正常的肝脏由分布在基质中的肝细胞和肝窦组成。基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖硫酸肝素硫酸软骨素硫酸角质素透明质酸胶原肝纤维化发生的机制正常的肝脏由分布在基质中的肝细胞和肝窦组3Alcohol,Acetaldehyde,NADHKupffercellMonocytePlateletTNF-αTGF-ß,PDGF,IL-1,IL-6,TGF-ß,TGF-α,IGF,EGFRestingTransitionalActivatedEndothelialSinusoidalItocell Itocell Itocell cellExtracellularmatrixMMPTIMP

ProductionofextracellularmatrixbyalcoholdrinkingAlcohol,Acetaldehyde,NADHKup4非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖课件5非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖课件6Figure20.LSECisroundwithclearboundaryandmanyfenestrae(somearelarge)andsieveplatesinthenormalrat.TEM×8,000.

Figure20.LSECisroundwith7Figure23.Attheendof8weeksofethanolfeeding,silk-likestickwindedaroundthecell.TEM×6,000.

Figure23.Attheendof8week8HSCDesmin免疫细胞化学染色（×40）非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖课件9肝纤维化的诊断1.组织病理学2.影像学诊断3.血清学诊断肝纤维化的诊断1.组织病理学10组织病理学检查肝活检组织病理学检查仍是诊断肝纤维化和肝硬化的“金标准”。HE染色细胞外基质组织化学免疫组织化学分子原位杂交技术计算机图像分析方法组织病理学检查肝活检组织病理学检查仍是诊断肝纤维化和肝硬化11组织病理学检查但肝活检技术也有一定的局限性：难以避免取样误差（即一次取材不一定能反映整个肝脏的全貌）病人不愿接受多次肝穿刺因而不便于观察肝纤维化的动态变化或治疗效果。组织病理学检查但肝活检技术也有一定的局限性：12NormalhepatichistologicmanifestationNormalhepatichistologicmani13Hepatichistopathologicchangeofalcoholicratattheendof8w(HE×400)Hepatichistopathologicchange14Hepaticcollagenstainingofalcoholicratattheendof8wMassonx200Hepaticcollagenstainingofa15Hepaticcollagenstainingofalcoholicratattheendof16wMassonx200Hepaticcollagenstainingofa16儿童NASH伴纤维化男，12岁，肥胖：1年来ALT:413--481U/L儿童NASH伴纤维化男，12岁，肥胖：1年来ALT:41317影像学诊断B型超声、CT、MRI等可以发现：肝包膜增厚肝表面轮廓不规则或呈结节状肝实质回声不均匀增强或CT值增高各叶比例改变脾脏厚度增加门静脉和脾静脉直径增宽影像学诊断B型超声、CT、MRI等可以发现：18在酒精性肝病中Fibroscan是准确诊断无症状性肝纤维化的指标，明显优于Fibrotest和透明脂酸可以使用Fibroscan来筛选无症状酒精性肝纤维化患者。

E.Nguyen-Khac,B.Robert,M.Brevet

.JHepatology,SupplNo1,46,2007.

LSM对于区别具有明显肝纤维化和肝硬变的酒精性的病人，是一个有用的工具。

P.Nahon,M.Ziol,V.deLedinghen

.JHepatology,SupplNo1,46,2007.

法国Munteann采用LSM、FM+FT系统分析809例慢性肝病患者研究结果显示,FS不适用于对肋间隙狭窄、肥胖及腹水患者的肝脏检测。

法国Bureau采用FS系统检测150例丙型肝炎和酒精性肝硬化患者的肝脏硬度认为,检测到的肝脏硬度是肝硬化门脉高压的预测指标。Fibroscan(FS)在酒精性肝病中Fibroscan是准确诊断无症状性肝纤维化的19血清学诊断基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖硫酸肝素硫酸软骨素硫酸角质素透明质酸胶原细胞血小板、酶学、免疫学、细胞因子血清学诊断基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白蛋白多糖胶20Ⅲ型前胶原肽（PⅢP或PCⅢ）前胶原转化为胶原时，被分解下来的PⅢP可在体内存在一定时间，因此测定血清中PⅢP可作为判定肝纤维化的较新指标（本院<130ng/ml）。

