含有部分背景知识和修正答案分子生物学

：1、反义RNA：指与mRNA互补的RNA分子，也包括与其它RNA互补的RNA分子。根据反义RNA的作用机制可将其分为3类反义RNA直接作用于靶mRNASDmRNARNA，从而易被RNA酶Ⅲ降解；Ⅱ类反义RNAmRNA的非编码区结合，引起mRNARNAmRNA2、生物：生物，又称DNA或，它们是DNA杂交探针技术上后与带荧光标记的DNA样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交3、SD序列：mRNA起始子AUG上游8～13个碱基处存在的一段特定的核苷酸序列，该序列称为SD序列，是mRNA的起始子之所以能与小亚基定位结合的关键。SD序列与小亚基中16SrRNA3’端的序列互补，当mRNA与小亚基结合时，SD序列与16SrRNA3’端的互补序列配对结合，使起始子定位于DNA背景增强子(er)指增加同它连锁的转录频率的A序列增强子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于的端，也可位于的端，有的还可位于的内含子中。强子的效应很明显一般能使转录频率增加～0倍有的甚至可以高达上千倍增强子能:[的变动;[]6DNARNA件而调节转录活性的蛋白质因子。在结构上含有与DNA结合的结构域参与表达调控的因子,它们与特异的靶的顺式元件结合起作用。编码反式作用因子的与作用因子可被诱导合成,其活性也受多种因素的调节。 组DNA的大区段而 背景：用正常的质粒与噬菌体λ的cos位点构成。其上的cos位点可识别噬菌体外壳蛋白。凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的组，就可以同外壳蛋白结合而被包装成类似噬菌体λ的颗粒。因此，质粒载体的外源DNA片段的长度可大于40kb，从而大大增加了载体的携带能力。10、 动物：应用 技术培育的携带外 并能稳定遗传的动物中特定的，从而使特定的在细胞内或生物体内失活的过程14、克隆：通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。15、组：细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和18、RNA：是指由短双链RNA诱导的同源mRNA的降解过程，可使表达1920、生物信息学：是物信息，处理，，，分析和解释等各方面的一门学科，它通过综合利用生物学，计算机科学和而揭示大poly(A)加尾信号。22、端粒：以线性形式存在的真核组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。端粒DNA由重复序列组成，人类端粒一端是TTAGGG另一端AATCCC.23、RFLP（限制性片段长度多态性）之间DNA的核苷酸序列存在差异，称为DNA多态性。由于碱基组成的变化而改变了限制性内切酶的酶切位点，从RFLP。25RNADNADNA、30：利用分子生物学技术方法，直接检测体内DNA或RNA的结构或水 、31、治疗的概念：治疗是指通过一定方式将目的或有治疗作用的DN段导入的靶细胞，使其发挥生物学效应，从而达到治疗疾病目的33、PCR(PolymeraseChainReactionDNA体外合成放大技术，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定DNA互补的子链DNA的过程，可用于已知序列或部分已知序列的检测；或扩34、G蛋白：G蛋白是细胞内信号传导途径中起着重要作用的GTP结合蛋白，由α，β，γ35、核酶（ribozyme）是具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂，可降解特异mRNARNA、RNA1、简述治疗的基本程序。 ①目的的选择和②的转③选择治疗用靶细胞④治疗性的导入⑤外源的筛检导入体内2、简述Rb产物的抑癌机制；RbE2F（G1/SSRbE2FRb（c-myc，c-（4）磷酸化程度与细胞周期密切相关：在G0、G1期，低磷酸化型的Rb白与转录激活因子E-2F合，使后者失活SRb白被磷酸化与E-2F离，细胞立即进入增殖阶）3cAMPcAMP－PKAG（GTP，α与βγ解离）③G蛋白磷酸化，调节代谢酶的活性或调节的表达cAMP－PKA→G（GTPGDPαβγ→AC4PCR依据DNA半保留的机理；体外DNA分子于不同温度下可变性和复性的性质。