至课件讲义整理

病例2李某，男，16岁，因发烧、浮肿、血尿入院。自幼时常咽喉痛、发烧，曾因心脏杂音卧床一个月。入院前3周又因咽痛发烧而注射青霉素数日，症状消失，入院前两日高热，血尿。查体：T39℃，血压稍高，眼睑及下肢浮肿。实验室检查：尿RBC+++，尿蛋白+++，ASO抗体800单位。

思考题：1．本病怀疑为什么疾病？2．从微生物学角度应进行哪些检查？3.此致病菌致病物质有哪些？引起本病的机制？病例2李某，男，16岁，因发烧、浮肿、血尿入院。自幼1第二节链球菌属(Streptococcus）自然界、人及动物粪便和健康人鼻咽部，G+，是化脓性细菌中常见的一大类，多数不致病，※90%感染由A群链球菌引起。猪链球菌（S.suis）为动物源性病原体，世界分布，最常见对人和动物致病的为Ⅱ型，引起脑膜炎、败血症、心内膜炎及中毒性休克等。第二节链球菌属(Streptococcus）自然界2一、生物学性状

1、形态与染色:

0.6-1μm，G+，球形，链状排列，液体培养基

中链较长，

※幼龄期菌有荚膜（透明质酸），

有菌毛样结构，含型特异M蛋白α与β溶血2、培养特性：营养要求高：血平板或含血清、葡萄糖培养基需氧、兼性厌氧，液体培养为※絮状沉淀生长※血平板呈灰白色表面光滑小菌落，

不同菌株溶血不一一、生物学性状

α与β溶血2、培养特性：营养要求高：血平板或33、生化反应分解葡萄糖只产酸※触酶试验（－）（与葡萄球菌鉴别）※不分解菊糖，不被胆汁溶解（鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）3、生化反应分解葡萄糖只产酸4

4、根据抗原构造分类群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗原，可将链球菌分为20群（A-H、K-T、U、V等），引起人类感染的链球菌90％为A群。(溶血性链球菌或化脓性链球菌）群别与溶血性之间无平行关系。型特异性抗原（表面抗原）：细胞壁蛋白抗原，有M、T、R、S四种，根据M抗原不同，可将A群分为100型。荚膜细胞壁蛋白质多糖肽聚糖细胞膜细胞质4、根据抗原构造分类群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗原，55、※根据溶血现象分类：溶血现象名称类别致病性草绿色溶血溶血甲型溶血性链球菌

α-hemolyticstreptococcus多为条件致病菌完全溶血

溶血乙型溶血性链球菌

β-hemolyticstreptococcus致病力强不溶血γ溶血丙型链球菌

γ-streptococcus一般无致病性6、抵抗力不强，加热60℃30min被杀死，对消毒剂、抗生素敏感，特别是青霉素。5、※根据溶血现象分类：溶血现象名称类别致病性草绿色溶血溶6二、致病性与免疫性（一）致病物质和发病机制

1、菌体胞壁成分

（1）脂磷壁酸（LTA）：细菌定植于皮肤和呼

吸道粘膜

（2）F蛋白：与上皮细胞表面纤维粘连蛋白结

合，利于定植和繁殖

（3）M蛋白：抗吞噬和抵抗吞噬细胞内杀菌，

※与肾小球基底膜、心肌细胞有

共同抗原成分，与Ⅱ、Ⅲ超敏反应性疾病有关

二、致病性与免疫性72、链球菌溶素（streptolysin）：溶解红细胞、破坏白细胞和血小板

（1）SLO：对O2敏感，为含有-SH的蛋白质，被氧化后失去溶血活性，加入还原剂可逆转；抗原性强，刺激机体产生抗O抗体，※测定SLO抗体含量，可作为链球菌新近感染指标之一或风湿热及其活动性的辅助诊断；动物试验又证实对心脏有急性毒害作用（2）SLS：对O2稳定，小分子的糖肽，引起β溶血，无免疫原性；对热、酸敏感，不易保存；动物静注迅速致死，注射小鼠腹腔，引起肾小管坏死。

2、链球菌溶素（streptolysin）：溶解红细胞、破83、致热外毒素SPE

（streptococcalpyrogenicexotoxin）：

红疹毒素或猩红热毒素，※A群链球菌溶原性菌株产生，耐热的蛋白质，引起猩红热（scarletfever），为急性呼吸道传染病，临床特征为发热、咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的明显脱屑；该毒素还有内毒素样的致热作用，对细胞或组织有损害作用。可分为A、B、C、F4四种不同抗原性的毒素，无交叉保护作用。

3、致热外毒素SPE

（streptococcal94、侵袭性酶:※利于细菌在局部化脓性炎中扩散

（1）透明质酸酶：扩散因子，分解细胞间透明质

酸；（2）链激酶：使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋

白酶，溶解血块或阻止血浆凝固；（3）链道酶：降解脓液中高度粘稠的DNA，使脓

液稀薄；（4）胶原酶：溶解胶原纤维4、侵袭性酶:※利于细菌在局部化脓性炎中扩散

（1）透明质10（二）所致疾病：复杂而多样※A群链球菌淋巴结炎猩红热超敏反应性疾病化脓性感染中毒性疾病蜂窝组织炎脓疱疮咽炎扁桃体炎丹毒风湿热急性肾小球肾炎脓疱疮颈淋巴结炎扁桃体炎面部丹毒急性期丹毒恢复期蜂窝组织炎（由皮肤伤口侵入）（二）所致疾病：复杂而多样※A群链球菌淋巴结炎猩红热超敏11※猩红热：急性呼吸道传染病，临床特征为发热、

咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的

明显脱屑，口周苍白、草莓舌、杨梅舌

※猩红热：急性呼吸道传染病，临床特征为发热、

12

风湿热:

咽炎后发生，以关节炎、心肌炎为主。

※发病机制:

(1)M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物,沉积于心瓣膜和

关节滑膜引起Ⅲ型超敏反应

(2)链球菌多糖抗原与心瓣膜有共同抗原，引起Ⅱ型超敏反应

急性肾小球肾炎：多见于儿童和少年，扁桃

体炎和咽炎后均可发生，

蛋白尿、浮肿和高血压。

※发病机制:

(1)M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物,沉积于

肾小球基底膜引起Ⅲ型超敏反应

(2)链球菌的某些抗原与肾小球基底膜有共同抗

原，机体针对链球菌所产生的抗体与肾小球

基底膜发生反应，引发基底膜损伤，属Ⅱ型

变态反应。

风湿热:咽炎后发生，以关节炎、心肌炎为主。

※发病机13甲型链球菌人类口腔和上呼吸道的正常菌群，在拔牙或摘除扁桃体时，寄居在口腔、龈缝中的草绿色链球菌可侵入血流引起菌血症。若心脏瓣膜已有缺陷或损伤，本菌可在损伤部位繁殖，引起亚急性细菌性心内膜炎。

变异链球菌与龋齿有关D群链球菌条件致病菌，正常寄居于皮肤、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道。可引起尿路感染、腹部感染、败血症、心内膜炎。B群链球菌条件致病菌，正常寄居于直肠、阴道、鼻咽部。可引起皮肤感染、心内膜炎、产后感染、新生儿败血症和新生儿脑膜炎。甲型链球菌人类口腔和上呼吸道的正常菌群，在拔牙或摘除扁桃体时14猪链球菌病

急性的常为出血性败血症和脑炎，慢性的以关节炎、心内膜炎为特点，临床上以淋巴结脓肿为常见。一年四季均可发生，以5—11月份较多。常为地方性流行，多呈败血型，如不进行防治，则发病率、病死率很高，病猪和带菌猪是主要传染源，可以通过伤口、消化道、呼吸道等途径传染给人。

猪链球菌病属国家规定的二类动物疫病，是一种人畜共患传染病。猪链球菌病

猪链球菌病属国家规定的二类动物疫病，是一种人15（三）免疫性A群链球菌感染后，可产生特异免疫抗M蛋白抗体（IgG）有保护作用，同时可能引发超敏反应性疾病型别间无交叉免疫，故常反复感染猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫（三）免疫性A群链球菌感染后，可产生特异免疫16三、微生物学检查法标本直接涂片革兰染色镜检分离培养取可疑菌落鉴定试验和药敏试验结果报告三、微生物学检查法标本直接涂片分离培养取可疑菌落鉴定试验和药17脓、痰、咽拭脑脊液血液增菌培养分离培养直接涂片染色※观察菌落及溶血现象※触酶试验（－）※

Optochin敏感试验肺炎链球菌B群链球菌马尿酸钠水解试验胆汁七叶苷A群链球菌D群链球菌肠球菌6.5％NaCl血清学分类※

ASO

test风湿热脓、痰、咽拭脑脊液血液增菌培养分离培养直接涂片染色※观察菌落18血清学检查抗“O”试验（ASOtest）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，在加入SLO乳胶试剂，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。原理：中和试验方法：间接凝集结果：※效价大于400单位意义：※链球菌新近感染的指标、

风湿热及其活动性的辅助诊断血清学检查抗“O”试验（ASOtest）：链球菌侵入体内产19预防

与葡萄球菌相似，对病人和带菌者及时治疗，减少传染源空气、器械、敷料等注意消毒。

流行期间每月注射长效青霉素

※对急性咽峡炎和扁桃体炎患者，尤其是儿童，须治疗彻底，

防止变态反应疾病的发生治疗

※青霉素、红霉素、磺胺药、林可霉素，青霉素首选。特殊治疗：外科清创，抗休克，抗毒素。四、防治原则预防与葡萄球菌相似，对病人和带菌者及时治疗，减少传染20总结1、金黄色葡萄球菌与链球菌如何鉴别？2、链球菌的致病物质有哪些？3、金黄色葡萄球菌与链球菌所引起的化脓性

感染有什么区别？原因是什么？4、什么是ASOtest？有何意义？5、A群链球菌可引起哪些疾病？6、链球菌如何分类？?总结1、金黄色葡萄球菌与链球菌如何鉴别？?21有关鉴别试验附加内容(一)溶血性检查

溶血性是鉴定球菌最常用的项目，也是鉴定过程中重要的一步。1919年Brown对溶血性进行了描述。溶血性的识别可在血平板表面菌落周围和穿刺处通过肉眼观察，也可用显微镜观察。除在分离血平板上观察菌落周围的溶血性外，还可用以下方法确认。

材料：羊血平板。

方法：将标本接种于羊血平板上，用接种针在已接种过的血平板上扎2～3处，使细菌被接种到琼脂层深处，35℃孵育过夜。

观察结果：在接种针穿刺过处，羊红细胞完全溶解，形成无色透明区，为β溶血。羊红细胞部分溶解或不溶解呈草绿色的环，为α溶血。不溶解无溶血环为γ溶血。(二)

Optochin敏感试验

材料：Optochin

(ethylhydrocupreine

HCI。)纸片(直径6mm)，每片含5μg。血平板。

方法：挑取被检菌落，涂在血平板上，贴

Optochin纸片于接种处，35℃，烛缸孵育18h。

观察结果：抑菌环直径≥14mm为敏感，推断肺炎链球菌。

抑菌环直径≤14mm时参照胆汁溶菌，或为其他草绿色链球菌。(三)