PⅢP与肝脏炎症活动指数有一定关系，因而在急性肝炎和肝功能衰竭时升高；慢性肝炎时持续升高提示病情可能会恶化并向肝硬变、肝癌发展，而PⅢP降至正常可预示病情缓解。Ⅲ型前胶原肽（PⅢP或PCⅢ）前胶原转化为胶原时，被21血清Ⅳ胶原（CⅣ）（CollagenTypeⅣ，CⅣ）在合成代谢过程中不需去除端肽而沉积于细胞外基质，故血中Ⅳ型胶原的含量升高可能反映了肝血窦基底膜的更新率加快。基础和临床研究均发现血清Ⅳ型胶原水平和肝纤维化及门脉高压程度密切相关，与肝脏炎症活动关系小。若和反映间质胶原合成的指标PⅢP联合应用能更好地了解肝纤维增生和纤维分解的平衡情况。本指标的另一特点是不受人体生长的影响，故也适用于儿童病例。但是肾纤维化和全身结缔组织疾病时血清CⅥ升高也很显著，临床上应注意鉴别（本院<70ng/ml）。

血清Ⅳ胶原（CⅣ）（CollagenTypeⅣ，CⅣ22纤维蛋白连接素(FN)FN以血浆型和细胞型两种形式广泛存在于血液和组织基质中，参与细胞与细胞、细胞与间质的粘附过程。血清FN主要来自肝细胞，随纤维化程度而增加，急性肝炎时FN增高（本院<90ng/ml）。肝硬变、重型肝炎及肝癌时明显降低。可能由于FN和纤维蛋白及胶原紧密结合，大量血浆FN沉积于肝纤维组织中；也可能与患者营养不良，各种维生素缺乏有关。纤维蛋白连接素(FN)FN以血浆型和细胞型两种形式广泛存在于23层粘连蛋白(也称板层素LN)LN是基底膜的主要成分，也是一种糖蛋白，与Ⅳ型胶原结合形成基底膜骨架。肝纤维化时，随肝窦内皮细胞的胶原沉着形成基底膜而毛细血管化，血清中LN增高，正常参考值为48～114ng/ml（本院<120ng/ml）。

LN可反映肝纤维化的进展与严重程度，慢活肝和肝硬变及原发性肝癌时明显增高。与纤维增生性门脉高压密切相关，LN水平越高，肝硬变病人的食管静脉曲张越明显。层粘连蛋白(也称板层素LN)LN是基底膜的主要成分，也是一种24透明质酸(hyaluronicacid，HA)HA是由蛋白质与多糖共价结合形成的一类糖蛋白，主要反映HSC和LSEC的功能。肝纤维化血清HA水平升高：

HSC对其合成增加、肝血窦毛细血管化和肝血窦内皮细胞受损伤导致对血清中的HA摄取增多和降解减少所致。

HA随着肝病的发展与转归相平行，可以作为反映肝功能改变情况，评估肝纤维化发展趋势的一个灵敏指标。正常参考值为2～115ng/ml（本院<130ng/ml）。在晚期肝硬化时，由于肝血窦内皮细胞功能更低下，故血清HA值可能更高。透明质酸(hyaluronicacid，HA)HA是由蛋白25血清学诊断基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖硫酸肝素硫酸软骨素硫酸角质素透明质酸胶原血清学诊断基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白蛋白多糖胶26其他血清学指标MMP:

日本学者Murawaki等报慢性病毒性肝炎患者血清中国MMP-1降低而MMP-2升高，可以不同程度地反映肝纤维化及肝硬化的进展情况。TIMP-1:血清TIMP-1的水平和肝纤维化程度有较高的相关性，且在各组慢性肝病之间重叠较少，是一项反映肝脏细胞外基质降解活性低下的指标。单胺氧化酶（MAO）、赖氨酰氧化酶（lysyloxidase）、免疫反应性脯氨酸羟化酶（ir-β-PH），N-乙酰-β氨基葡萄糖苷酶（NAG）以及脯氨酸肽酶(prolidase；PLD)、P-Z肽酶及胶原酶等其他血清学指标MMP:

日本学者Murawaki等报慢性27肝纤维化不同诊断方法的比较

检测方法

准确性安全性方便性诊断意义病理学诊断高

存在一定的损伤性和危险性

需要专业人员和器材，很难反复取材诊断可靠，但不便于动态观察肝纤维化的情况。影像学诊断辅助作用无危险性方便只能在肝纤维化晚期才能出现异常图像，因此不可能作为早期诊断。检查可以发现肝纤维化的某些征象，但不能对纤维化做出确诊，更难于准确判断肝纤维化的严重程度。血清学诊断较高无危险性取材方便、容易复查可以对肝组织纤维化不同阶段做出相对准确的诊断。了解肝脏纤维化的发展变化情况，也可大致了解抗纤维化的治疗的临床效果。肝纤维化不同诊断方法的比较检测方法准确性安全性方便性诊断28谢谢！听课真累呀！！了讲别谢谢！听课真累呀！！了讲别29肝纤维化的诊断肝纤维化的诊断30肝纤维化的危害肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化的中间环节。多种慢性肝病共同的病理学基础是肝纤维化，其发生机制是机体对炎症的修复反应，如同疤痕形成于创伤一样。慢性肝病患者若不经过及时的诊断、合理的治疗，病情反复发作，其中10%~15%的人5~10年后发展成为肝硬化。如果能阻滞或逆转肝纤维化进展，将会提高患者的生存质量，在很大程度上改善肝病的预后。肝纤维化的危害肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化的中间环节。多31肝纤维化发生的机制正常的肝脏由分布在基质中的肝细胞和肝窦组成。基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖硫酸肝素硫酸软骨素硫酸角质素透明质酸胶原肝纤维化发生的机制正常的肝脏由分布在基质中的肝细胞和肝窦组32Alcohol,Acetaldehyde,NADHKupffercellMonocytePlateletTNF-αTGF-ß,PDGF,IL-1,IL-6,TGF-ß,TGF-α,IGF,EGFRestingTransitionalActivatedEndothelialSinusoidalItocell Itocell Itocell cellExtracellularmatrixMMPTIMP

ProductionofextracellularmatrixbyalcoholdrinkingAlcohol,Acetaldehyde,NADHKup33非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖课件34非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖课件35Figure20.LSECisroundwithclearboundaryandmanyfenestrae(somearelarge)andsieveplatesinthenormalrat.TEM×8,000.

Figure20.LSECisroundwith36Figure23.Attheendof8weeksofethanolfeeding,silk-likestickwindedaroundthecell.TEM×6,000.

Figure23.Attheendof8week37HSCDesmin免疫细胞化学染色（×40）非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖课件38肝纤维化的诊断1.组织病理学2.影像学诊断3.血清学诊断肝纤维化的诊断1.组织病理学39组织病理学检查肝活检组织病理学检查仍是诊断肝纤维化和肝硬化的“金标准”。HE染色细胞外基质组织化学免疫组织化学分子原位杂交技术计算机图像分析方法组织病理学检查肝活检组织病理学检查仍是诊断肝纤维化和肝硬化40组织病理学检查但肝活检技术也有一定的局限性：难以避免取样误差（即一次取材不一定能反映整个肝脏的全貌）病人不愿接受多次肝穿刺因而不便于观察肝纤维化的动态变化或治疗效果。组织病理学检查但肝活检技术也有一定的局限性：41NormalhepatichistologicmanifestationNormalhepatichistologicmani42Hepatichistopathologicchangeofalcoholicratattheendof8w(HE×400)Hepatichistopathologicchange43Hepaticcollagenstainingofalcoholicratattheendof8wMassonx200Hepaticcollagenstainingofa44Hepaticcollagenstainingofalcoholicratattheendof16wMassonx200Hepaticcollagenstainingofa45儿童NASH伴纤维化男，12岁，肥胖：1年来ALT:413--481U/L儿童NASH伴纤维化男，12岁，肥胖：1年来ALT:41346影像学诊断B型超声、CT、MRI等可以发现：肝包膜增厚肝表面轮廓不规则或呈结节状肝实质回声不均匀增强或CT值增高各叶比例改变脾脏厚度增加门静脉和脾静脉直径增宽影像学诊断B型超声、CT、MRI等可以发现：47在酒精性肝病中Fibroscan是准确诊断无症状性肝纤维化的指标，明显优于Fibrotest和透明脂酸可以使用Fibroscan来筛选无症状酒精性肝纤维化患者。

E.Nguyen-Khac,B.Robert,M.Brevet

.JHepatology,SupplNo1,46,2007.