作为引物的一对寡核苷酸与模板DNA同源序列按照碱基互补配对原则形成局部TaqDNADNA25-30退火和延伸的循环，获得特异性的DN段扩增产物。PCR的原理是根据待测DN段两端的核苷酸序列，设计并人工合成两个分别与DN段两dNTP板（待扩增片段的DNA分子）的反应体系中，经过高温变性（使DNA链解开、低温退火（使引物与模板结合）和适温延伸（新合成的DN段）三个阶段的循环周期，对DNA分子进行5、真核生物和原核生物组的特点原核生物组结构特点细菌等原核生物的组是一条双链闭环的DNA分具有子结原核组中只有1个起结构无现编码区在组中所占的比例远远大于真核组，但又远远小于具有编码同工酶的细菌组中存在着可移动的DNA序列，包括序列和转座在DNA分子中具有多种功能的识别区域，如起始区、终止区、转录真核生物组结构特点真核组远远大于原核生物的组真核具有许多起点，每个子大小不一。每一种真核生物都有一定mRNA真核生物组中重复顺序真核生物组内非编码的顺序（NCS）占90%以上。编码序列占5%，真核产断列，即编码序列被非编码序列分隔开来与内非编DNA，内非编码序列为内含子，被内含子隔开的编码序列则为，相距很远，但即使串联在一起成族的也是分别转录的。真核生物组中也存在一些可移动的遗传因素这些DNA顺序并无明显生物DNA1、DNA结合域有不同的结构模式：①锌指结构借助半胱氨酸和组氨酸与锌离子结合；②同源结构域具有螺旋－回折－螺旋结构：许多反式作用因子结合DNA60螺旋结构的区域，称为同源结构域（hommain,HD）,简称同源域。③亮氨酸DNA聚体⑤碱性α-螺旋含较多的碱性氨基酸。2、转录活化结构域是反式作用因子ααDNA合结构域相连。①一般具有三个功能域：DNA③对的表达有正性或负性调控作用，激活和阻遏的表达7、 聚合酶的功能一、DNA（DNAKornbergpolymerase聚合酶活性；5’3’外切酶活性；3’5’外切酶活性。cDNADNA3’Sanger[2]3'→5'外切酶活性——校对作用:3'→5'DNA生长链末端的核苷酸。[4]焦磷酸解作用:DNApol3'DNADNA生长链，可以DNADNADNA的存在。[5]焦磷酸交换作用:催化dNTPPPi8、以乳糖子例，说明细菌表达的调控原理1、乳糖子（lacoperon）的组成：大肠杆菌乳糖子含Z、Y、A三个结元件O，一个启动子P和一个调节I（是调节，编码产生阻遏蛋白。2、阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I编码的阻遏蛋白结合于3CA（降解物活化蛋白的正性调节lac启动子是弱启动子在启动子上CAP环境时cAMP浓度升高与CAP结合使CAP发生变构CAP结合于乳糖启动序列附近的CAP结合位点激活RNA聚合酶活性促进结构转录调节蛋白结合于子后促进结构的转录对乳糖子实行正调控加速合成分解乳糖的三种酶。4、协调调节：乳糖子中的I编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调9、DNA1DNADNADNADNA2DNA.OHDNA糖的变化：脱氧核糖分解，最后可引起DNA链断裂。③可导致DNA断裂：使脱氧核糖破坏或磷酸二酯键断开。④引起DNA链交联：包括DNA-DNA链间链内交联和3DNADNADNA45、其他因素：丫啶类化合物引起碱基和碱基缺失；氧自由基6、DNA也会产生自发性损伤：①DNA时产生碱基错配；②DNA修复使产生基错配；③碱基自发改变导致DNA损伤：互变异构位导致DNA突变；脱氨基作用DNADNA101、必须有自身的子2、载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点,即多克隆位点,以供外源DNA；3、载体应具有可供选择的遗传标志,以区别阳性重组子和重组子45DNA11、何谓工程？试述其产生的背景与研究内容、工程(geneticengineering)：有目的地通过分子克隆技术，利用克隆表达特定的蛋白或多肽产物，或定向改造结构所用的方法及相关的工作统称为工程。