杆菌肽敏感试验

材料：含0.04U／片的杆菌肽纸片，血平板。

方法：挑取被检菌落，密涂于血平板上，接种量应大，以免出假阳性。贴上杆菌肽纸片，35℃过夜。

观察结果：形成抑菌环为敏感，则被检菌推断为A群链球菌。有关鉴别试验附加内容(一)溶血性检查

溶血性是鉴定球菌最常22有关鉴别试验附加内容(四)

CAMP试验

材料：血平板，金黄色葡萄球菌

ATCC25923。

方法：在血平板上，用金黄色葡萄球菌划种一条直线，再将被检菌距金黄色葡萄球菌

3mm处垂直接种一短线。用同样方法接种阴性和阳性对照菌。35℃孵育过夜。

观察结果：在被检菌接种线与金葡菌接种线之间有一个矢形(半月形)加强溶血区，此即CAMP试验阳性。阴性无加强溶血区。(五)

胆汁-七叶苷试验(平皿法或斜面法)

培养基：牛肉膏3g七叶苷1g蛋白胨5g枸橼酸铁0.5g胆盐40g蒸馏水

1000ml琼脂

1％

牛肉膏、蛋白胨和琼脂溶于400ml蒸馏水中，胆盐溶于400ml蒸馏水中，枸橼酸铁溶于l00ml蒸馏水中，三者混合，加热充分溶解后，高压灭菌121℃

15min。七叶苷溶于l00ml蒸馏水，过滤除菌，以无菌手续加到培养基中，倾倒平皿或斜面。

方法：接种被检菌1—3个菌落，涂划开，置35℃下，孵育24～48h。

观察结果：培养基变黑色或棕褐色为阳性，不变色为阴性。

注意事项：接种细菌量不能过大。本试验是测定细菌在胆盐中生长情况及同时分解七叶苷的能力，如接种菌量过大，细菌不需要生长而本身固有的酶足以造成七叶苷分解，出现假阳性结果。(六）马尿酸钠水解试验

(1)原理：某些细菌可具有马尿酸水解酶，可使马尿酸水解为苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸与三氯化铁试剂结合，形成苯甲酸铁沉淀。

(2)方法：将待检菌接种于马尿酸钠培养基中，置35℃孵育48h，离心沉淀，取上清液0.8ml，加入三氯化铁试剂0.2ml，立即混匀，经10~15min观察结果。

(3)结果：出现恒定之沉淀物为阳性。

应用：主要用于B群链球菌的鉴定。有关鉴别试验附加内容(四)

CAMP试验

材料：血平板，金23有关鉴别试验附加内容(七)七叶苷试验

培养基：蛋白胨

5g七叶苷

3gK2HPO4

1g枸橼酸铁

0.5g蒸馏水

1000ml

将上述成分加热溶解，分装试管，高压灭菌12rClomin。

方法：接种被检菌于培养基中，35℃过夜。

观察结果：培养基变黑为阳性，不变为阴性。(八)

6.5％NaCl生长试验

培养基

NaCl6.5g牛肉粉0.3g葡萄糖0.1g蛋白胨1g琼脂粉

1.8g蒸馏水

l00ml溴甲酚紫指示剂适量

调整pH7.4，121℃

15min灭菌后制成平皿或斜面。

方法：接种被检菌，35℃孵育过夜。

观察结果：培养基上生长出菌落并变黄色为阳性，不变色为阴性。

注意点：本试验是测定细菌在高盐中的生长能力，葡萄糖作为是否生长的指示剂。细菌接种量不能过大，否则细菌并不需要繁殖即可使葡萄糖产酸，培养基变色，导致假阳性结果。(九)

色素试验

色素试验在鉴定B群链球菌的几个方法中，特异性最好。这是Noble改良的Islam法。

培养基：淀粉10g胨23.0gNaH2PO41.48gNa2HP045.75g琼脂

l0g水

1000ml

调pH7.4，121℃15min灭菌后，加入

10ml灭活马血清，倾制平板或高层琼脂。接种细菌，35℃过夜培养。

观察结果：细菌菌落及周围的培养基呈黄色为阳性。

有关鉴别试验附加内容24病例3

男，20岁，学生。酗酒后遭雨淋，于当天晚上突然起病，寒颤、高热、呼吸困难、胸痛，继而咳嗽，咳铁锈色痰。听诊，左肺下叶有大量湿性啰音；触诊语颤增强；血常规：WBC：17X109/L（4-10X109/L）；X线检查，左肺下叶有大片致密阴影。经抗生素治疗，病情好转，各种症状逐渐消失；X线检查，左肺下叶的大片致密阴影缩小2/3面积。于入院后第7天自感无症状出院。1、患者发生了什么疾病？

2、从微生物学角度应该进行哪些检验以确定诊断？

病例3

男，20岁，学生。酗酒后25

第三节肺炎链球菌（S.pneumoniae）寄居于人的鼻咽腔中，一般不致病。

机体免疫力下降时可引起※细菌性肺炎。矛头状：平面相对尖面相背一、生物学性状

１、形态与染色

※有厚荚膜G+双球菌，病变组织中：单个或短链

无芽胞无鞭毛第三节肺炎链球菌（S.pneumoniae）矛26肺炎链球菌电镜图ScanningElectronMicrograph肺炎链球菌电镜图ScanningElectronMicr27分解葡萄糖，乳糖※菊糖（+）2、培养特性营养要求较高，常用血培养，菌落灰白色细小半透明，与甲链相似，※周围有α溶血，培育时间＞48小时，※能产生自溶酶，菌落曾脐状3、生化反应

※胆汁溶菌（+）4、抗原结构：荚膜多糖抗原（型特异性，90型）

菌体抗原（M蛋白、C多糖）

5、抵抗力：较弱分解葡萄糖，乳糖2、培养特性营养要求较高，常用血培养，菌落灰28二、致病性与免疫性※荚膜→有荚膜菌株才能引起人致病

肺炎链球菌溶素O(pneumolysinO):

