细胞培养注意事项

细胞培养注意事项第1页，共13页。1.无菌操作区更衣室、缓冲间、无菌操作间：专用于无菌操作、细胞培养。无菌操作间的空气消毒：紫外线灯产生臭氧，并且室内温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。空气过滤的恒温恒湿装置最好。第2页，共13页。更衣室的使用第一更衣室:拖去鞋子，大衣等个人物品。第二更衣室：换上工作服。1.工作服挂在里面，紫外线消毒每天30分钟。2.定期清洗工作服，84消毒。第3页，共13页。

缓冲间

1.传递、暂放物品。2.关门，保持正压。3.摆放清洁工具。4.垃圾及时清楚。5.实验准备。第4页，共13页。无菌操作间消毒：1）晚间或早上8点开启紫外灯30分钟，关闭通风30分钟再行进入2）紫外灯开启需记录时间。进入无菌间的相关注意事项：1.穿cultureroom专用拖鞋2.将双手洗净并以70﹪酒精擦拭双手3.于cultureroom内不要聊天、围观（教学除外）。第5页，共13页。超净工作台的使用消毒：超净工作台UV灯，晚上或早上开启30分钟，通风15min后方可工作。(1)操作前,以75%酒精喷洒,并以无尘布拭净；或用酒精棉擦拭。(2)使用时需确定UVlightoff;风扇on

（3）使用完毕，同（1）进行清洁。第6页，共13页。实验操作须知:(1)瓶子或试管，于开或关之前，瓶颈与瓶口瓶盖须以火焰消毒

(2)尽可能缩短瓶口打开时间

(3)过程中，若有液体滴在操作台上，立即以

75﹪酒精擦拭干净

(4)废液集中于废液瓶，待实验结束一并处理

(5)含Virusparticle之废弃物需加84消毒液后再丢弃

(6)Cultureflask需标示使用者之姓名第7页，共13页。其他注意事項：1）个人产生的垃圾，除小吸管、棉球等需自行带出，污染物品务必带出。2）小组物品摆放整齐3）纸箱一律放置培养室外，各课题组自行准备塑料可消毒外壳的容器。4）各家自行清理CO2Incubator,每周至少一次。第8页，共13页。值日1.地板每星期以消毒液拖干净，台面，容器表明擦拭消毒2.随时注意incubatorCO2浓度及CO2筒之CO2剩余量3.随时注意incubator之温度及湿度第9页，共13页。4.需随时注意垃圾桶若已填满，将垃圾打包放置垃圾桶并更换新的垃圾袋，每日下班清理。5.incubator内一但发现细胞污染，马上告知负责人立即处理。6.Incubator每周清洗水盘，并更换已消毒的水，加入防腐剂。第10页，共13页。预约1.细胞室将使用预约制，请提前至少半天预约工作台，以半小时为单位。已有人预约的时段，原则上不安排他人。2.预约表将以群文件的放在实验室群组，同学们在网上预约后直接保存。第11页，共13页。移液器的使用1.勿倒吸2.抽取含有病毒颗粒等液体时，请使用有滤心的枪头。3.用后请放回枪架。4.定期高压灭菌。第12页，共13页。内容梗概细胞培养注意事项。更衣室、缓冲间、无菌操作间：专用于无菌操作、细胞培养。无菌操作间的空气消毒：紫外线灯产生臭氧，并且室内温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。消毒：1）晚间或早上8点开启紫外灯30分钟，关闭通风30分钟再行进入2）紫外灯开启需记录时间。消毒：超净工作台UV灯，晚上或早上开启30分钟，通风15min后方可工作。(1)操作前,以75%酒精喷洒,并以无尘布拭净。（3）使用完毕，同（1）进行清洁。(1)瓶子或试管，于开或关之前，瓶颈与瓶。(5)含Virusparticle之废弃物需加84消毒液后。(6)Cultureflask需标示使用者之姓名。1）个人产生的垃圾，除小吸管、棉球等需自行带出，污染物品务必带出。4）各家自行清理CO2Incubator,每周至少一次。1.地板每星期以消毒液拖干净，台面，容器表明擦拭消毒。2.随时注意incubatorCO2浓度及CO2筒之CO2剩余量。