、目的的获取：从生物有机体的组中分离带有目的的DN段重组在体外将带有目的的DN段连接到能自我并具有选择标志的将重组分子导入受体细胞（细菌）:K-12DNA分析和表达将选出的细胞克隆的目的进行进一步分析并实现功能蛋白的12DNA，P53P53：位于17p13.1，约20kb，含11个外显子，产物为p53，半衰期10P53蛋白的三个结构域：氨基端结构域具有促进转录的作用；120-290区域DNACDK点等。DNAp53p53p531p21G1P21抑制cyclin-CDK活性，RB磷酸化少结合E2F，E2F不能作用于靶表DNA合成酶，细胞从G1期进入S cyclin-CDK细胞周期蛋白依赖性激（Rb，RbE2F，E2F2GADD45DNA3Bax、IGF-BP3、Fas13DNAP53DNADNAChk2P53P53，P53p21cyclin-Cdk1G1、G2（2）14-3-3，Cdc25C，G2背景：p53是与人类肿瘤相关性最高 。野生型p53是抑 ，被称：卫士。定位于17p13，编码核内磷酸化蛋白P53。该蛋白由393基酸残基构成，以四聚体形式存在，半衰期20～30分钟，分为区、酸性区、碱性区。野生型P53蛋白若修复失败，启动凋亡。p53突变后转变成癌。：14、原癌活化的机制(1)点突变；(2)扩增 重排 易位 启动子及增强子 ；(6) 的协同作用15 治疗的策略和技术方（一 治疗的主要策 correction： 添加（geneaugmentation）或称 （1）（2） （二 干预的几种方RNA，RNAmRNAmRNA2RNA,(RNA),interference，RNAi的降解过程，可使特定表达受到抑制原理：双链RNA激活Dicer，识别异常的双链RNA并将其切割成短双链23bp，合形成RNA诱导沉默复合物（RISC，双链RNA经解旋酶作用，成为单链RNA，RNA4、技术：又称为前体药物酶转化，可将无毒的前体药物代谢为细胞毒性药物，使导入的细胞“。常见的有HSV-tk/GCV系统、CD/5-FC系统。细胞进行转录时，常产生一些dsRNA（双链RNA）。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反DicerdsRNA（大约21～23bp），即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶（包括内切酶、外切酶、解旋酶等）结合形成RNA诱导的沉默复合物（RNA-inducedsilencingcomplex，RISC)。RISC与外源性表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割mRNA的降解反应。siRNARISCmRNA，而RNARNA聚合酶(RNA-dependentRNApolymerase，RdRP）作用下合成新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA，从RNAimRNA完全降解。16、目前方法有哪些（一）SouthernblotNorthernblotDNA技（二）PCR（三）单链构象多态性分析SSCP（四）DNA在人群中，间DNA序列存在着差异，称为DNA多态性。其中一些切割组DNA，就会产生长度不同的片段，称为限制性片段长度多态（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP（VNTR（SNPAluI（五）（六）DNA17、IP3、DG由PIP2水解产生的IP3是水溶性的小分子物质，离开细胞膜后能在细胞质内很IP3Ca2+-通道结合后，就能使内质网腔里的Ca2+释放到细胞质而且释放的Ca2+具有正反馈效应即释出的Ca2+结合到Ca2+Ca2+释放。DGC(proteinkinaseC,PKC)，PKCCa2IP3Ca2+PKCCa2+DG胞膜磷脂成分中的磷脂酰丝氨酸的共同作用下激活PKC。哺乳动物中脑细胞的PKCPKC因子磷酸化并激活，从而调控相关的表达。背景知识：G蛋白偶联受体的信号转导通路中的一种途径，在磷脂酰肌醇信号通4，5-二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（）两个第二信使，胞外信号转换为胞内信号（2），这一信号系统又称为信使系统（leMesserSystm）。IP3与内质网上的IP3配体门钙通道结合，开启钙通道，使胞内Ca2+浓度升高。激活以非活性形式分布于细胞溶质中，当细胞接受刺激，产生IP3，使Ca2+浓度升高，PKC便酯（phorboles