抑制中性粒细胞的趋化及吞噬作用

脂磷壁酸：粘附※建立较牢固的同型免疫产生型特异的荚膜多糖抗体※大叶性肺炎

肺炎可累及某一整个肺叶(大叶性肺炎)；某一肺叶的某一肺段(段性或小叶性肺炎)；邻近支气管的肺泡(支气管肺炎)或间质组织(间质性肺炎)。这些区别一般根据X线表现划分。中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎、

脑膜炎、败血症

（二）所致疾病（三）免疫性（一）致病物质二、致病性与免疫性※荚膜→有荚膜菌株才能引起人致病

肺炎链球29三、微生物学检查方法方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检初步报告:“查见革兰阳性矛尖状双球菌，有荚膜，疑似肺炎链球菌”分离培养与鉴定：血平板→可以菌落→胆汁溶菌试验、菊糖发酵试验动物试验：

有毒力肺炎球菌

高度易感小鼠，

24h死亡。甲链

小鼠不死亡。

三、微生物学检查方法方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜30※肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别菌名形态菌落胆汁溶菌Optochin菊糖分解小白鼠毒力肺链矛尖状、成双排列、有荚膜脐窝状、草绿色溶血环+++/－+甲链圆形、短链、无荚膜针尖状、草绿色溶血环－－－－※肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别菌名形态菌落胆汁Optoc31四、防治原则：多价肺炎球菌荚膜多糖疫苗

（含有23个型别）根据药敏试验选择抗生素四、防治原则：多价肺炎球菌荚膜多糖疫苗

（含有23个型别）根32总结肺炎链球菌结构特点？培养特点？如何区别肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌？肺炎链球菌主要的致病物质是什么？可引起什么疾病？?总结肺炎链球菌结构特点？培养特点？?33病例4男性，2岁，于2天前发热达39℃，伴哭闹，易激惹，呕吐2次，喷射性，以“发热呕吐”待查收入院。近2天来精神萎靡，二便正常，吃奶稍差。查体:T39.2℃，右眼结膜及全身皮肤有针头至绿豆大小不等的红色出血点，咽微红，精神差，易激惹，前囟张力稍高，眼神欠灵活，颈硬。脑脊液检查：外观混浊，白细胞总数22×109/L，中性多核粒细胞96%，淋巴细胞4%。将脑脊液离心沉淀后取沉渣涂片，革兰染色检查，发现白细胞内外均有革兰阴性双球菌。克氏征(+)。（屈髓伸膝试验，患者仰卧位使膝关节屈曲成直角，然后被动使屈曲的小腿伸直，当膝关节不能伸直，出现阻力及疼痛而膝关节形成的角度不到135°时为克氏征阳性）。

1、引起本病最可能的病菌是什么？2、该菌是如何传播的？所致疾病怎样进行特异性预防？

病例4男性，2岁，于2天前发热达39℃，伴哭闹，易激34第四节脑膜炎奈瑟菌(Neisseriameningitidis)

一、生物学性状

1、形态与染色G-双球菌，无鞭毛，无芽胞，新分离株大多有荚膜和菌毛；※在患者脑脊液中多位于中性粒细胞内。2、培养特性与生化反应专性需氧菌，※巧克力平板，在5%-10%CO2条件下生长更佳。＜30℃或＞40℃不生长；菌落无色、透明、露滴状、光滑型、不溶血；能产生自溶酶。分解葡萄糖、麦芽糖，氧化酶和触酶试验（+）第四节脑膜炎奈瑟菌(Neisseriame353、抗原构造与分类荚膜多糖抗原群特异性，分为13群，我国95%由A群引起外膜蛋白抗原型特异性，1-5类，2和3类用于分型

1和5用于分亚型脂寡糖抗原外膜脂多糖缺乏多糖侧链，只有寡糖重复单位4、抵抗力：

※很弱，对青霉素敏感，对磺胺普遍耐药四怕

热力寒冷干燥消毒剂3、抗原构造与分类荚膜多糖抗原群特异性，分为13群，36二、致病性与免疫性（一）致病物质主要是内毒素荚膜：抗吞噬菌毛：介导粘附（二）所致疾病※流行性脑脊髓膜炎

传染源：病人和带菌者

传播途径：飞沫

易感人群：5岁以下儿童（三）免疫性体液免疫为主（抗荚膜多糖抗体、抗外膜蛋白抗体）三种临床类型：普通型、暴发型、慢性败血症型

临床症状：※头疼、喷射状呕吐、颈强，紫癜、

循环衰竭、休克、DIC、死亡率40-60%发热、内皮细胞损伤、

血管栓塞和出血、

皮疹、瘀斑、

中毒性休克、DIC二、致病性与免疫性（一）致病物质主要是内毒素（二）所致疾病※37三、微生物学检查标本分离培养与鉴定脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭保暖、保湿、立即送检，培养基预温直接涂片镜检脑脊液检查：※中性粒细胞内、

外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。

瘀斑检查：制成印片，革兰染色，阳性率80%巧克力（色）培养基快速诊断对流免疫电泳，SPA协同凝集试验金葡菌三、微生物学检查标本分离培养与鉴定脑脊液、血液、出血点渗出液38