LSM对于区别具有明显肝纤维化和肝硬变的酒精性的病人，是一个有用的工具。

P.Nahon,M.Ziol,V.deLedinghen

.JHepatology,SupplNo1,46,2007.

法国Munteann采用LSM、FM+FT系统分析809例慢性肝病患者研究结果显示,FS不适用于对肋间隙狭窄、肥胖及腹水患者的肝脏检测。

法国Bureau采用FS系统检测150例丙型肝炎和酒精性肝硬化患者的肝脏硬度认为,检测到的肝脏硬度是肝硬化门脉高压的预测指标。Fibroscan(FS)在酒精性肝病中Fibroscan是准确诊断无症状性肝纤维化的48血清学诊断基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白纤维连接蛋白层粘连蛋白蛋白多糖硫酸肝素硫酸软骨素硫酸角质素透明质酸胶原细胞血小板、酶学、免疫学、细胞因子血清学诊断基质Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅳ型)非胶原蛋白糖蛋白蛋白多糖胶49Ⅲ型前胶原肽（PⅢP或PCⅢ）前胶原转化为胶原时，被分解下来的PⅢP可在体内存在一定时间，因此测定血清中PⅢP可作为判定肝纤维化的较新指标（本院<130ng/ml）。

PⅢP与肝脏炎症活动指数有一定关系，因而在急性肝炎和肝功能衰竭时升高；慢性肝炎时持续升高提示病情可能会恶化并向肝硬变、肝癌发展，而PⅢP降至正常可预示病情缓解。Ⅲ型前胶原肽（PⅢP或PCⅢ）前胶原转化为胶原时，被50血清Ⅳ胶原（CⅣ）（CollagenTypeⅣ，CⅣ）在合成代谢过程中不需去除端肽而沉积于细胞外基质，故血中Ⅳ型胶原的含量升高可能反映了肝血窦基底膜的更新率加快。基础和临床研究均发现血清Ⅳ型胶原水平和肝纤维化及门脉高压程度密切相关，与肝脏炎症活动关系小。若和反映间质胶原合成的指标PⅢP联合应用能更好地了解肝纤维增生和纤维分解的平衡情况。本指标的另一特点是不受人体生长的影响，故也适用于儿童病例。但是肾纤维化和全身结缔组织疾病时血清CⅥ升高也很显著，临床上应注意鉴别（本院<70ng/ml）。

血清Ⅳ胶原（CⅣ）（CollagenTypeⅣ，CⅣ51纤维蛋白连接素(FN)FN以血浆型和细胞型两种形式广泛存在于血液和组织基质中，参与细胞与细胞、细胞与间质的粘附过程。血清FN主要来自肝细胞，随纤维化程度而增加，急性肝炎时FN增高（本院<90ng/ml）。肝硬变、重型肝炎及肝癌时明显降低。可能由于FN和纤维蛋白及胶原紧密结合，大量血浆FN沉积于肝纤维组织中；也可能与患者营养不良，各种维生素缺乏有关。纤维蛋白连接素(FN)FN以血浆型和细胞型两种形式广泛存在于52层粘连蛋白(也称板层素LN)LN是基底膜的主要成分，也是一种糖蛋白，与Ⅳ型胶原结合形成基底膜骨架。肝纤维化时，随肝窦内皮细胞的胶原沉着形成基底膜而毛细血管化，血清中LN增高，正常参考值为48～114ng/ml（本院<120ng/ml）。

LN可反映肝纤维化的进展与严重程度，慢活肝和肝硬变及原发性肝癌时明显增高。与纤维增生性门脉高压密切相关，LN水平越高，肝硬变病人的食管静脉曲张越明显。层粘连蛋白(也称板层素LN)LN是基底膜的主要成分，也是一种53透明质酸(hyaluronicacid，HA)HA是由蛋白质与多糖共价结合形成的一类糖蛋白，主要反映HSC和LSEC的功能。肝纤维化血清HA水平升高：

HSC对其合成增加、肝血窦毛细血管化和肝血窦内皮细胞受损伤导致对血清中的