四、防治原则儿童注射流脑荚膜多糖疫苗进行特异性预防（常用A、C二价或A、C、Y和W135混合)治疗采用青霉素等抗生素四、防治原则儿童注射流脑荚膜多糖疫苗进行特异性预39总结脑膜炎奈瑟菌形态、培养特点及抵抗力？脑膜炎奈瑟菌主要的致病物质？所致疾病？疾病临床特点？感染流行性脑脊髓膜炎的微生物学检查方法？?总结脑膜炎奈瑟菌形态、培养特点及抵抗力？?40病例5某男，43岁，来院就诊，一日前无明显原因尿痛、尿频、尿道分泌物增多，伴腰痛，要求检查治疗。经查尿道口红肿，挤压尿道可见少量黄色分泌物流出，经化验检查：NG（+），UU（—），CT（—）。诊断为慢性淋病急性发作。给药舒美特、头孢曲松钠、淋必治。半月后前来复查，症状消失，化验检查：NG（—），UU（—），CT（—）。痊愈。注：NG（淋球菌）

UU（解脲脲原体）

CT（沙眼衣原体）病例5某男，43岁，来院就诊，一日前无明显原因尿痛、尿频41第五节淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）革兰阴性双球菌似一对咖啡豆无芽胞和鞭毛，※有荚膜和菌毛专性需氧，5-10%CO2，※最适PH7.5，最适温度35-36℃，巧克力（色）血琼脂平板上形成灰白光滑小菌落培养特性形态与染色生化反应抵抗力与脑膜炎奈瑟菌类似对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感

※

1%硝酸银1min内死亡只分解葡萄糖，产酸，氧化酶试验（+）抗原结构菌毛蛋白抗原、脂寡糖抗原、外膜蛋白抗原第五节淋病奈瑟菌（N.gonorrho42菌毛、外膜蛋白IgA1蛋白酶、内毒素※淋病※人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症

尿频尿痛、尿道及生殖道流脓，可导致不育新生儿淋菌性结膜炎由产道感染、脓漏眼致病物质所致疾病菌毛、外膜蛋白※淋病※人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主主要通过性接43人类对淋病奈瑟菌的感染无天然抵抗力感染后出现特异性抗体，但免疫力不持久免疫性微生物学检查法标本用无菌棉拭沾取脓性分泌物，注意保暖保湿，立即送检直接涂片镜检中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌有诊断价值分离培养与鉴定巧克力色平板，5-10%二氧化碳人类对淋病奈瑟菌的感染无天然抵抗力免疫性微生物学检查法标本用44防开展防治性病的知识教育防止不正当的两性关系

目前尚无有效的疫苗供特异性预防治药敏指导临床用药

对淋病患者及时彻底治疗，性接触者也应治疗新生儿1%硝酸银滴眼防治原则防开展防治性病的知识教育防止不正当的两性关系

目前尚无有效45总结淋球菌形态、培养特点及抵抗力？淋球菌主要的致病物质？所致疾病？疾病临床特点？淋球菌的微生物学检查方法？如何防治淋病？?总结淋球菌形态、培养特点及抵抗力？?46病例2李某，男，16岁，因发烧、浮肿、血尿入院。自幼时常咽喉痛、发烧，曾因心脏杂音卧床一个月。入院前3周又因咽痛发烧而注射青霉素数日，症状消失，入院前两日高热，血尿。查体：T39℃，血压稍高，眼睑及下肢浮肿。实验室检查：尿RBC+++，尿蛋白+++，ASO抗体800单位。

思考题：1．本病怀疑为什么疾病？2．从微生物学角度应进行哪些检查？3.此致病菌致病物质有哪些？引起本病的机制？病例2李某，男，16岁，因发烧、浮肿、血尿入院。自幼47第二节链球菌属(Streptococcus）自然界、人及动物粪便和健康人鼻咽部，G+，是化脓性细菌中常见的一大类，多数不致病，※90%感染由A群链球菌引起。猪链球菌（S.suis）为动物源性病原体，世界分布，最常见对人和动物致病的为Ⅱ型，引起脑膜炎、败血症、心内膜炎及中毒性休克等。第二节链球菌属(Streptococcus）自然界48一、生物学性状

1、形态与染色:

0.6-1μm，G+，球形，链状排列，液体培养基

中链较长，

※幼龄期菌有荚膜（透明质酸），

有菌毛样结构，含型特异M蛋白α与β溶血2、培养特性：营养要求高：血平板或含血清、葡萄糖培养基需氧、兼性厌氧，液体培养为※絮状沉淀生长※血平板呈灰白色表面光滑小菌落，

不同菌株溶血不一一、生物学性状

α与β溶血2、培养特性：营养要求高：血平板或493、生化反应分解葡萄糖只产酸※触酶试验（－）（与葡萄球菌鉴别）※不分解菊糖，不被胆汁溶解（鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）3、生化反应分解葡萄糖只产酸50

4、根据抗原构造分类群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗原，可将链球菌分为20群（A-H、K-T、U、V等），引起人类感染的链球菌90％为A群。(溶血性链球菌或化脓性链球菌）群别与溶血性之间无平行关系。型特异性抗原（表面抗原）：细胞壁蛋白抗原，有M、T、R、S四种，根据M抗原不同，可将A群分为100型。荚膜细胞壁蛋白质多糖肽聚糖细胞膜细胞质4、根据抗原构造分类群特异性抗原（C抗原）：细胞壁多糖抗原，515、※根据溶血现象分类：溶血现象名称类别致病性草绿色溶血溶血甲型溶血性链球菌

α-hemolyticstreptococcus多为条件致病菌完全溶血

溶血乙型溶血性链球菌

β-hemolyticstreptococcus致病力强不溶血γ溶血丙型链球菌

γ-streptococcus一般无致病性6、抵抗力不强，加热60℃30min被杀死，对消毒剂、抗生素敏感，特别是青霉素。5、※根据溶血现象分类：溶血现象名称类别致病性草绿色溶血溶52二、致病性与免疫性（一）致病物质和发病机制

1、菌体胞壁成分

（1）脂磷壁酸（LTA）：细菌定植于皮肤和呼

吸道粘膜

（2）F蛋白：与上皮细胞表面纤维粘连蛋白结

合，利于定植和繁殖

（3）M蛋白：抗吞噬和抵抗吞噬细胞内杀菌，

※与肾小球基底膜、心肌细胞有

共同抗原成分，与Ⅱ、Ⅲ超敏反应性疾病有关

二、致病性与免疫性532、链球菌溶素（streptolysin）：溶解红细胞、破坏白细胞和血小板

（1）SLO：对O2敏感，为含有-SH的蛋白质，被氧化后失去溶血活性，加入还原剂可逆转；抗原性强，刺激机体产生抗O抗体，※测定SLO抗体含量，可作为链球菌新近感染指标之一或风湿热及其活动性的辅助诊断；动物试验又证实对心脏有急性毒害作用（2）SLS：对O2稳定，小分子的糖肽，引起β溶血，无免疫原性；对热、酸敏感，不易保存；动物静注迅速致死，注射小鼠腹腔，引起肾小管坏死。

2、链球菌溶素（streptolysin）：溶解红细胞、破543、致热外毒素SPE

（streptococcalpyrogenicexotoxin）：

红疹毒素或猩红热毒素，※A群链球菌溶原性菌株产生，耐热的蛋白质，引起猩红热（scarletfever），为急性呼吸道传染病，临床特征为发热、咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的明显脱屑；该毒素还有内毒素样的致热作用，对细胞或组织有损害作用。可分为A、B、C、F4四种不同抗原性的毒素，无交叉保护作用。

3、致热外毒素SPE

（streptococcal554、侵袭性酶:※利于细菌在局部化脓性炎中扩散

（1）透明质酸酶：扩散因子，分解细胞间透明质

酸；（2）链激酶：使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋

白酶，溶解血块或阻止血浆凝固；（3）链道酶：降解脓液中高度粘稠的DNA，使脓

液稀薄；（4）胶原酶：溶解胶原纤维4、侵袭性酶:※利于细菌在局部化脓性炎中扩散

（1）透明质56（二）所致疾病：复杂而多样※A群链球菌淋巴结炎猩红热超敏反应性疾病化脓性感染中毒性疾病蜂窝组织炎脓疱疮咽炎扁桃体炎丹毒风湿热急性肾小球肾炎脓疱疮颈淋巴结炎扁桃体炎面部丹毒急性期丹毒恢复期蜂窝组织炎（由皮肤伤口侵入）（二）所致疾病：复杂而多样※A群链球菌淋巴结炎猩红热超敏57※猩红热：急性呼吸道传染病，临床特征为发热、

咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的

明显脱屑，口周苍白、草莓舌、杨梅舌

※猩红热：急性呼吸道传染病，临床特征为发热、

58

风湿热:

咽炎后发生，以关节炎、心肌炎为主。

※发病机制:

(1)M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物,沉积于心瓣膜和

关节滑膜引起Ⅲ型超敏反应

(2)链球菌多糖抗原与心瓣膜有共同抗原，引起Ⅱ型超敏反应

急性肾小球肾炎：多见于儿童和少年，扁桃

体炎和咽炎后均可发生，

蛋白尿、浮肿和高血压。

※发病机制:

(1)M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物,沉积于

肾小球基底膜引起Ⅲ型超敏反应

(2)链球菌的某些抗原与肾小球基底膜有共同抗

原，机体针对链球菌所产生的抗体与肾小球

基底膜发生反应，引发基底膜损伤，属Ⅱ型

变态反应。

风湿热:咽炎后发生，以关节炎、心肌炎为主。

※发病机59甲型链球菌人类口腔和上呼吸道的正常菌群，在拔牙或摘除扁桃体时，寄居在口腔、龈缝中的草绿色链球菌可侵入血流引起菌血症。若心脏瓣膜已有缺陷或损伤，本菌可在损伤部位繁殖，引起亚急性细菌性心内膜炎。

变异链球菌与龋齿有关D群链球菌条件致病菌，正常寄居于皮肤、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道。可引起尿路感染、腹部感染、败血症、心内膜炎。B群链球菌条件致病菌，正常寄居于直肠、阴道、鼻咽部。可引起皮肤感染、心内膜炎、产后感染、新生儿败血症和新生儿脑膜炎。甲型链球菌人类口腔和上呼吸道的正常菌群，在拔牙或摘除扁桃体时60猪链球菌病

急性的常为出血性败血症和脑炎，慢性的以关节炎、心内膜炎为特点，临床上以淋巴结脓肿为常见。一年四季均可发生，以5—11月份较多。常为地方性流行，多呈败血型，如不进行防治，则发病率、病死率很高，病猪和带菌猪是主要传染源，可以通过伤口、消化道、呼吸道等途径传染给人。

猪链球菌病属国家规定的二类动物疫病，是一种人畜共患传染病。猪链球菌病

猪链球菌病属国家规定的二类动物疫病，是一种人61（三）免疫性A群链球菌感染后，可产生特异免疫抗M蛋白抗体（IgG）有保护作用，同时可能引发超敏反应性疾病型别间无交叉免疫，故常反复感染猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫（三）免疫性A群链球菌感染后，可产生特异免疫62三、微生物学检查法标本直接涂片革兰染色镜检分离培养取可疑菌落鉴定试验和药敏试验结果报告三、微生物学检查法标本直接涂片分离培养取可疑菌落鉴定试验和药63脓、痰、咽拭脑脊液血液增菌培养分离培养直接涂片染色※观察菌落及溶血现象※触酶试验（－）※

Optochin敏感试验肺炎链球菌B群链球菌马尿酸钠水解试验胆汁七叶苷A群链球菌D群链球菌肠球菌6.5％NaCl血清学分类※

ASO

test风湿热脓、痰、咽拭脑脊液血液增菌培养分离培养直接涂片染色※观察菌落64血清学检查抗“O”试验（ASOtest）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，在加入SLO乳胶试剂，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。原理：中和试验方法：间接凝集结果：※效价大于400单位意义：※链球菌新近感染的指标、

风湿热及其活动性的辅助诊断血清学检查抗“O”试验（ASOtest）：链球菌侵入体内产65预防

与葡萄球菌相似，对病人和带菌者及时治疗，减少传染源空气、器械、敷料等注意消毒。

流行期间每月注射长效青霉素

※对急性咽峡炎和扁桃体炎患者，尤其是儿童，须治疗彻底，

防止变态反应疾病的发生治疗

※青霉素、红霉素、磺胺药、林可霉素，青霉素首选。特殊治疗：外科清创，抗休克，抗毒素。四、防治原则预防与葡萄球菌相似，对病人和带菌者及时治疗，减少传染66总结1、金黄色葡萄球菌与链球菌如何鉴别？2、链球菌的致病物质有哪些？3、金黄色葡萄球菌与链球菌所引起的化脓性

感染有什么区别？原因是什么？4、什么是ASOtest？有何意义？5、A群链球菌可引起哪些疾病？6、链球菌如何分类？?总结1、金黄色葡萄球菌与链球菌如何鉴别？?67有关鉴别试验附加内容(一)溶血性检查

溶血性是鉴定球菌最常用的项目，也是鉴定过程中重要的一步。1919年Brown对溶血性进行了描述。溶血性的识别可在血平板表面菌落周围和穿刺处通过肉眼观察，也可用显微镜观察。除在分离血平板上观察菌落周围的溶血性外，还可用以下方法确认。

材料：羊血平板。

方法：将标本接种于羊血平板上，用接种针在已接种过的血平板上扎2～3处，使细菌被接种到琼脂层深处，35℃孵育过夜。

观察结果：在接种针穿刺过处，羊红细胞完全溶解，形成无色透明区，为β溶血。羊红细胞部分溶解或不溶解呈草绿色的环，为α溶血。不溶解无溶血环为γ溶血。(二)

Optochin敏感试验

材料：Optochin

(ethylhydrocupreine

HCI。)纸片(直径6mm)，每片含5μg。血平板。

方法：挑取被检菌落，涂在血平板上，贴

Optochin纸片于接种处，35℃，烛缸孵育18h。

观察结果：抑菌环直径≥14mm为敏感，推断肺炎链球菌。

抑菌环直径≤14mm时参照胆汁溶菌，或为其他草绿色链球菌。(三)

杆菌肽敏感试验

材料：含0.04U／片的杆菌肽纸片，血平板。

方法：挑取被检菌落，密涂于血平板上，接种量应大，以免出假阳性。贴上杆菌肽纸片，35℃过夜。

观察结果：形成抑菌环为敏感，则被检菌推断为A群链球菌。有关鉴别试验附加内容(一)溶血性检查

溶血性是鉴定球菌最常68有关鉴别试验附加内容(四)

CAMP试验

材料：血平板，金黄色葡萄球菌

ATCC25923。

方法：在血平板上，用金黄色葡萄球菌划种一条直线，再将被检菌距金黄色葡萄球菌

3mm处垂直接种一短线。用同样方法接种阴性和阳性对照菌。35℃孵育过夜。

观察结果：在被检菌接种线与金葡菌接种线之间有一个矢形(半月形)加强溶血区，此即CAMP试验阳性。阴性无加强溶血区。(五)

胆汁-七叶苷试验(平皿法或斜面法)

培养基：牛肉膏3g七叶苷1g蛋白胨5g枸橼酸铁0.5g胆盐40g蒸馏水

1000ml琼脂

1％

牛肉膏、蛋白胨和琼脂溶于400ml蒸馏水中，胆盐溶于400ml蒸馏水中，枸橼酸铁溶于l00ml蒸馏水中，三者混合，加热充分溶解后，高压灭菌121℃

15min。七叶苷溶于l00ml蒸馏水，过滤除菌，以无菌手续加到培养基中，倾倒平皿或斜面。

方法：接种被检菌1—3个菌落，涂划开，置35℃下，孵育24～48h。

观察结果：培养基变黑色或棕褐色为阳性，不变色为阴性。

注意事项：接种细菌量不能过大。本试验是测定细菌在胆盐中生长情况及同时分解七叶苷的能力，如接种菌量过大，细菌不需要生长而本身固有的酶足以造成七叶苷分解，出现假阳性结果。(六）马尿酸钠水解试验

(1)原理：某些细菌可具有马尿酸水解酶，可使马尿酸水解为苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸与三氯化铁试剂结合，形成苯甲酸铁沉淀。

(2)方法：将待检菌接种于马尿酸钠培养基中，置35℃孵育48h，离心沉淀，取上清液0.8ml，加入三氯化铁试剂0.2ml，立即混匀，经10~15min观察结果。

(3)结果：出现恒定之沉淀物为阳性。

应用：主要用于B群链球菌的鉴定。有关鉴别试验附加内容(四)

CAMP试验

材料：血平板，金69有关鉴别试验附加内容(七)七叶苷试验

培养基：蛋白胨

5g七叶苷

3gK2HPO4

1g枸橼酸铁

0.5g蒸馏水

1000ml

将上述成分加热溶解，分装试管，高压灭菌12rClomin。

方法：接种被检菌于培养基中，35℃过夜。

观察结果：培养基变黑为阳性，不变为阴性。(八)

6.5％NaCl生长试验

培养基

NaCl6.5g牛肉粉0.3g葡萄糖0.1g蛋白胨1g琼脂粉

1.8g蒸馏水

l00ml溴甲酚紫指示剂适量

调整pH7.4，121℃

15min灭菌后制成平皿或斜面。

方法：接种被检菌，35℃孵育过夜。

观察结果：培养基上生长出菌落并变黄色为阳性，不变色为阴性。

注意点：本试验是测定细菌在高盐中的生长能力，葡萄糖作为是否生长的指示剂。细菌接种量不能过大，否则细菌并不需要繁殖即可使葡萄糖产酸，培养基变色，导致假阳性结果。(九)

色素试验

色素试验在鉴定B群链球菌的几个方法中，特异性最好。这是Noble改良的Islam法。

培养基：淀粉10g胨23.0gNaH2PO41.48gNa2HP045.75g琼脂

l0g水

1000ml

调pH7.4，121℃15min灭菌后，加入

10ml灭活马血清，倾制平板或高层琼脂。接种细菌，35℃过夜培养。

观察结果：细菌菌落及周围的培养基呈黄色为阳性。

有关鉴别试验附加内容70病例3

男，20岁，学生。酗酒后遭雨淋，于当天晚上突然起病，寒颤、高热、呼吸困难、胸痛，继而咳嗽，咳铁锈色痰。听诊，左肺下叶有大量湿性啰音；触诊语颤增强；血常规：WBC：17X109/L（4-10X109/L）；X线检查，左肺下叶有大片致密阴影。经抗生素治疗，病情好转，各种症状逐渐消失；X线检查，左肺下叶的大片致密阴影缩小2/3面积。于入院后第7天自感无症状出院。1、患者发生了什么疾病？

2、从微生物学角度应该进行哪些检验以确定诊断？

病例3

男，20岁，学生。酗酒后71

第三节肺炎链球菌（S.pneumoniae）寄居于人的鼻咽腔中，一般不致病。

机体免疫力下降时可引起※细菌性肺炎。矛头状：平面相对尖面相背一、生物学性状

１、形态与染色

※有厚荚膜G+双球菌，病变组织中：单个或短链

无芽胞无鞭毛第三节肺炎链球菌（S.pneumoniae）矛72肺炎链球菌电镜图ScanningElectronMicrograph肺炎链球菌电镜图ScanningElectronMicr73分解葡萄糖，乳糖※菊糖（+）2、培养特性营养要求较高，常用血培养，菌落灰白色细小半透明，与甲链相似，※周围有α溶血，培育时间＞48小时，※能产生自溶酶，菌落曾脐状3、生化反应

※胆汁溶菌（+）4、抗原结构：荚膜多糖抗原（型特异性，90型）

菌体抗原（M蛋白、C多糖）

5、抵抗力：较弱分解葡萄糖，乳糖2、培养特性营养要求较高，常用血培养，菌落灰74二、致病性与免疫性※荚膜→有荚膜菌株才能引起人致病

肺炎链球菌溶素O(pneumolysinO):

抑制中性粒细胞的趋化及吞噬作用

脂磷壁酸：粘附※建立较牢固的同型免疫产生型特异的荚膜多糖抗体※大叶性肺炎

肺炎可累及某一整个肺叶(大叶性肺炎)；某一肺叶的某一肺段(段性或小叶性肺炎)；邻近支气管的肺泡(支气管肺炎)或间质组织(间质性肺炎)。这些区别一般根据X线表现划分。中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎、

脑膜炎、败血症

（二）所致疾病（三）免疫性（一）致病物质二、致病性与免疫性※荚膜→有荚膜菌株才能引起人致病

肺炎链球75三、微生物学检查方法方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检初步报告:“查见革兰阳性矛尖状双球菌，有荚膜，疑似肺炎链球菌”分离培养与鉴定：血平板→可以菌落→胆汁溶菌试验、菊糖发酵试验动物试验：

有毒力肺炎球菌

高度易感小鼠，

24h死亡。甲链

小鼠不死亡。

三、微生物学检查方法方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜76※肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别菌名形态菌落胆汁溶菌Optochin菊糖分解小白鼠毒力肺链矛尖状、成双排列、有荚膜脐窝状、草绿色溶血环+++/－+甲链圆形、短链、无荚膜针尖状、草绿色溶血环－－－－※肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别菌名形态菌落胆汁Optoc77四、防治原则：多价肺炎球菌荚膜多糖疫苗

（含有23个型别）根据药敏试验选择抗生素四、防治原则：多价肺炎球菌荚膜多糖疫苗

（含有23个型别）根78总结肺炎链球菌结构特点？培养特点？如何区别肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌？肺炎链球菌主要的致病物质是什么？可引起什么疾病？?总结肺炎链球菌结构特点？培养特点？?79病例4男性，2岁，于2天前发热达39℃，伴哭闹，易激惹，呕吐2次，喷射性，以“发热呕吐”待查收入院。近2天来精神萎靡，二便正常，吃奶稍差。查体:T39.2℃，右眼结膜及全身皮肤有针头至绿豆大小不等的红色出血点，咽微红，精神差，易激惹，前囟张力稍高，眼神欠灵活，颈硬。脑脊液检查：外观混浊，白细胞总数22×109/L，中性多核粒细胞96%，淋巴细胞4%。将脑脊液离心沉淀后取沉渣涂片，革兰染色检查，发现白细胞内外均有革兰阴性双球菌。克氏征(+)。（屈髓伸膝试验，患者仰卧位使膝关节屈曲成直角，然后被动使屈曲的小腿伸直，当膝关节不能伸直，出现阻力及疼痛而膝关节形成的角度不到135°时为克氏征阳性）。

1、引起本病最可能的病菌是什么？2、该菌是如何传播的？所致疾病怎样进行特异性预防？

病例4男性，2岁，于2天前发热达39℃，伴哭闹，易激80第四节脑膜炎奈瑟菌(Neisseriameningitidis)

一、生物学性状

1、形态与染色G-双球菌，无鞭毛，无芽胞，新分离株大多有荚膜和菌毛；※在患者